首页> 正文

金雀异黄素诱导斑马鱼肝细胞合成VTG的作用机理研究

2020-12-17阅读(700)

金雀异黄素诱导斑马鱼肝细胞合成VTG的作用机理研究

论文摘要

金雀异黄素（Genistein,4’,5,7-三羟基异黄酮）富集于水体和饵料中,能够显著促进鱼类卵黄原蛋白（VTG）的生成,但其诱导鱼类VTG表达的作用机理还不明确。本文以模式生物斑马鱼（Danio rerio）原代培养肝细胞为实验材料,以特异性拮抗剂阻断雌激素受体（ERs）或其亚型（ERα或ERβ）,研究了雌激素受体在金雀异黄素诱导斑马鱼原代肝细胞vtg-1 mRNA合成中的作用;通过检测金雀异黄素对斑马鱼原代肝细胞中ERαmRNA和ERβmRNA表达水平的影响,进一步探讨了金雀异黄素是否通过提高ERs的合成来诱导vtg的转录;并对过氧化物酶体增生物激活受体（PPARs）是否参与金雀异黄素对vtg转录表达的诱导作用进行了初步的研究。研究结果如下:（1） 11000μmol/L金雀异黄素可剂量性诱导雄性斑马鱼离体肝细胞合成vtg-1 mRNA,其中1000μmol/L的金雀异黄素诱导作用与1μmol/L的17β-雌二醇（E2）接近,证明了金雀异黄素具有弱雌激素活性,约为E2的千分之一。（2）采用雌激素受体特异性拮抗剂（ICI 182780）与1000μmol/L金雀异黄素联合暴露雄性斑马鱼原代肝细胞48h后,发现vtg-1 mRNA的相对表达量显著下降,金雀异黄素对vtg-1 mRNA的诱导作用被显著抑制,结果证实金雀异黄素是通过雌激素受体途径诱导斑马鱼原代肝细胞产生VTG。（3）采用ERβ的特异性拮抗剂（美服培酮）与1000μmol/L金雀异黄素联合暴露雄性斑马鱼原代肝细胞48 h后,vtg-1 mRNA的表达几乎完全被抑制。ERα的特异性拮抗剂（雷洛昔芬）与1000μmol/L金雀异黄素联合暴露雄性斑马鱼原代肝细胞48 h则对vtg-1 mRNA的转录有部分抑制作用。结果表明金雀异黄素主要通过ERβ介导对斑马鱼肝细胞VTG的诱导作用,ERα也部分参与了对VTG合成的介导作用。（4）进一步研究金雀异黄素对斑马鱼原代肝细胞ERs合成的影响,结果显示1000μmol/L金雀异黄素显著促进了ERαmRNA和ERβmRNA的转录,但ERβ的表达量远高于ERα,约为ERα的1.9倍。说明金雀异黄素可通过诱导ERs的表达来促进VTG的合成,ERβ在其中起主要作用。（5）过氧化物酶体增生物激活受体（PPARs）是金雀异黄素的另一分子靶点。为了研究PPARs是否参与金雀异黄素对VTG的诱导作用,采用PPARs的特异性拮抗剂进行了研究,结果显示斑马鱼原代肝细胞vtg-1 mRNA的表达无显著变化,初步说明PPARs并不参与金雀异黄素对VTG的诱导作用。综上,本文研究表明金雀异黄素具有弱雌激素活性,金雀异黄素可通过雌激素受体途径直接诱导斑马鱼肝脏细胞产生VTG,其中主要是通过ERβ进行调节,金雀异黄素还通过诱导ERs表达的升高,促进VTG的合成。PPAR并不参与金雀异黄素对VTG的诱导作用。本文初步探明了金雀异黄素诱导斑马鱼离体肝细胞产生VTG的作用机理,为正确评价植物雌激素对鱼类的影响奠定了理论基础。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 0 前言
  • 1 鱼类细胞在植物雌激素研究中的应用
  • 1.1 植物雌激素在水环境和饵料中的含量
  • 1.2 植物雌激素对鱼类VTG 的诱导
  • 1.3 植物雌激素诱导鱼类产生VTG 的作用机理
  • 1.4 鱼类细胞在植物雌激素研究中的应用
  • 1.4.1 应用于植物雌激素研究的鱼类细胞系
  • 1.4.2 应用于植物雌激素研究的鱼类原代细胞
  • 1.5 展望
  • 2 金雀异黄素对雄性斑马鱼原代肝细胞vtg-1 mRNA 的诱导
  • 2.1 材料与方法
  • 2.1.1 实验材料
  • 2.1.2 实验药品与仪器
  • 2.1.3 实验方法
  • 2.2 结果
  • 2.2.1 斑马鱼原代肝细胞培养及细胞计数结果
  • 2.2.2 金雀异黄素对雄性斑马鱼原代肝细胞vtg-1 mRNA表达水平的影响
  • 2.3 讨论
  • 2.4 小结
  • 3 ERs 在金雀异黄素诱导斑马鱼原代肝细胞vtg-1 mRNA 中的调节作用
  • 3.1 材料与方法
  • 3.1.1 实验材料
  • 3.1.2 药品和试剂
  • 3.1.3 实验仪器设备
  • 3.1.4 实验方法
  • 3.2 结果
  • 3.2.1 ERs 的特异性拮抗剂处理对金雀异黄素诱导斑马鱼原代肝细胞vtg-1 mRNA 的影响
  • 3.2.2 ERα特异性拮抗剂处理对金雀异黄素诱导斑马鱼原代肝细胞vtg-1 mRNA 的影响
  • 3.2.3 ERβ特异性拮抗剂处理对金雀异黄素诱导斑马鱼原代肝细胞vtg-1 mRNA 的影响
  • 3.3 讨论
  • 3.4 小结
  • 4 金雀异黄素对斑马鱼原代肝细胞中 ERs 表达的影响
  • 4.1 材料与方法
  • 4.1.1 实验材料
  • 4.1.2 药品和试剂
  • 4.1.3 实验仪器设备
  • 4.1.4 实验方法
  • 4.2 结果
  • 4.3 讨论
  • 4.4 小结
  • 5 PPARs 的特异性拮抗剂处理对金雀异黄素诱导斑马鱼原代肝细胞vtg-1 mRNA 的影响
  • 5.1 材料与方法
  • 5.1.1 实验材料
  • 5.1.2 药品和试剂
  • 5.1.3 实验仪器设备
  • 5.1.4 实验方法
  • 5.2 结果
  • 5.3 讨论
  • 5.4 小结
  • 6 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 个人简历
  • 发表的学术论文

