王敏:人乳腺癌原代细胞组织块培养方法的改良及其鉴定论文

王敏:人乳腺癌原代细胞组织块培养方法的改良及其鉴定论文

本文主要研究内容

作者王敏,陆祥,曾峰,檀军,侯泽宇,陈伟(2019)在《人乳腺癌原代细胞组织块培养方法的改良及其鉴定》一文中研究指出:目的通过对人乳腺癌原代细胞组织块培养方法进行改良,建立一种快速高效可获得高纯度的人乳腺癌细胞原代培养方法,为乳腺癌深入研究提供实验基础。方法取经临床病理诊断确诊为乳腺导管原位癌患者的癌组织标本,所有样本随机分为改良组(全程正置培养瓶进行培养,原代细胞铺满瓶底50%左右,用延长酶消化时间差法一次性纯化原代细胞)和传统组(翻转培养瓶倒置孵箱1~2 h后,再正置培养瓶培养,原代细胞铺满瓶底80%~100%时,用反复酶消化时间差法纯化原代细胞)。在倒置显微镜下观察,比较两组原代细胞爬出时间、爬出数量和贴壁生长情况;细胞计数比较两组组织块培养7 d后获得贴壁细胞总数;免疫组化和流式细胞术鉴定、比较两组纯化后原代细胞的纯度;MTT法检测两组纯化培养48 h后贴壁细胞的活性。结果经改良组织块培养法2 d后,见大量细胞从组织块四周爬出,培养3 d后见爬出原代细胞贴壁生长,胞质展开,培养5 d后见细胞融合贴壁生长,铺满瓶底50%左右;而传统组织块培养法培养2 d后见少量细胞爬出,培养5 d才见少量细胞贴壁生长,培养10d后原代细胞方可铺满瓶底50%左右;人乳腺癌原代细胞培养7 d贴壁细胞总量,改良组为(9.88±0.20)×10~5个,传统组为(4.88±0.21)×10~5个;纯化后改良组细胞纯度为(99.13±0.06)%,传统组为(75.72±4.96)%;纯化培养48 h后贴壁原代细胞活性改良组为(0.86±0.03),传统组为(0.47±0.01),以上观察指标均明显高于传统组织块培养方法,有统计学意义(P<0.05)。获得的贴壁人乳腺癌原代细胞胞质展开,多呈扁平多边形,细胞体积较大,细胞核多位于细胞中央,相互衔接后呈典型的"铺路石"状,细胞结合紧密,生长分裂旺盛。结论本实验成功建立了一种高效快速获得高纯度的人原代乳腺癌细胞原代培养的方法,为进一步的实验研究奠定基础。

Abstract

mu de tong guo dui ren ru xian ai yuan dai xi bao zu zhi kuai pei yang fang fa jin hang gai liang ,jian li yi chong kuai su gao xiao ke huo de gao chun du de ren ru xian ai xi bao yuan dai pei yang fang fa ,wei ru xian ai shen ru yan jiu di gong shi yan ji chu 。fang fa qu jing lin chuang bing li zhen duan que zhen wei ru xian dao guan yuan wei ai huan zhe de ai zu zhi biao ben ,suo you yang ben sui ji fen wei gai liang zu (quan cheng zheng zhi pei yang ping jin hang pei yang ,yuan dai xi bao pu man ping de 50%zuo you ,yong yan chang mei xiao hua shi jian cha fa yi ci xing chun hua yuan dai xi bao )he chuan tong zu (fan zhuai pei yang ping dao zhi fu xiang 1~2 hhou ,zai zheng zhi pei yang ping pei yang ,yuan dai xi bao pu man ping de 80%~100%shi ,yong fan fu mei xiao hua shi jian cha fa chun hua yuan dai xi bao )。zai dao zhi xian wei jing xia guan cha ,bi jiao liang zu yuan dai xi bao pa chu shi jian 、pa chu shu liang he tie bi sheng chang qing kuang ;xi bao ji shu bi jiao liang zu zu zhi kuai pei yang 7 dhou huo de tie bi xi bao zong shu ;mian yi zu hua he liu shi xi bao shu jian ding 、bi jiao liang zu chun hua hou yuan dai xi bao de chun du ;MTTfa jian ce liang zu chun hua pei yang 48 hhou tie bi xi bao de huo xing 。jie guo jing gai liang zu zhi kuai pei yang fa 2 dhou ,jian da liang xi bao cong zu zhi kuai si zhou pa chu ,pei yang 3 dhou jian pa chu yuan dai xi bao tie bi sheng chang ,bao zhi zhan kai ,pei yang 5 dhou jian xi bao rong ge tie bi sheng chang ,pu man ping de 50%zuo you ;er chuan tong zu zhi kuai pei yang fa pei yang 2 dhou jian shao liang xi bao pa chu ,pei yang 5 dcai jian shao liang xi bao tie bi sheng chang ,pei yang 10dhou yuan dai xi bao fang ke pu man ping de 50%zuo you ;ren ru xian ai yuan dai xi bao pei yang 7 dtie bi xi bao zong liang ,gai liang zu wei (9.88±0.20)×10~5ge ,chuan tong zu wei (4.88±0.21)×10~5ge ;chun hua hou gai liang zu xi bao chun du wei (99.13±0.06)%,chuan tong zu wei (75.72±4.96)%;chun hua pei yang 48 hhou tie bi yuan dai xi bao huo xing gai liang zu wei (0.86±0.03),chuan tong zu wei (0.47±0.01),yi shang guan cha zhi biao jun ming xian gao yu chuan tong zu zhi kuai pei yang fang fa ,you tong ji xue yi yi (P<0.05)。huo de de tie bi ren ru xian ai yuan dai xi bao bao zhi zhan kai ,duo cheng bian ping duo bian xing ,xi bao ti ji jiao da ,xi bao he duo wei yu xi bao zhong yang ,xiang hu xian jie hou cheng dian xing de "pu lu dan "zhuang ,xi bao jie ge jin mi ,sheng chang fen lie wang cheng 。jie lun ben shi yan cheng gong jian li le yi chong gao xiao kuai su huo de gao chun du de ren yuan dai ru xian ai xi bao yuan dai pei yang de fang fa ,wei jin yi bu de shi yan yan jiu dian ding ji chu 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自遵义医学院学报的王敏,陆祥,曾峰,檀军,侯泽宇,陈伟,发表于刊物遵义医学院学报2019年04期论文,是一篇关于乳腺癌细胞论文,原代培养技术论文,原代细胞纯化论文,鉴定论文,遵义医学院学报2019年04期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自遵义医学院学报2019年04期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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