油茶籽壳多糖、原花青素的综合提取及其分离纯化

论文摘要

多糖（Polysaccharides），又称多聚糖，是由多个单糖分子缩合而成的一类结构复杂的生物大分子物质。多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分，科学研究证明多糖具有抗肿瘤、免疫、降血糖、抗病毒等多种生物功能，且对机体几乎无毒副作用。它广泛存在于动物、植物和微生物细胞壁中。原花青素（Proanthocyanidins，简称PC），是一类由不同数量的单体黄烷-3-醇或黄烷-3，4-二醇缩合而成的多酚类化合物，具有抗氧化、抗肿瘤、降低胆固醇等多种药理活性，是一种高效、低毒、高生物利用度的天然物质。广泛分布于自然界中。油茶籽壳为油茶树（Camellia oleifera Abel）种籽的外种皮，质地比较坚硬，主要成分为纤维素和多缩戊糖等，目前油茶籽壳的利用研究仅集中在糠醛、活性炭与木糖醇的制备上；因此，本文从油茶籽壳中综合提取多糖和原花青素，并对其进行分离纯化研究，旨在利用油茶籽壳进行多糖和原花青素的开发，扩大天然活性物质的提取资源，为油茶籽壳的进一步研究和综合利用提供理论依据，促进油茶生产的发展。以油茶籽壳为材料，采用超声波进行多糖和原花青素的综合提取研究，以超声功率、料液比、乙醇浓度、浸提温度、超声时间为影响因子，进行单因素提取研究；为了更好的进行综合提取，在单因素实验的基础上，采用正交试验研究了超声功率（A）、料液比（B）、乙醇浓度（C）、浸提温度（D）和超声时间（E）对多糖和原花青素提取率的影响，方差分析表明，对综合提取影响较为显著的是乙醇浓度（C），其次是超声功率（A），料液比（B）、浸提温度（D）和超声时间（E）对综合提取影响较小，并确定了超声波综合提取最佳工艺条件为：超声功率300W，料液比1:70（g/mL），60%乙醇，浸提温度60℃，超声时间30min，在此条件下，多糖和原花青素提取率达到0.204%、2.10%。最佳工艺条件下实验的可重复性较好，结果稳定可靠。采用大孔吸附树脂和活性碳对油茶籽壳粗多糖进行静态脱色研究，筛选出HPD-200A、HPD-400A、HPD-700型大孔树脂，其对多糖的脱色率和保留率相对较高；为优化脱色条件，通过正交试验研究了树脂种类（A）、脱色时间（B）、脱色温度（C）对脱色率和多糖保留率的影响，结果表明，采用HPD-700，30min，30℃条件下，多糖脱色率为20.92%，多糖保留率为93.36%。对初步分离纯化后的油茶籽壳多糖理化性质进行分析，并利用GC-MS初步鉴定出油茶籽壳多糖中的单糖组成中含有赤藓糖、D-果糖。采用Sephadex LH-20凝胶分离油茶籽壳原花青素，依次采用60%乙醇、60%的丙酮水溶液作为洗脱液洗脱，并对所得到的乙醇洗脱液（冷冻干燥得样品1）和丙酮洗脱液（冷冻干燥得样品2）进行分析鉴定，通过UV扫描、花青素反应和HPLC等检测。结果表明：样品1、2均为原花青素，样品1、2的得率分别为19.5mg/g、12.1mg/g，纯度分别为3.8%、57.3%，判断样品1含有GA，样品2含有ECG等原花青素单体物质。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 1 文献综述
• 1.1 油茶籽壳概述
• 1.2 多糖和原花青素概述
• 1.2.1 多糖概述
• 1.2.2 原花青素概述
• 2 引言
• 2.1 研究目的及意义
• 2.2 研究内容和技术路线
• 2.2.1 研究内容
• 2.2.2 技术路线
• 3 材料与方法
• 3.1 材料、试剂及仪器
• 3.1.1 实验材料
• 3.1.2 试剂及试材
• 3.1.3 仪器
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 油茶籽壳多糖、原花青素的综合提取
• 3.2.2 油茶籽壳多糖的分离纯化
• 3.2.3 油茶籽壳原花青素的分离纯化
• 4 结果与分析
• 4.1 油茶籽壳多糖、原花青素的综合提取
• 4.1.1 油茶籽壳其他成分
• 4.1.2 单因素提取
• 4.1.3 提取参数的优化
• 4.2 油茶籽壳多糖的分离纯化
• 4.2.1 油茶籽壳多糖的脱色研究
• 4.2.2 油茶籽壳多糖的纯化鉴定
• 4.3 油茶籽壳原花青素的分离纯化
• 4.3.1 Sephadex LH-20 洗脱特性
• 4.3.2 样品分析
• 5 讨论
• 5.1 油茶籽壳多糖、原花青素的综合提取
• 5.2 油茶籽壳多糖的脱色研究
• 5.3 油茶籽壳多糖的鉴定
• 5.4 葡聚糖凝胶 SEPHADEX LH-20 分离原花青素
• 6 结论
• 6.1 油茶籽壳多糖、原花青素的综合提取
• 6.2 油茶籽壳多糖的分离纯化
• 6.3 油茶籽壳原花青素的分离纯化
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 作者简介