蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin抑制鼻咽癌细胞机制的研究

论文摘要

目的：研究蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin对鼻咽癌细胞系（CNE-2）的多药耐药相关蛋白1（MRP1）,环氧合酶-2（COX-2）和表皮钙粘素（E-CD）表达的影响,探讨Agkihpin抑制人鼻咽癌CNE-2细胞的机制。方法：体外培养鼻咽癌细胞系CNE-2,用不同浓度的蛇毒精氨酸酯酶Agkihpin处理鼻咽癌细胞系72 h后,收集细胞,采用RT-PCR法、免疫细胞化学和蛋白印迹（Western blotting）检测MRP1、COX-2和E-CD的mRNA和蛋白表达水平在CNE-2细胞中的变化,分析Agkihpin抑制人鼻咽癌CNE-2细胞的机制。结果：1.不同浓度Agkihpin作用CNE-2细胞72 h后MRP1 mRNA和蛋白表达均降低,并呈现出一定的浓度依赖效应,Agkihpin浓度越高,MRP1表达下调越显著。RT-PCR结果显示,Agkihpin加药组中,4.13、0.516和0.207 μg/ml浓度作用的CNE-2细胞中MRP1 mRNA与对照组比较均有明显下调（P<0.01）。Agkihpin加药组中,4.13、0.516和0.207 μg/ml浓度作用的CNE-2细胞中MRP1蛋白表达量均有下调（P<0.01）：免疫细胞化学显示,MRP1蛋白表达分别下降了60.53%、45.21%和26.95%；Western blotting检测MRP1蛋白表达结果与免疫细胞化学检测结果类似,均呈下降趋势。2.不同浓度Agkihpin作用CNE-2细胞72 h后COX-2 mRNA口蛋白表达均降低,并呈现出一定的浓度依赖效应,Agkihpin浓度越高,COX-2表达下调越显著。RT-PCR结果显示,各加药组的CNE-2细胞中COX-2 mRNA与对照组比较均有明显下调（P<0.01）。不同浓度Agkihpin作用的CNE-2细胞中COX-2蛋白表达量均有下调（P<0.01）：免疫细胞化学显示,COX-2蛋白表达分别下降了52.17%、32.82%和26.74%；Western blotting检测COX-2蛋白表达结果与免疫细胞化学检测结果类似,均呈下降趋势。3.不同浓度Agkihpin作用CNE-2细胞72 h后E-CD mRNA和蛋白表达均降低,并呈现出一定的浓度依赖效应,Agkihpin浓度越高,E-CD表达下调越显著。RT-PCR结果显示,Agkihpin加药组中,4.13、0.516和0.207 μg/ml浓度作用的CNE-2细胞中E-CD mRNA与对照组比较均有明显下调（P<0.05）。Agkihpin各加药组中CNE-2细胞中E-CD蛋白表达量均有下调（P<0.01）：免疫细胞化学显示,E-CD蛋白表达分别下降了36.66%、31.28%和14.21%。Western blotting检测E-CD蛋白表达结果与免疫细胞化学检测结果类似,均呈下降趋势。结论：1.在鼻咽癌CNE-2细胞系中,Agkihpin能抑制MRP1的表达,并且随浓度的增大有明显的抑制作用,这可能是Agkihpin能降低鼻咽癌细胞活力的原因之一；Agkihpin抑制MRP1的表达提示,在一定程度上Agkihpin可通过抑制MRP1表达来减少细胞内药物的排出而提高肿瘤细胞对药物的敏感性。2.在鼻咽癌CNE-2细胞系中,Agkihpin能抑制COX-2的表达,并且随浓度的增大有明显的抑制作用；Agkihpin对COX-2的抑制作用,可能成为鼻咽癌化疗的有效药物。3.在鼻咽癌CNE-2细胞系中,Agkihpin能抑制E-CD的表达,并且随浓度的增大有明显的抑制作用。4. Agkihpin可能通过下调MRP1来抑制鼻咽癌细胞系CNE-2的活力,而通过下调COX-2和E-CD来抑制CNE-2的迁移和增殖。

论文目录

• 英汉缩略对照表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附录
• 文献综述
• 参考文献
• 硕士在读期间已发表文章
• 致谢