论文摘要
目的: 检测抗氧化剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)体外对卵巢癌OVCAR3细胞的增殖率、凋亡率和顺铂敏感性的影响;及对OVCAR3细胞中的核转录因子k B(nuclear factor—kappaB,NF-K B)活性的影响;并测定其对促血管生成因子VEGF和IL-8 mRNA表达的影响,为进一步了解PDTC体外抗卵巢癌作用的价值及机制,为卵巢癌化学预防和化学辅助治疗提供重要的实验室基础和依据。 方法: 1.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,分别检测不同浓度PDTC、DDP和联合应用PDTC与DDP对OVCAR3细胞生长抑制率的影响。 2.采用流式细胞仪检测不同浓度PDTC作用OVCAR3后的细胞凋亡率。 3.电泳迁移率变动分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)先检测OVCAR3细胞内核转录因子NF-K B的组成性活性,及1μM、5μM、10μM三个浓度的PDTC对该活性的影响;再测定阴性对照组、IL-1β刺激组(10ng/ml作用1h)、PDTC抑制组(1μM、10μM预作用30min后10ng/ml IL-1β刺激1h)四组OVCAR3细胞中核转录因子NF-K B的活性。 4.RT-PCR测定IL-1β(10ng/ml)作用OVCAR3不同时间后VEGF、IL-8 mRNA的表达,及PDTC对该表达的影响。 结果: 1.MTT结果示:PDTC能有效抑制人卵巢癌细胞株OVCAR3的生长,并且具有
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