导读:本文包含了酶联免疫分析方法论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:AMOZ,单链抗体,融合蛋白,表达条件
酶联免疫分析方法论文文献综述
陈薪竹,柯法钧,王丹,洪艳平,王玉波[1]（2019）在《抗呋喃它酮代谢物单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白表达条件优化及直接竞争酶联免疫分析方法的建立》一文中研究指出优化抗呋喃它酮代谢物(AMOZ)单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白(AMOZscFv-AP)的可溶性表达条件,提高融合蛋白的表达量,建立基于此融合蛋白的AMOZ残留直接竞争酶联免疫分析方法(dcELISA)。将含有AMOZscFv-AP融合蛋白的基因工程菌进行液体发酵培养,研究在不同宿主菌、培养基、培养基初始PH、诱导时期、诱导时间以及诱导剂浓度等条件下此融合蛋白表达水平的差异,优选出最佳表达条件,制备得到融合蛋白,建立AMOZ残留的dcELISA方法。结果表明:融合蛋白AMOZscFv-AP的最佳表达条件为选用E.coli BL21(DE3)pLysS为宿主菌,在初始PH为7.0的SB培养基中培养至A600nm为0.6左右时,用浓度为0.6 M的IPTG诱导9 h;建立的dcELISA方法IC_(50)值和LOD值分别10.62 ng/mL、4.83 ng/mL,线性检测范围为6.38～23.13 ng/mL,批内变异系数均小于10%,除原药呋喃它酮外,此融合表达单链抗体与其它硝基呋喃类抗生素及其代谢物交叉反应率均小于0.1%,鱼肉样品添加回收率为71.31%～82.88%,均符合相关检测要求。本研究建立的dcELISA方法可更快、更简便的检测食品中的呋喃它酮代谢物AMOZ残留。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十六届年会暨第十届中美食品业高层论坛论文摘要集》期刊2019-11-13）
潘明飞,李诗洁,郭丹丹,王俊平,王硕[2]（2019）在《间接竞争酶联免疫分析方法检测花生中黄曲霉毒素B_1》一文中研究指出目的:针对花生中强毒性污染物黄曲霉毒素B_1(AFB_1)建立了一种准确、灵敏的间接竞争酶联免疫分析方法(ic-ELISA)。方法:制备了AFB_1包被抗原,包被量为0.1μg/孔;抗体稀释64 000倍;选用0.1%脱脂乳粉为方法封闭液,0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4)为样品稀释液;结果:在最优的试验条件下,建立的ic-ELISA对目标物AFB1的检测线性范围为0.0097～0.088μg/L(R2=0.999);灵敏度(IC50)和检出限(IC15)分别达到0.027μg/L和0.0066μg/L。板内变异系数(n=6)为0.29%～16.9%,板间变异系数(n=6)为0.22%～21.19%。在花生样品中AFB_1的检测灵敏度(IC50)为1.04μg/kg,回收率为96.67%～106.51%。结论 :本研究建立的ic-ELISA方法操作相对简便,检测灵敏度高、准确性好,可稳定地用于花生样品中AFB_1污染物的定量分析检测。(本文来源于《中国食品学报》期刊2019年09期）
张世伟,王云发,王士峰,姚添淇,冯荣虎[3]（2019）在《基于酶联免疫分析的大豆蛋白复合纤维鉴定方法》一文中研究指出不同蛋白来源的改性纤维成本差异较大,为区分纤维的蛋白来源,建立了一种简单、准确的大豆蛋白复合纤维鉴定方法。根据大豆蛋白现有的氨基酸序列和蛋白交联的位点设计一段特征肽半抗原,将该特征肽段偶联载体蛋白,免疫实验动物,并制备得到特异性单克隆抗体。将优化浓度的抗原包被于酶标版,抗体偶联辣根过氧化物酶,建立针对大豆蛋白复合纤维的酶联免疫吸附实验(ELISA)。该方法采用7M尿素作为提取剂,检出限为1. 8%氨基酸含量的大豆蛋白复合纤维,检测时间不超过70 min(含前处理)。该方法对常见的纤维无非特异性识别,纤维染色不会对检测结果造成干扰。(本文来源于《毛纺科技》期刊2019年07期）
