论文摘要
羌活为伞形科植物羌活Notopterygium incisum Ting ex H．T．Chang或宽叶羌活Notopterygium forbesii Boiss．的干燥根茎及根，独活为伞形科植物重齿毛当归Angelicapubescens Maxim．f．biserrata Shan et Yuan的干燥根，两者作为常用中药收载于《中国药典》2005年版（一部）。由于两者来源相近、功效相似、外观性状差异不大，致使商品市场和临床用药中极易混淆。本研究收集了17个不同产地的羌活和独活药材，通过所含挥发油量的差异和GC、HPLC指纹图谱方法对两者进行了比较，对羌活和独活药材的鉴别和质量控制进行了系统的研究。挥发油和香豆素类成分为羌活和独活的主要药效成分。本研究测定了17批不同产地羌活和独活药材中挥发油的量。然后采用GC-FID法建立了两者挥发油的指纹图谱，使用DB-1毛细管气相色谱柱（30 m×0．25 mm×0．25μm），采用程序升温，在65min内，柱温从50℃以8℃·min-1升至85℃（保持12 min），以4℃·min-1升至155℃（保持18 min），再以12℃·min-1升至250℃（保持5 min），检测器温度为270℃。对17批羌活和独活药材挥发油进行指纹图谱分析，结果表明两者具有较大差异。将羌活GC指纹图谱所得数据进行聚类分析，以夹角余弦（Cosine）作为样品相似性测度。17批羌活分为3类，第Ⅰ类为推荐品，第Ⅱ、Ⅲ类为非推荐品（包括劣品和伪品），选取Ⅰ类的15批药材建立共有模式，采用药典委员会推荐的色谱指纹图谱处理软件，计算样品与共有模式之间的相似度，0．85以上者为羌活推荐药材；同法17批独活分为4类，第Ⅰ类为推荐品，第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类为非推荐品，选取Ⅰ类的11批药材建立共有模式并计算相似度，0．85以上者为独活推荐药材。将羌活样品GC指纹图谱代入独活GC共有模式计算相似度，最高者只有0．39；将独活样品GC指纹图谱代入羌活GC共有模式计算相似度，最高者也只有0．52。结果表明GC指纹图谱方法可以准确地鉴别羌活与独活药材，同时，通过两者挥发油量的差异可进一步对两者进行鉴别。本研究建立了羌活与独活的HPLC指纹图谱方法，采用Diamonsil C18柱（250 mm×4．6 mm，5μm），流动相为甲醇：乙腈（1：1）（A）-0．03％磷酸水溶液（B），梯度洗脱程序为：0～30 min，20％～46％A；30～46 min，46％～48％A；46～48 min，48％～72％A；48～60 min，72％A；60～62min，72％～95％A；62～70 min，95％A，检测波长320 nm。对17批羌活和独活药材进行指纹图谱分析，结果表明两者具有显著差异。将羌活HPLC指纹图谱所得数据进行聚类分析，17批羌活分为3类，第Ⅰ类为推荐品，第Ⅱ、Ⅲ类为非推荐品，选取Ⅰ类的8批药材建立共有模式并计算相似度，0．85以上者为羌活推荐药材；17批独活分为5类，第Ⅰ类为推荐品，第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ类为非推荐品，选取Ⅰ类的13批药材建立共有模式并计算相似度，0．85以上者为独活推荐药材。将羌活样品HPLC指纹图谱代入独活HPLC共有模式计算相似度，最高者只有0．22；将独活样品HPLC指纹图谱代入羌活HPLC共有模式计算相似度，最高者只有0．11。结果表明HPLC指纹图谱方法可以准确地鉴别羌活与独活药材。本研究将GC和HPLC指纹图谱方法相结合，共同对收集的羌活和独活药材进行质量评价，并对两者进行比较和鉴别，方法简便快速、科学可靠，为两者在临床应用中的区分和质量控制提供了依据。