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两株海绵内生真菌次生代谢产物分离及活性研究

2020-12-11阅读(188)

两株海绵内生真菌次生代谢产物分离及活性研究

论文摘要

海绵是低等的多细胞海洋动物,由于其特殊的滤食方式使之成为大量微生物富集的场所。很多研究表明这些海绵共附生微生物能产生大量的具有抗肿瘤、抗菌甚至抗HIV活性的物质,因此海绵的研究越来越受到关注。为了从海绵内生微生物中寻找具有生物活性的化合物,甚至是结构新颖的活性海洋天然产物,本文利用从我国海南省陵水县海域采集的海绵中分离到的两株内生真菌HLS-111（Penicillium chrysogenum）、HLS-105（Cryptococcus sp.）为材料,对其进行了化学成分研究及药理活性筛选等工作。利用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱（Sephadex LH-20）、高效液相色谱（HPLC）等多种手段从HLS-111石油醚和乙酸乙酯萃取部分共分离得到14个化合物。经UV、EI、ESI、1H-NMR、13C-NMR和DEPT等现代波谱技术,鉴定出其中12个化合物的结构,它们分别为：黑麦酮酸F（1）、黑麦酮酸D（2）、麦角甾醇（3）、β-谷甾醇（4）、环[色氨酸-苯丙氨酸]（5）、大黄素（6）、正十八碳酸（7）、脑苷脂B（8）、24-亚甲基环木菠萝烷醇-反式阿魏酸（9）、对羟基苯甲酸（10）、多羟基麦角甾醇（11）、麦角甾醇过氧化物（12）。其中化合物1、6、8、9和11为首次从该属获得,化合物2、4、5为首次从该种获得,化合物13和14的结构还有待进一步确定。从HLS-105石油醚萃取部分分离得到5个化合物,它们分别鉴定为麦角甾醇（3）、β-谷甾醇（4）、胡萝卜苷（15）、β-D-吡喃葡萄糖苷脂（16）,其中化合物4、15和16为首次从该属获得,化合物17的结构还有待进一步确定。对这些单体化合物进行抗肿瘤、抗病毒和抗炎活性筛选,结果表明化合物1和2对HCT-8人大肠癌细胞、BEL-7402人肝癌细胞、BGC823人胃肠癌细胞、A549人肺癌细胞和A2780人卵巢癌细胞表现出良好的细胞毒活性；化合物2和13表现出一定的抗HIV病毒活性,同时化合物13还有抗炎活性。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 缩略语-览表
  • 第一章 海绵内生真菌代谢产物的研究进展
  • 1 萜类
  • 2 生物碱
  • 3 甾醇类
  • 4 大环内酯类
  • 5 聚酮
  • 6 肽类
  • 第二章 材料与方法
  • 2.1 实验材料与仪器
  • 2.1.1 实验材料
  • 2.1.2 仪器和试剂
  • 2.2 培养基的配置
  • 2.3 发酵
  • 2.3.1 种子液的制备
  • 2.3.2 大量发酵
  • 2.4 代谢产物的提取和分离
  • 2.4.1 代谢产物的提取
  • 2.4.2 HLS-111代谢产物分离流程
  • 2.4.3 HLS-105代谢产物分离流程
  • 2.5 化合物的结构解析
  • 2.6 药理活性筛选实验方法
  • 2.6.1 细胞毒活性筛选实验方法
  • 2.6.2 抗病毒活性筛选实验方法
  • 2.6.3 抗炎活性筛选实验方法
  • 第三章 HLS-111、HLS-105化学成分研究
  • 3.1 HLS-111、HLS-105中分离得到的单体化合物
  • 3.1.1 HLS-111中分离得到的单体化合物
  • 3.1.2 HLS-105中分离得到的单体化合物
  • 3.2 化合物鉴定数据
  • 第四章 药理活性筛选
  • 4.1 细胞毒活性筛选结果
  • 4.1.1 粗提物细胞毒活性筛选结果
  • 4.1.2 单体化合物抗肿瘤活性结果
  • 4.2 抗HIV活性筛选结果
  • 4.3 抗炎活性筛选结果
  • 第五章 总结与讨论
  • 参考文献
  • 致谢

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