刘伟怡,刘凤银,江海超,王宇,刘佳[4]（2019）在《青霉素类抗生素广谱性酶联免疫分析方法的建立》一文中研究指出为了建立青霉素类抗生素广谱性酶联免疫分析方法,本文通过活泼酯法将青霉素G(PEN)合成人工抗原PEN-BSA和PEN-OVA,将PEN-BSA免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,研究了同源包被与异源包被模式及ELISA各影响因素对检测灵敏度的影响,并考察了此方法对测定牛奶中青霉素类抗生素残留的适用性。结果表明:制备的PEN多克隆抗体效价高达10-5,测定8种青霉素类抗生素几乎无交叉反应,以CAR-OVA为异源包被原具有较高的灵敏性,最低可检测浓度为2.22μg/mL,检测限为0.14μg/mL。以1、10、100μg/mL作为加标浓度,添加回收率范围为74.0%～106.3%,变异系数小于0.21%。(本文来源于《生物化工》期刊2019年01期）
何凡,徐振林,肖治理,王弘,雷红涛[5]（2018）在《雌二醇酶联免疫吸附分析方法的建立》一文中研究指出针对食品中雌二醇残留污染问题,本研究以雌二醇肟化后制备新型半抗原及系列人工抗原免疫动物后所取得的可特异性识别雌二醇的多克隆抗体为基础,建立了检测雌二醇的酶联免疫分析方法(ic-ELISA)。本方法对于雌二醇的半数抑制浓度(IC_(50))为5.55 ng/mL,线性检测范围为0.36～84.96 ng/mL,检出限为0.07 ng/mL;与激素类药物及结构类似物均无交叉反应,具有较好的特异性和灵敏度。(本文来源于《“健康中国 2030·健康食品的安全与创新”学术研讨会暨2018年广东省食品学会年会论文集》期刊2018-12-04）
陈永忠,何磊良,王纳纳,吴拥军,屈凌波[6]（2018）在《呕吐毒素化学发光酶联免疫分析方法的建立及应用》一文中研究指出建立增强化学发光酶联免疫分析定量检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的方法,并对实际样品进行检测。采用鲁米诺-双氧水-辣根过氧化物酶-对羟基联苯体系,在优化的条件下,用间接竞争法对DON进行测定,并与ELISA法、HPLC法(GB/T 23503—2009)进行比较。该方法在0.01~1 000μg/m L范围内,所得DON线性回归方程为:Y=-1 059.1X+40 892,相关系数为0.994 2,检测限为0.19 ng/m L,板内RSD为1.8%~4.5%(n=3),批内RSD为2.4%~7.4%(n=3),批间RSD为7.8%~11.0%(n=3);在小麦样品高、中、低3个浓度的回收率范围在90.0%~126.8%,在玉米样品高、中、低3个浓度的回收率范围在97.7%~110.0%。用此方法测定同属镰刀菌毒素的玉米赤霉烯酮交叉反应率小于10%,测定其他类菌种的真菌毒素几乎无交叉反应。所建立的增强化学发光酶联免疫分析法操作简单、灵敏度高、特异性强,可以用于实际样品中DON的快速测定。(本文来源于《河南工业大学学报(自然科学版)》期刊2018年04期）
何洁[7]（2018）在《食品中林可酰胺类抗生素和黄曲霉毒素残留的酶联免疫分析方法研究》一文中研究指出克林霉素(Clindamycin,CLIN)和林可霉素(Lincomycin,LIN)经常作为兽药而残留在动物源性食品中,黄曲霉素在绝大多数坚果类、粮油类里都有检出。CLIN和LIN的残留不仅可能导致恶心、注射部位疼痛等,也可能升高患伪膜性肠癌的风险。黄曲霉素B_1(Aflatoxins B_1,AFB_1)是黄曲霉素中毒性最强也是经常被检出的代表之一,具有强烈的致癌作用。本研究主要内容如下:1、CLIN单克隆抗体的制备:以琥珀酸酐法、活化酯法和高碘酸钠还原法制备CLIN和LIN免疫原和包被原,经质谱检测计算偶联比率为3.9至6.7。使用免疫原CLIN-BSA免疫小鼠后,检测小鼠均产生了特异性抗体。选取抗血清灵敏度和效价最高的鼠,成功制备了能稳定分泌单克隆抗体的细胞株3B9。基于3B9制备的单克隆抗体,建立间接竞争ELISA方法。该方法的抗体亚型为IgG1,轻链亚型为λ型,工作浓度为0.096μg/mL,包被抗原工作浓度为0.12μg/m L,此时测得的OD_(max)为1.795,CLIN的IC_(50)为1.2 ng/m L。该抗体对LIN有较明显的交叉反应,交叉反应率为25%,IC_(50)为5.8 ng/mL。2、建立了检测牛肉、鸡肉、猪肉、鱼肉中CLIN和LIN残留的间接竞争ELISA方法:以上述单克隆抗体为基础,用LIN-OVA作为包被原包被酶标板,建立异源性间接竞争ELISA方法,并对影响ELISA方法工作性能的因素进行优化。在最适宜条件下,检测CLIN和LIN的ELISA方法的标准曲线的IC_(50)值分别为0.3ng/mL(CLIN)和1.2 ng/mL(LIN)。优化建立了一个简单的样品前处理方法,10分钟内基质效应基本消除,可检测牛肉、鸡肉、猪肉、鱼肉中CLIN和LIN残留。