急性白血病相关基因甲基化异常的研究

论文摘要

DNA甲基化异常是急性白血病（AL）重要发病机制之一。ZO-1是一种紧密连接蛋白,在细胞连接及信号传导中起重要作用,参与调控细胞的增殖与分化。前期工作表明,该基因在白血病小鼠中呈高甲基化状态,推测其可能是一个新的白血病相关基因。本研究通过对细胞系及大量临床标本ZO-1基因启动子区甲基化状态进行检测,首次证明ZO-1基因是一个新的人白血病相关基因,该基因启动子区在各种类型AL中呈特异性高甲基化状态,与AL发生发展密切相关,是一个新的预后不良因素;ZO-1基因的表达受甲基化状态调控。ZO-1基因启动子区高甲基化是一个新的白血病通用分子标志物,对其进行检测可作为AL早期诊断、疗效评估、预后判断、复发预测、靶向治疗、微小残留病（MRD）监测和指导个体化治疗的有效手段,具有深远的临床意义及推广应用价值。首次成功建立用于定量检测ZO-1基因启动子区甲基化水平的SYBR-GreenI RQ MS-PCR方法,灵敏度高、特异性好,可作为一种新的、良好的白血病MRD监测手段。在国内首次将RLGS技术用于白血病研究,获得了AL及正常人基因组扫描图谱。经RLGS扫描图谱比对,获得300多个因甲基化程度不同而显影强度不等的差异点,在NotI-EcoRV文库中寻找到其中46个点所对应的基因序列信息。经初步验证已经获得3个新的白血病相关候选基因。为更好的揭示急性白血病发病机理,寻找新的白血病分子标记及治疗靶点做好前期工作及理论铺垫。

论文目录

• 提要
• 缩略词索引表
• 前言
• 一、DNA甲基化异常修饰与肿瘤
• 二、DNA甲基化研究方法
• 三、急性白血病相关候选基因ZO-1研究概况
• 四、本研究内容、目的及意义
• 第一部分 急性白血病ZO-1 基因启动子区甲基化状态检测及临床意义研究
• 技术路线
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 用于检测ZO-1 基因启动子区甲基化状态的 SYBR- GreenI Quantitative Real-time MS-PCR 方法建立及初步应用
• 技术路线
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第三部分 应用RLGS 方法进行白血病相关基因初步筛选及验证
• 技术路线
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 攻读博士期间发表的论文及成果
• 中文摘要
• Abstract
• 致谢