论文摘要
目的：观察兔骨髓间充质干细胞（BMSCs）,经转化生长因子-β1（TGF-β1）等向软骨细胞诱导8d、11d、14d、17d、20d后,与藻酸钙凝胶复合体外培养,细胞在三维条件下增殖情况及共同构建组织工程化软骨情况。方法：穿刺新西兰大耳白兔股骨抽取骨髓,密度梯度离心法分离、培养BMSCs。将传至第3代的BMSCs予以含TGF-β1、地塞米松等成份的无血清诱导液定向向软骨细胞诱导。根据不同的诱导时间,实验组分成为A、B、C、D、E5组：A组：诱导至第8d;B组：诱导至11d；C组：诱导至14d；D组：诱导至17d：E组：诱导至20d。通过细胞形态、TB染色、Ⅱ型胶原免疫组化、培养液内多聚蛋白聚糖（AG）含量,比较各实验组定向诱导成软骨细胞情况。分别将以上各组成软骨细胞复合藻酸钙凝胶,以1×107/ml的密度制作为细胞-藻酸钙凝胶珠,继续体外培养14d。培养过程中观察细胞在藻酸钙凝胶中生长、增殖情况,并通过Ⅱ型胶原免疫组化、阿利新蓝比色法测定各组Ⅱ型胶原表达和多聚蛋白聚糖（AG）的含量,综合比较各实验组构建组织工程化软骨的情况。结果：密度梯度离心法分离纯化的BMSCs定向成软骨细胞诱导8d时形态有较明显改变,14d时具有明显的软骨细胞形态。诱导培养液在诱导4d时即可检出少量AG,8d时AG浓度出现明显升高,并保持缓慢升高至20d。在14d时,诱导的细胞爬片TB染色可见异染颗粒；Ⅱ型胶原免疫组化明显阳性表现。与藻酸钙复合后,各组成软骨细胞在凝胶3D支架中均保持分裂增殖,AO染色见细胞能增殖成“葡萄串”样。各实验组材料切片Ⅱ型胶原免疫组化均可见阳性表达,以C组、D组为明显；AG含量检测显示各实验组、阳性对照组间AG含量具有差异（p<0.05）,C组、D组均高于阳性对照组,以C组AG含量为最高。结论：1.采用密度梯度离心法获取的兔BMSCs,在体外经过14d的定向诱导后基本向软骨细胞分化;2.藻酸钙凝胶与种子细胞生物相容性良好,可以采用注射方式植入诱导14d后的成软骨细胞在藻酸钙凝胶内增殖良好,分泌软骨细胞外基质功能较强。以BMSCs为种子细胞、藻酸钙为支架的可注射式软骨组织工程方法具有可行性。
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- [2].不同浓度葡萄糖对滑膜间充质干细胞成软骨能力调节作用的研究[J]. 中华关节外科杂志(电子版) 2016(05)
- [3].细胞传代对骨髓间充质干细胞成软骨细胞分化的影响[J]. 中外医疗 2008(03)
- [4].骨髓间充质干细胞复合多肽凝胶及成软骨生成因子修复兔关节软骨缺损[J]. 中国组织工程研究 2015(01)
- [5].压力对大鼠BMSCs增殖及成软骨能力影响[J]. 牙体牙髓牙周病学杂志 2013(04)
- [6].人间充质干细胞体外成软骨分化能力综合评价策略研究[J]. 中国新药杂志 2017(18)
- [7].关节软骨源性微载体生物相容性及异位成软骨特性观察[J]. 中华关节外科杂志(电子版) 2013(06)
- [8].压力调控下骨髓间充质干细胞与脂肪干细胞成软骨能力的比较研究[J]. 牙体牙髓牙周病学杂志 2014(02)
- [9].骨髓间充质干细胞复合富血小板纤维蛋白异位成软骨的实验研究[J]. 牙体牙髓牙周病学杂志 2013(03)
- [10].人羊膜间充质干细胞膜片的构建及其成软骨诱导的实验研究[J]. 中国运动医学杂志 2019(06)
- [11].大鼠骨内膜骨髓细胞增殖和成软骨分化能力的体外研究[J]. 华南国防医学杂志 2018(04)
- [12].重组人干扰素β1a对人骨髓间充质干细胞成软骨细胞定向分化的影响[J]. 生物工程学报 2018(06)
- [13].人脂肪组织来源血管周干细胞成骨、成脂、成软骨分化能力研究[J]. 中国实用口腔科杂志 2018(07)
- [14].Wnt信号通路在压力调控骨髓间充质干细胞膜片成软骨响应中的作用[J]. 牙体牙髓牙周病学杂志 2014(01)
- [15].P38MAPK信号通路在压力调控骨髓间充质干细胞膜片成软骨响应中的作用[J]. 中华临床医师杂志(电子版) 2013(04)
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- [17].bFGF对hBMSCs增殖及成软骨能力影响的实验研究[J]. 组织工程与重建外科杂志 2017(06)
- [18].CD204阴性人脂肪来源细胞体外成软骨潜能的初步研究[J]. 组织工程与重建外科杂志 2012(01)
- [19].梓醇对大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖和成软骨分化能力的影响[J]. 中华中医药学刊 2020(02)
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- [23].不同来源骨髓间充质干细胞的体内成软骨[J]. 中国组织工程研究与临床康复 2011(49)
- [24].脂肪间充质干细胞成软骨细胞诱导后的再培养[J]. 山东大学学报(医学版) 2014(12)
- [25].BMPs信号通路在压力调控兔BMSCs成软骨响应中的作用[J]. 牙体牙髓牙周病学杂志 2013(04)
- [26].脂肪干细胞与骨髓间充质干细胞成软骨能力的比较[J]. 中国组织工程研究 2013(32)
- [27].淫羊藿苷促进软骨细胞体外3-D培养下生成软骨[J]. 中国老年学杂志 2015(10)
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