该ELISA方法检测上述食品基质的检测限分别为1.8μg/kg(CLIN)和6.8μg/kg(LIN)。在添加回收试验中,在不同的添加水平范围内,平均回收率从76%到112%不等,批内/批间变异系数在7.1%到13.2%之间,均不超过15%。该ELISA方法经国家标准LC-MS/MS方法验证,相关系数R~2为0.9653,符合中国、欧盟和美国关于食品基质中CLIN和LIN残留检测的要求。3、建立了大米和米粉中AFB_1残留的间接竞争ELISA方法针对南方地区广泛食用的大米、米粉等食品基质,优化建立了间接竞争ELISA方法。新建立的方法的特异性好,对AFB_1有很好的识别水平,其IC_(50)值为0.4 ng/mL,对其他种类真菌毒素的识别能力较弱,交叉反应率在1%以下。本研究优化建立了一种快速检测大米、米粉中AFB_1残留的样品前处理法。该ELISA方法检测大米和米粉中AFB_1残留的检测限为0.89μg/kg。在添加回收实验中,平均回收率范围为73.9%?102.7%,批内和批间的CV范围为5.16%?11.36%,均在可接受范围内。该方法经国家标准LC-MS/MS方法对比验证,相关系数R~2为0.9943,证明该方法准确性满足中国、欧盟、美国对于食品基质中AFB_1残留检测的要求。(本文来源于《深圳大学》期刊2018-06-30）
李梅,刘洁,叶燕,俞蕾,王婷婷[8]（2018）在《时间分辨荧光免疫分析法和酶联免疫吸附实验法测定乙型肝炎病毒大蛋白的方法学比较》一文中研究指出目的对时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)和酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测乙型肝炎患者血清中病毒大蛋白(hepatitis B virus large surface protein,HBV-LP)进行方法学比较。方法收集30例正常体检血清标本作为阴性对照和150例慢性乙型肝炎患者血清标本,利用ELISA法检测HBV-LP,将其中70例阳性标本作为阳性样本,70例阴性标本作为阴性样本,再分别采用TRFIA法检测HBV-LP,对二者的灵敏度、特异度、一致性、检测线性范围、精密度、相关性及两种试剂盒的稳定性进行比较。其中TRFIA与ELISA结果不一致的12例标本采用PCR法进行验证。结果TRFIA检测HBV-LP的最小测定值为0.1 ng/ml,ELISA检测HBV-LP的最小测定值为2.5 ng/ml,二者的特异度均为100%。TRFIA和ELISA检测HBV-LP的Kappa值为0.83。12例ELISA和TRFIA检测不一致的标本,经PCR验证后有10例HBV DNA>103拷贝数。TRFIA试剂检测的线性范围在0.625~10 252 ng/ml之间,ELISA试剂盒检测的线性范围在5~1 281.6 ng/ml。TRFIA法检测高、中、低3个浓度水平的批内CV平均为6.10%,ELISA法的批内CV平均为8.98%。TRFIA批间CV平均为6.91%,ELISA的批间CV平均为10.45%。TRFIA试剂盒的结合下降率为6.61%,ELISA试剂盒的结合下降率为23.59%。结论 TRFIA与ELISA具有高度的一致性,但是两者相比,前者有更高的灵敏度和精密度,且TRFIA试剂盒的稳定性更好。(本文来源于《中国临床新医学》期刊2018年02期）
熊挺,蒋蔚,韩阳瑞,龙梦瑶,凌娇[9]（2018）在《家禽饲料中玉米赤霉烯酮化学发光酶联免疫分析方法的建立》一文中研究指出为了建立比较间接竞争化学发光酶联免疫分析法(ic-CLEIA)与直接竞争化学发光酶联免疫分析法(dc-CLEIA)检测家禽饲料中玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)的方法,采用二因子交叉试验优化确定最佳包被原浓度和抗体稀释度,建立ic-CLEIA和dc-CLEIA。结果显示:icCLEIA在0.05~5 ng/m L范围内线性关系良好,线性回归方程为y=-0.383 5x+0.417 9(R2=0.994 6),灵敏度(IC50)为0.611 ng/m L,检出限(LOD)为15 pg/m L,平均批内和批间变异系数为1.79%和1.02%,家禽饲料添加样品回收率为91.9%~112.1%,变异系数小于10.5%;dcCLEIA在0.025~5 ng/m L范围内线性关系良好,线性回归方程为y=-0.386 5x+0.334 1(R2=0.991 8),灵敏度(IC50)为0.372 ng/m L,检出限(LOD)为3 pg/m L,平均批内和批间变异系数为1.16%和1.20%,添加样品回收率为87.3%~119.3%,变异系数小于9.8%。结果表明:两种方法精确,灵敏度高,均可作为定量检测ZEN的有效手段;与ic-CLEIA相比,dc-CLEIA更适用于检测家禽饲料中的ZEN。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2018年02期）
