聚(3-羟基丁酸-4-羟基丁酸-3-羟基己酸)和聚(3-羟基丁酸-3-羟基戊酸-3-羟基己酸)的生物相容性研究

聚(3-羟基丁酸-4-羟基丁酸-3-羟基己酸)和聚(3-羟基丁酸-3-羟基戊酸-3-羟基己酸)的生物相容性研究

论文摘要

作为聚羟基脂肪酸酯(PHA)家族中的新成员,聚(3-羟基丁酸-4-羟基丁酸3-羟基己酸)(简称P(3HB-4HB-3HHx))是由含有聚羟基脂肪酸酯合成基因的phaPCJ嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila 4AK4合成的,而聚(3-羟基丁酸-3-羟基戊酸-3-羟基己酸)(简称PHBVHHx)是由含有phaAB基因的重组嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila 4AK4合成的。在此都是首次对它们进行生物相容性的研究。相对于已经广泛研究过的聚(L-乳酸)(简称PLA)以及聚(3-羟基丁酸-3-羟基已酸)(简称PHBHHx),P(3HB-4HB-3HHx)和PHBVHHx都显示了较高的疏水性,较高的表面自由能以及更加粗糙的表面。相对于组织培养板(TCPs),PLA膜和PHBHHx膜,人骨髓间充质干细胞(简称MSCs)能更好地贴附在P(3HB-4HB-3HHx)和PHBVHHx上。通过MTT法检测,可以发现,MSCs在P(3HB-4HB-3HHx)膜上增殖的数量高于TCPs 126 %,高于PHBHHx膜84 %,高于PLA膜312 %(p < 0.01)。而MSCs在PHBVHHx膜上增殖的数量高于TCPs 115 %,高于PHBHHx膜66 %,高于PLA膜263 %(p < 0.01)。同时,这两种三聚物膜都能支持MSCs向成骨细胞分化。之前的研究发现,所有的PHA材料支持细胞生长的能力都低于或者与TCPs差不多。在研究过的PHA材料中,相比TCPs,只有P(3HB-4HB-3HHx)和PHBVHHx能显著促进细胞的生长。因此这两种新型PHA三聚物可能成为极有潜能的骨组织工程生物材料。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第一章 绪论
  • 1.1 聚羟基脂肪酸酯(PHA)概述
  • 1.1.1.P HA及其分类
  • 1.1.2.P HA的生物学功能
  • 1.1.3.P HA的应用
  • 1.2 间充质干细胞(MSCs)概述
  • 1.2.1.M SCs的来源
  • 1.2.2.M SCs的分离与表型特征
  • 1.2.3.M SCs的多分化潜能
  • 1.3 组织工程概述
  • 1.3.1 组织工程概述
  • 1.3.2.P HA在组织工程方面的应用及前景
  • 1.3.3.M SCs在组织工程方面的应用及前景
  • 1.4 选题目的及意义
  • 第二章 材料与方法
  • 2.1 试验材料和常用设备
  • 2.1.1 实验试剂器皿
  • 2.1.2 常用溶液
  • 2.1.3 常用仪器设备
  • 2.2 实验方法
  • 2.2.1 材料成膜
  • 2.2.2 扫描电镜(SEM)
  • 2.2.3 原子力显微镜(AFM)
  • 2.2.4 水接触角
  • 2.2.5 间充质干细胞的分离与培养
  • 2.2.6 流式细胞仪(FACS)
  • 2.2.7.免疫荧光化学
  • 2.2.8.细胞贴附与增殖
  • 2.2.9.成骨分化
  • 2.2.10.成骨分化检测
  • 第三章 实验结果
  • 3.1 膜的表面形貌及粗糙度
  • 3.2 水接触角
  • 3.3 间充质干细胞的特性
  • 3.4 细胞的贴附与增殖
  • 3.5 细胞的成骨分化
  • 第四章 讨论与小结
  • 4.1 讨论
  • 4.2 小结
  • 参考文献
  • 致谢
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