论文摘要
目的探讨白藜芦醇（Res）与氨基胍（AG）干预对糖尿病大鼠肾脏纤维化的影响及对肾脏的保护作用。方法正常雄性8周龄Wister大鼠，体重225±8.2g，给予高脂高糖饲料饲养，体重达400g左右时，随机取8只作为正常对照组（NC），其余给予链尿佐菌素（STZ）腹腔注射，以空腹（禁食10小时）血糖≥16.7mmol·L-1确定为糖尿病模型，血糖不达标者，补注STZ(15-20mg·kg-1)，至血糖达标后随机分为4组：糖尿病（DM）组，氨基胍治疗组(AG，50mg·kg-1·d-1)，白藜芦醇治疗组(Res，10mg·kg-1·d-1)，联合用药组(AG+Res，50mg·kg-1·d-1+10mg·kg-1·d-1)。大鼠造模成功后一周采取腹腔注射给药，NC组和DM组给予等量的生理盐水。用药9周后，留取24小时尿，测体重、血糖。处死大鼠，测定尿蛋白、肾脏指数（肾脏重量／体重×1000）。分别用免疫组化法测定肾组织中Ⅳ型胶原（COLⅣ）、骨形态发生蛋白7（BMP-7）、转化生长因子1（TGF-β1）和Smad5蛋白的表达。用RT-PCR半定量测定肾脏中BMP-7、TGF-β1、Smad5的mRNA表达。结果1．与NC组相比，各组糖尿病大鼠体重明显减轻（P＜0.01），血糖、肾脏指数及尿蛋白显著增高（P＜0.01）；与DM组比较，AG组、AG+Res组肾脏指数明显下降（P＜0.01），AG组、Res组与AG+Res组尿蛋白明显改善（P＜0.01）但血糖与体重变化未受影响（P＞0.05）。2．肾脏免疫组化染色示：DM组大鼠肾组织COLⅣ、TGF-β1的表达明显高于NC组，AG、Res、AG+Res用药干预后COLⅣ、TGF-β1表达明显降低（P＜0.05，P＜0.01），AG+Res对TGF-β1的抑制作用优于AG（P＜0.05），AG+Res与Res对COLⅣ的抑制作用优于AG（P＜0.05，P＜0.01），同时DM组大鼠肾组织BMP-7、Smad5的表达明显低于NC组，AG、Res、AG+Res用药干预后BMP-7、Smad5表达明显升高（P＜0.05，P＜0.01）。AG+Res与Res增强Smad5的表达效果优于AG（P＜0.05）。3．DM组大鼠肾组织TGF-β1 mRNA水平明显高于NC组（P＜0.01），AG、Res、AG+Res能显著降低TGF-β1 mRNA的表达（P＜0.01），而三组干预组比较，TGF-β1 mRNA的表达差异无显著性（P＞0.05）。同时，DM组大鼠肾组织BMP-7、Smad5 mRNA水平明显低于NC组（P＜0.05，P＜0.01），三组药物干预组增强BMP-7、Smad5 mRNA表达（P＜0.05，P＜0.01），同样干预组间BMP-7、Smad5 mRNA表达差异无显著性（P＞0.05）。4．免疫组化结果与RT-PCR实验结果均表明，BMP-7与TGF-β1的表达呈显著负相关（P＜0.01），TGF-B1与Smad5的表达呈负相关（P＜0.05），BMP-7与Smad5表达呈显著正相关（P＜0.01）。结论氨基胍与白藜芦醇对糖尿病大鼠模型有直接的肾脏保护作用，其机制之一可能是通过抑制大鼠肾组织COLⅣ、TGF-β1的表达，同时增强BMP-7、Smad5的表达。