“益坤宁”对自然老化大鼠性激素的调节及卵巢修复的研究

论文摘要

目的:通过对自然老化大鼠性激素的调节及卵巢修复,研究中药益坤宁方对围绝经期大鼠卵巢功能和结构的影响。方法:选用11～13月龄雌性围绝经期wistar大鼠32只。随机将其分为模型组、益坤宁组、西药对照组。另选青年大鼠10只,月龄4个月,作为青年对照组,采用血清性激素分泌水平、血管内皮生长因子（VEGF）、颗粒细胞调亡及细胞形态等指标来观察益坤宁对卵巢结构和功能的影响。结果:用放免法测定大鼠血清性激素的结果:经益坤宁与西药利维爱治疗后,大鼠血清E2值、P值均升高,LH、FSH水平降低（P＜0.01和P＜0.05）;免疫组化法检测血管内皮生长因子结果:用药组益坤宁组及西药对照组均有不同程度阳性表达,与模型组比较均有极显著性差异（P＜0.01）;原位末端标记（TUNEL）法检测卵泡颗粒细胞凋亡结果:益坤宁组及西药对照组虽然有不同程度的卵泡颗粒细胞凋亡的阳性表达,但与模型组鼠比较均有极显著性差异（P＜0.01）;经HE染色结果可示益坤宁组与西药组生长卵泡较多,闭锁卵泡较少;经电镜结果可示益坤宁组与西药组核膜结构清晰,部分颗粒细胞核固缩,染色质凝聚。结论:本研究证实中药益坤宁可以升高围绝经期大鼠血清E2、P水平。降低血清FSH、LH水平;对围绝经期大鼠卵巢VEGF有促进作用;对卵巢颗粒细胞凋亡有抑制作用,提示益坤宁可以阻止卵泡闭锁,从而达到预防和延缓卵巢颗粒细胞凋亡的作用机制;对卵巢组织结构和形态的改变,有延缓卵巢衰老的作用。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 导言
• 文献综述
• 一 祖国医学对围绝经期综合征的认识及治疗进展
• 1 祖国医学对围绝经期综合征的认识
• 1.1 表现
• 1.2 定义
• 1.3 病因病机
• 2 祖国医学对围绝经期综合征的治疗进展
• 二 现代医学对围绝经期综合征的认识和治疗
• 1 现代医学对围绝经期综合征的认识
• 1.1 神经—内分泌—免疫网络学说
• 1.2 关于颗粒细胞的凋亡
• 1.3 血管内皮生长因子（VEGF）在卵巢组织中的作用
• 1.4 自由基学说
• 1.5 其他
• 2 现代医学对围绝经期综合征的治疗进展
• 2.1 非激素类药物治疗
• 2.2 激素补充治疗
• 2.3 其他药物治疗
• 三 围绝经期卵巢组织学进展及特点
• 1 HE染色、光镜形态学观察
• 2 透射电镜观察
• 实验研究
• 一 实验材料和实验方法
• 1 实验材料
• 1.1 实验动物
• 1.1.1 实验动物的选取
• 1.1.2 实验动物的饲喂
• 1.2 实验药物
• 1.3 实验用主要仪器
• 1.4 实验用主要试剂
• 2 实验方法
• 2.1 选取围绝经期鼠模型的方法
• 2.2 分组方法
• 2.3 观察指标
• 2.3.1 性激素四项
• 2.3.2 卵巢组织 VEGF
• 2.3.3 卵巢组织形态学观察
• 2.4 测定方法
• 2.4.1 放免法测性激素
• 2.4.2 免疫组化法测定 VEGF
• 2.4.3 HE染色方法进行卵巢组织形态学观察
• 2.4.4 TUNEL和电镜方法观察卵巢颗粒细胞凋亡
• 2.4.4.1 TUNEL组织切片染色过程
• 2.4.4.2 细胞爬片或涂片染色过程
• 2.5 判定标准
• 2.5.1 原位末端标记（TUNEL）判定标准
• 2.5.2 免疫组化法测 VEGF判定标准
• 2.5.3 HE染色、光镜形态学观察
• 2.5.4 透射电镜观察
• 3 数据处理
• 二 实验结果
• 1 放免法测定大鼠血清性激素的结果
• 2 免疫组化法检测血管内皮生长因子结果
• 3 HE染色结果
• 4 原位末端标记（TUNEL）法检测卵泡颗粒细胞凋亡结果
• 5 电镜结果
• 讨论
• 一 益坤宁组方分析
• 二 本方的激素调节作用特点
• 三 本方对给药前后卵巢组织形态的影响
• 四 本方对 VEGF的影响
• 五 各指标的联系，即性激素-VEGF-卵巢形态的关系
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 附图
• 个人简历