论文摘要
肝再生增强因子是一种重要的肝再生刺激因子,自从发现以来,因其特殊的基因结构特点、多种生物学活性尤其是对急慢性肝损伤的保护作用,使得该因子受到多方面重视。尽管尚未完全得知ALR抗肝损伤的确切机制,但大量研究结果证实hALR对肝硬化具有一定程度的保护作用。本论文的研究主要包括人肝再生增强因子的原核表达质粒的构建、表达及其初步药效学研究。通过对hALR天然基因序列的修饰,设计合成hALR基因片段。构建了四种原核表达质粒,从中筛选出一个比较合适的表达质粒。通过原核表达系统,得到大量的ALR125蛋白,并通过纯化手段将其提纯出来,利用Western Blot等检测手段对获得的ALR125蛋白进行特异性检测。建立小鼠的急性肝损伤模型,对纯化得到的ALR125进行了初步药效学研究。通过本论文的实验,构建了一个合适的ALR125原核表达质粒,并在实验室水平上对ALR125进行了有效的提纯。表达所得ALR125蛋白在促肝损伤恢复方面也有比较好的表现,为以后ALR125成为治疗肝损伤的药物做了研究铺垫。