李潇潇,丁书茂,杨旭,袁均林[10]（2018）在《噻呋酰胺人工抗原的合成及酶联免疫吸附分析方法的建立》一文中研究指出以化合物2-甲基-4-叁氟甲基-5-噻唑甲酸(MTCA)为噻呋酰胺的半抗原合成人工抗原,采用活泼酯法合成免疫原MTCA-BSA,分别采用活泼酯法、混合酸酐法和N,N'-羰基二咪唑/4-二甲氨基吡啶(CDI/DMAP)法合成3种包被原MTCA-OVA-1、MTCA-OVA-2和MTCA-OVA-3。免疫动物后,最终以包被原MTCAOVA-3筛选并获得了具有高特异性的噻呋酰胺多克隆抗体,建立了检测噻呋酰胺的间接竞争酶联免疫吸附(ic-ELISA)分析方法。本方法线性检测范围为0.08~10.00 mg/L,半数抑制浓度(IC_(50))为1.39 mg/L,检出限为0.08 mg/L,对自来水、湖水和小麦中的噻呋酰胺添加回收率在72.0%~128.3%之间,检测结果与HPLC法具有良好的相关性(R~2=0.9994)。本研究建立的ic-ELISA方法可用于环境水样与小麦等农产品中噻呋酰胺残留的快速检测。(本文来源于《分析化学》期刊2018年01期）
酶联免疫分析方法论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:针对花生中强毒性污染物黄曲霉毒素B_1(AFB_1)建立了一种准确、灵敏的间接竞争酶联免疫分析方法(ic-ELISA)。方法:制备了AFB_1包被抗原,包被量为0.1μg/孔;抗体稀释64 000倍;选用0.1%脱脂乳粉为方法封闭液,0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4)为样品稀释液;结果:在最优的试验条件下,建立的ic-ELISA对目标物AFB1的检测线性范围为0.0097～0.088μg/L(R2=0.999);灵敏度(IC50)和检出限(IC15)分别达到0.027μg/L和0.0066μg/L。板内变异系数(n=6)为0.29%～16.9%,板间变异系数(n=6)为0.22%～21.19%。在花生样品中AFB_1的检测灵敏度(IC50)为1.04μg/kg,回收率为96.67%～106.51%。结论 :本研究建立的ic-ELISA方法操作相对简便,检测灵敏度高、准确性好,可稳定地用于花生样品中AFB_1污染物的定量分析检测。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酶联免疫分析方法论文参考文献
[1].陈薪竹,柯法钧,王丹,洪艳平,王玉波.抗呋喃它酮代谢物单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白表达条件优化及直接竞争酶联免疫分析方法的建立[C].中国食品科学技术学会第十六届年会暨第十届中美食品业高层论坛论文摘要集.2019
[2].潘明飞,李诗洁,郭丹丹,王俊平,王硕.间接竞争酶联免疫分析方法检测花生中黄曲霉毒素B_1[J].中国食品学报.2019
[3].张世伟,王云发,王士峰,姚添淇,冯荣虎.基于酶联免疫分析的大豆蛋白复合纤维鉴定方法[J].毛纺科技.2019
[4].刘伟怡,刘凤银,江海超,王宇,刘佳.青霉素类抗生素广谱性酶联免疫分析方法的建立[J].生物化工.2019
[5].何凡,徐振林,肖治理,王弘,雷红涛.雌二醇酶联免疫吸附分析方法的建立[C].“健康中国2030·健康食品的安全与创新”学术研讨会暨2018年广东省食品学会年会论文集.2018
[6].陈永忠,何磊良,王纳纳,吴拥军,屈凌波.呕吐毒素化学发光酶联免疫分析方法的建立及应用[J].河南工业大学学报(自然科学版).2018
[7].何洁.食品中林可酰胺类抗生素和黄曲霉毒素残留的酶联免疫分析方法研究[D].深圳大学.2018
[8].李梅,刘洁,叶燕,俞蕾,王婷婷.时间分辨荧光免疫分析法和酶联免疫吸附实验法测定乙型肝炎病毒大蛋白的方法学比较[J].中国临床新医学.2018
[9].熊挺,蒋蔚,韩阳瑞,龙梦瑶,凌娇.家禽饲料中玉米赤霉烯酮化学发光酶联免疫分析方法的建立[J].畜牧与兽医.2018
[10].李潇潇,丁书茂,杨旭,袁均林.噻呋酰胺人工抗原的合成及酶联免疫吸附分析方法的建立[J].分析化学.2018