论文摘要
目的:失重会使肺功能受到影响,并可导致一定程度肺组织损伤。本实验采用大鼠尾悬吊模拟失重的方法,研究模拟失重后大鼠肺组织蛋白组学变化情况,深入了解失重所致肺损伤的发生机制;同时选择N-乙酰半胱氨酸和银杏叶提取物进行药物干预,观察大鼠肺组织细胞凋亡和一氧化氮表达情况的变化,为失重所致肺损伤的药物防护提供理论依据。方法:1.蛋白组学研究:选择健康雄性S-D大鼠20只,体重180-220g,随机分为模拟失重7天和正常对照2组,采用尾悬吊-30°作为模拟失重模型。尾悬吊结束时,用10%水合氯醛(30ml/kg)腹腔注射麻醉后,打开胸腔取出肺组织并提取肺组织蛋白,蛋白提取后采用双向电泳技术(2-DE)建立差异表达图谱,通过凝胶成像分析和人工比对,确定差异蛋白质斑点,然后对每个差异蛋白点进行胶内酶切,采用HDMS进行液相串联质谱(LC-MS/MS)分析结合数据库检索鉴定蛋白质。最后对差异蛋白的生物学功能进行较为详细的了解和分类,进一步深入研究它们的功能。2.药物干预研究:选择健康雄性S-D大鼠40只,体重180-220g,随机分为模拟失重7天、正常对照、N-乙酰半胱氨酸干预和银杏叶提取物干预4组,采用尾悬吊-30°作为模拟失重模型。尾悬吊结束时,用10%水合氯醛(30ml/kg)腹腔注射麻醉后,打开胸腔取出肺组织制作石蜡切片。采用原位细胞凋亡检测法、免疫组织化学法和原位杂交法分别观察大鼠肺组织细胞凋亡、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和bcl-2、bax及iNOS mRNA的变化。结果:1.蛋白组学变化:应用2-DE对悬吊组和对照组大鼠肺组织样品进行分离和对比,建立差异表达图谱,通过凝胶成像分析和人工比对,确定差异蛋白质斑点17个,其中13个上调,3个下调,1个消失。这些点分布在等电点4.65-8.61、分子量15972-60317范围内,最大表达上调6.9倍,下调最低至0.1倍。经胶内酶切和质谱鉴定,共鉴定出17种蛋白质,其中13种上调,3种下调,1种消失,与细胞代谢相关的5个,与细胞功能相关的4个,与细胞结构蛋白相关的3个,与蛋白降解系统相关的2个,与信号传导相关的3个。它们可能与细胞能量代谢、应激与炎症反应、细胞损伤与修复、细胞内信号转导和其它细胞功能活动有关,在细胞免疫应答、细胞凋亡等方面起着重要的作用。2.药物干预结果:悬吊组大鼠肺组织细胞凋亡指数(23.1%±2.6%)明显高于正常对照组(2.2%±1.1%)(P<0.05),而N-乙酰半胱氨酸干预组大鼠肺组织细胞凋亡指数(7.5%±1.6%)显著低于尾悬吊组(P<0.05),大鼠肺组织bcl-2/baxmRNA的表达也有相应的变化(P<0.05)。悬吊组大鼠肺组织iNOS表达水平明显高于对照组(P<0.05),而N-乙酰半胱氨酸干预组大鼠肺组织iNOS表达水平明显低于7天悬吊组(P<0.05),大鼠肺组织iNOS mRNA表达也有相应的变化(P<0.05)。同样,银杏叶提取物干预组大鼠肺组织细胞凋亡指数(8.1%±1.7%)显著低于尾悬吊组(P<0.05),其bcl-2/baxmRNA的表达也有相应的变化(P<0.05)。而且银杏叶提取物干预组大鼠肺组织iNOS表达水平也明显低于7天悬吊组(P<0.05),其iNOS mRNA表达也有相应的变化(P<0.05)。结论:模拟失重后大鼠肺组织蛋白组学发生变化,有些蛋白表达上调,而有些蛋白表达下调甚至消失,影响细胞能量代谢、应激与炎症反应、细胞损伤与修复以及细胞内信号转导等细胞功能活动,在失重所致肺组织损伤中发挥着重要的作用。模拟失重时大鼠肺组织细胞凋亡水平增高,iNOS表达水平也增高,而N-乙酰半胱氨酸和银杏叶提取物均可抑制模拟失重大鼠肺组织的细胞凋亡过度,并能降低iNOS的表达水平。
