论文摘要
马铃薯晚疫病是由致病疫霉引起的导致马铃薯茎叶死亡和块茎腐烂的一种毁灭性病害,该病的发生可造成马铃薯的严重减产,甚至绝收。目前,其危害性、防治难度及对社会所造成的影响已经超过小麦条锈病和水稻稻瘟病,被视为世界第一大作物病害。目前对马铃薯晚疫病的防治手段主要包括栽培措施、抗病育种、化学农药和生物防治,尤以生物防治因其绿色环保的优点而受到广泛关注。本实验室前期已经筛选得到对致病疫霉有明显拮抗作用的放线菌NB-8菌株,对致病疫霉菌丝生长的的抑制率达到92%,并明确了其主要抗菌物质为水溶性抗生素,但在后续的实验研究中发现,该菌株的抑菌作用不够稳定。因此,本研究采用LiCl和紫外线单独诱变、以及两者复合诱变的方法对NB-8菌株进行诱变处理,获得了效果良好的突变菌株,并对其进行发酵条件优化,包括接种量、装液量、培养时间、pH值、温度和转速。在此基础上对优化后所得发酵液的抑菌方式、诱导抗病作用及抑菌谱进行了探讨。主要研究结果如下:1.以放线菌NB-8菌株为出发菌株,致病疫霉为指示菌,采用LiCl和紫外线以及两者复合诱变处理,3种方法获得的抑菌率在65%以上的菌株分别为LiCl诱变1株,紫外线诱变2株,复合诱变6株,其中以复合诱变所得的LU-160菌株抑菌活性最强,发酵液(29mg/mL)的抑菌率为73.13%,拮抗活性与出发菌株相比提高了15.66%。2.LU-160菌株经过35次传代,抑菌活性表现出其具有良好的遗传稳定性,抑菌率保持在64%-70%之间。3.采用单因素试验设计,利用滤纸片法,对LU-160菌株的最佳发酵条件进行了优化。结果显示,该菌株在2%接种量、120mL/250mL装液量、培养基初始自然pH、28℃、150r/min培养8d时所得发酵液(35mg/mL)对致病疫霉有最强的抑制作用,抑菌率可达83.9%。比优化前高出10.77%。4.LU-160的发酵液对游动孢子释放、休止孢萌发均有抑制作用,抑制率分别为94%和40%。发酵液在马铃薯离体块茎上对晚疫病有较明显的诱抗效果,保护率为65.39%。5.经发酵液诱导处理块茎切片后,块茎切片中的SOD酶活性在处理组中先下降后上升,在对照组中先上升后下降,处理组酶活性低于对照组;而PPO、PAL酶活性及可溶性蛋白含量在处理组均上升,明显高于对照组。6.测定了LU-160发酵液对其它18种微生物的抑制作用,在测定的9种真菌中仅对番茄灰霉有较强的抑制作用,抑菌率为66.1%,对其它几种真菌均没有抑制作用;对实验室保存的9种细菌中的8种(HT-6、大肠杆菌、纳豆杆菌、八叠球菌、枯草芽孢杆菌、YHX3、S341、S343)都有明显的抑制作用,抑菌圈直径都在13mm以上,对SR13-1没有抑制作用。
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相关论文文献
- [1].放线菌NB-8的诱变及突变株对致病疫霉的的抑制作用[J]. 安徽农学通报(上半月刊) 2011(01)