    • 相关论文文献

    • [1].三丁基锡对罗氏沼虾卵黄蛋白原(VTG)表达和性腺发育的影响[J]. 渔业科学进展 2013(04)
    • [2].多氯联苯暴露对食蚊鱼CYP19ɑ 和VTGɑ 基因的表达及骨骼形态雄性化的影响[J]. 生态毒理学报 2016(02)
    • [3].添加大豆黄酮对肉种鸡产蛋高峰后期产蛋率、抗氧化活性及肝VTG-ⅡmRNA表达变化的影响[J]. 饲料博览 2013(01)
    • [4].17α-甲基睾酮对斑马鱼肝脏vtg基因mRNA表达的影响[J]. 畜牧与饲料科学 2016(05)
    • [5].中华鲟Vtg间接竞争ELISA检测方法的建立和应用[J]. 水生生物学报 2018(04)
    • [6].双须骨舌鱼卵黄蛋白原基因vtg的克隆、组织表达和原核表达分析[J]. 动物学杂志 2018(04)
    • [7].博格华纳推出搭载两个VTG增压器的R2S~涡轮增压系统[J]. 汽车零部件 2017(11)
    • [8].博格华纳推出面向大众市场的汽油机VTG涡轮增压器[J]. 农业装备与车辆工程 2017(03)
    • [9].增压器可变喷嘴(VTG)控制系统的管理[J]. 航海技术 2012(04)
    • [10].饵料中类雌激素对稀有鮈鲫体内VTG的诱导[J]. 三峡环境与生态 2008(01)
    • [11].兴国红鲤AR基因的鉴定及MT暴露对幼鱼肝中AR和vtg表达的影响[J]. 淡水渔业 2016(06)
    • [12].TPR56—F33—VTG增压器在R12V280ZJ柴油机上的配套研究[J]. 铁道机车车辆 2011(S1)
    • [13].博格华纳将R2S和VTG涡轮增压技术结合应用于新型柴油发动机[J]. 农业装备与车辆工程 2010(08)
    • [14].博格华纳提供中国首个VTG涡轮增压器和TOD(R)分动箱[J]. 汽车零部件 2011(06)
    • [15].VTG公司的货车车辆跟踪系统[J]. 国外机车车辆工艺 2019(04)
    • [16].VTG推出EcoFret平车[J]. 国外铁道车辆 2014(02)
    • [17].博格华纳推出新一代小型柴油发动机涡轮增压器——博格华纳可变几何截面(VTG)涡轮增压器为1.6L柴油发动机设立了新的二氧化碳减排标准[J]. 汽车工艺与材料 2011(03)
    • [18].摘除眼柄与注射眼柄粗提物对凡纳滨对虾性腺发育相关基因表达的影响[J]. 上海海洋大学学报 2016(03)
    • [19].VTG可变截面涡轮增压技术详解——以奥迪Q7 3.0TDI为例[J]. 科技创业月刊 2011(17)

    标签：;  ;  ;  ;  

    金雀异黄素诱导斑马鱼肝细胞合成VTG的作用机理研究
    下载Doc文档

    猜你喜欢

    © 2024 毕速过 版权所有 鄂ICP备12018319号-5