论文目录
相关论文文献
- [1].超声评价模拟失重状态下女性颈内动脉及椎动脉血流[J]. 中华临床医师杂志(电子版) 2013(02)
- [2].模拟失重对门静脉血流动力学影响的彩色多普勒超声研究[J]. 中华医学超声杂志(电子版) 2010(05)
- [3].头低位卧床模拟失重状态下房室平面运动的定量组织速度成像[J]. 第四军医大学学报 2009(10)
- [4].模拟失重条件下人体出汗变化规律的实验研究[J]. 湖南大学学报(自然科学版) 2017(09)
- [5].心肌做功指数评价模拟失重对成人右心功能的影响[J]. 航天医学与医学工程 2010(05)
- [6].模拟失重对肺微血管内皮细胞屏障功能的影响[J]. 军医进修学院学报 2012(09)
- [7].血管回声跟踪技术评价模拟失重状态对女性颈总动脉血管弹性的影响[J]. 中华临床医师杂志(电子版) 2012(20)
- [8].模拟失重环境下个体认知功能研究新进展[J]. 科学通报 2011(33)
- [9].模拟失重状态下大鼠心血管中枢组织基因组变化研究[J]. 航天医学与医学工程 2010(04)
- [10].模拟失重对人自然杀伤细胞毒活性的影响[J]. 航天医学与医学工程 2009(05)
- [11].模拟失重对大鼠心肌组织细胞因子基因表达谱的影响[J]. 航天医学与医学工程 2008(01)
- [12].中药对模拟失重大鼠骨骼-肌肉系统干预的初步研究[J]. 中国中医药信息杂志 2008(05)
- [13].模拟失重48h后血管内皮细胞长链非编码RNA的差异表达分析[J]. 航天医学与医学工程 2019(01)
- [14].回转模拟失重对共培养体系中平滑肌细胞增殖及凋亡的影响[J]. 贵州医科大学学报 2019(03)
- [15].间断人工重力对模拟失重大鼠股动脉整合素αvβ3通路分子表达的影响[J]. 空军医学杂志 2016(06)
- [16].模拟失重状态下人体焦虑状况及心理状态调查分析[J]. 护理研究 2011(05)
- [17].模拟失重及再负荷对大鼠承重骨影响的研究进展[J]. 航天医学与医学工程 2010(06)
- [18].模拟失重状态对健康人视觉诱发电位的影响[J]. 总装备部医学学报 2009(03)
- [19].解除模拟失重后清醒大鼠血压信号的谱分析[J]. 生理学报 2008(01)
- [20].结合模拟失重,改进大学生理学骨骼肌收缩实验[J]. 四川动物 2019(05)
- [21].失重或模拟失重条件下细胞骨架调控血管内皮功能的研究进展[J]. 解放军医学院学报 2015(02)
- [22].失重或模拟失重对血管内皮细胞影响的研究进展[J]. 解放军医学院学报 2013(12)
- [23].模拟失重可加重超重所致大鼠学习记忆功能障碍和神经细胞凋亡[J]. 医学争鸣 2010(04)
- [24].不同时长模拟失重对大鼠生理指标的影响[J]. 中国医药导报 2018(16)
- [25].尾悬吊模拟失重对雌性大鼠生殖功能的影响[J]. 中国病理生理杂志 2011(04)
- [26].模拟失重环境对动物腰椎间盘Ⅰ、Ⅱ型胶原、转化生长因子-β的影响[J]. 空军医学杂志 2016(06)
- [27].中药复方含药血清对回转模拟失重成骨细胞影响的观察[J]. 中国中医骨伤科杂志 2009(02)
- [28].模拟失重对大鼠股骨骨髓微循环的影响[J]. 空军总医院学报 2009(03)
- [29].中药复方干预3周模拟失重大鼠骨丢失的初步研究[J]. 中国骨伤 2008(09)
- [30].胰岛素样生长因子-1对模拟失重下成骨细胞整合素亚单位表达的影响[J]. 广东医学 2013(04)