基于化学成分测定的中药大黄质量评价研究

论文摘要

大黄（Rhei Radix et Rhizoma）为蓼科植物掌叶大黄（Rheum palmatum L.）、唐古特大黄（Rheum tanguticum Maxim．ex Balf.）、药用大黄（Rheum officinale Baill.）的干燥根及根茎，具有攻积滞、清湿热泻火、凉血祛瘀等功效，含有多种化学成分有多种药理作用。大黄药材分布于我国甘肃、四川、青海、云南等省，其质量差异较大，为筛选优良品种，保证药品安全有效和稳定可控，有必要建立完善的大黄综合质量评价体系。本文以不同产地的大黄为研究对象，对其主要有效活性成分的含量测定、指纹图谱研究等进行研究，以达到较为系统的质量评价研究，为大黄的质量评价提供参考和依据。本文研究内容包括以下几个方面：（1）建立UPLC法对不同产地大黄中8种成分包括5种游离蒽醌类成分、2种番泻苷类、1种二苯乙烯苷类成分为指标的含量同时进行测定。8种成分在所选定的范围之内线性关系良好（r值≥0.9996），平均加样的回收率（n=3）在96.7%～103.2%，RSD为1.2%～3.2%。采用紫外分光光度计（苯酚-硫酸法）测定大黄中多糖的含量，结果显示青海产唐古特大黄多糖含量相对较高。（2）采用UPLC-PDA法建立大黄药材指纹图谱，得到可以清晰地表达出大黄药材专属性的特征图谱。正品大黄各批次之间相似度相对较高（S>0.784），与伪品大黄相似度较低（S<0.546），可以用于大黄与伪品的快速鉴别。（3）核磁共振技术测定大黄中特征信息并采用主成分分析（Principal ComponentAnalysis，PCA）及判别偏最小二乘（Discriminant Partial Least Squares，DPLS）法进行识别分析。核磁共振指纹图谱-模式识别能够有效地鉴别不同基源的大黄样本。（4）选用超高效液相色谱-四极杆飞行时间-质谱（UPLC/Q-TOF-MS）技术测定大黄药材，建立图谱鉴定出了18个化合物，并找出包括番泻苷A、番泻苷B、土大黄苷等7个差异较大的化合物。（5）对大黄多糖的结构特征进行分析研究，得到一个相对分子质量为1.21×104的均一多糖，经GC分析大黄的单糖组分为β-D-半乳糖、α-D-葡萄糖、α-D-木糖，摩尔比1.0:4.2:1.8。经HIO4氧化及甲基化分析，表明该多糖主链由β-D-1→3，β-D-1→4，β-D-1→3,6吡喃半乳糖和α-D-1→6吡喃葡萄糖组成，α-D-1→末端呋喃木糖为支链。本研究在中医药基础理论的指导下，运用新的检测理念和手段，通过综合多种色谱和色谱质谱联用技术，结合化学成分模式分析手段，进行大黄药材的质量评价，可区分大黄的正品和伪品，评价大黄药材的优劣。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 第一篇 文献综述
• 第一章 化学成分和药理作用
• 1.1 化学成分
• 1.2 药理作用
• 第二章 质量评价方法研究
• 2.1 性状及显微鉴定研究
• 2.2 薄层色谱鉴别
• 2.3 组分评价研究
• 2.4 微量元素
• 2.5 农残及重金属残留评价研究
• 2.6 指纹图谱研究
• 2.7 分子鉴定研究
• 第二篇 研究内容
• 第一章 大黄主要有效成分的含量测定
• 1.1 大黄 8 个成分含量测定
• 1.2 大黄多糖含量测定
• 第二章 大黄 UPLC-PDA 指纹图谱的研究
• 2.1 材料和仪器
• 2.2 方法和结果
• 1H-NMR 指纹图谱-模式识别研究'>第三章 大黄¹H-NMR 指纹图谱-模式识别研究
• 3.1 材料和仪器
• 3.2 方法和结果
• 3.3 讨论
• 第四章 大黄 UPLC/Q-TOF-MS 的分析研究
• 4.1 材料与方法
• 4.2 结果
• 第五章 大黄多糖（RP）提取纯化和结构的研究
• 5.1 材料与方法
• 5.2 结果
• 5.3 结论
• 结论
• 1.1 结论
• 1.2 展望
• 参考文献
• 作者简介
• 致谢