（1.济南市卫生科技交流服务中心，山东济南，250013；2.山东省药学科学院）
【摘要】目的检测甲巯咪唑软膏经皮给药后SD大鼠血药浓度和甲状腺组织中药物浓度，并与市售甲巯咪唑片进行比较以评价其透皮吸收性能。方法将SD大鼠随机分为甲巯咪唑软膏经皮给药组和甲巯咪唑片灌胃组，于不同时间点采血并留取甲状腺组织。高效液相法检测血浆和甲状腺组织中甲巯咪唑浓度，并比较两组药物浓度差异。结果经皮给药组血药浓度明显低于灌胃给药组，甲状腺组织中甲巯咪唑浓度在两组中无明显差异。结论甲巯咪唑软膏甲状腺局部经皮给药，具有良好的透皮吸收性能；与口服相比，甲巯咪唑软膏局部经皮用药治疗甲亢更加安全、有效。
【关键词】甲巯咪唑软膏；透皮吸收；甲状腺机能亢进症
【中图分类号】R2【文献标号】A【文章编号】2095-9753（2018）08-0226-02
甲巯咪唑能够抑制甲状腺激素的合成，是临床治疗甲状腺功能亢进的一线药物。由于甲巯咪唑生物半衰期短，药物口服剂量大，服用次数频繁，患者治疗不方便。同时部分患者口服后会出现粒细胞减少，肝功能异常等严重不良反应[1-3]。研究发现，甲巯咪唑只有进入甲状腺组织才能发挥抑制甲状腺素合成的有效作用，抑制甲状腺素合成的强弱取决于甲状腺内的局部药物浓度[4]。为了降低血药浓度，减少不良反应的发生，近年来发明了用于局部皮肤给药的甲巯咪唑软膏。
本试验比较了甲巯咪唑软膏经皮给药和甲巯咪唑片灌胃给药两组间血药浓度和甲状腺局部组织药物浓度的差异，对甲巯咪唑软膏的透皮吸收性能进行了综合评价。
1、材料
1.1试验仪器
204型高效液相色谱仪(美国Waters公司)；440型紫外检测器；730-型数据处理仪；色谱柱μ-βcndapakCN3.9mm×30cm；液体快速混合器(江西医疗器械厂)；分析天平(北京光学仪器厂)；80-2型离心机(上海分析仪器厂)。
1.2试验动物
SPF级SD大鼠160只，由上海斯莱克实验动物有限公司提供[合格证号：SCXK(沪)2007-0005]。
1.3试验药物
5%甲巯咪唑软膏：由济南市卫生科技交流服务中心中试基地生产，批准文号：鲁药制字H0120030538，产品批号：20130608。
甲巯咪唑片：由上海黄海制药有限责任公司，批准文号：国药准字H31021243，产品批号：130201。
甲巯咪唑对照品：由中国生物制品检定研究院提供，批号：20130511。
2、方法
2.1动物分组、给药及血样采集
检疫合格的SPF级SD大鼠160只，随机分为甲巯咪唑软膏经皮给药组和甲巯咪唑片灌胃给药组，每组设8个取样时间点，每点10只。
经皮给药组于试验前24h内，用脱毛剂对大鼠颈前部皮肤脱毛，脱毛面积为2cm×2cm，准确称取5%甲巯咪唑软膏均匀涂布于脱毛区内，给药量为3mg/kg体重；甲巯咪唑片灌胃给药组给药量为3mg/kg体重。
于给药前和给药后0.5，1.0，1.5，2.0，3.0，4.0，6.0，8.0h大鼠颈动脉取血3.0mL，离心留取血清。同时处死大鼠留取甲状腺组织。
2.2样品的预处理
取待测血清1.0mL，加内标液15.0μL，加0.25%正辛醇氯仿溶液5.0mL，用液体快速混合器振荡30s，以3000rpm离心2min，分取有机层，于37℃水浴恒温下氮气吹干，残渣用重蒸馏水60.0μL溶解，快速振荡1min，离心2min，吸取上清液15.0μL。同上平行操作3次，进行高效液相色谱分析。甲状腺组织预处理：称取甲状腺组织50mg，加4mL注射用水，匀浆后按血清预处理项下加内标液15μL，同法操作，进行高压液相色谱分析。
2.3样品检测
2.3.1甲巯咪唑对照品及内标物溶液的制备
精称干燥至恒重的甲巯咪唑对照品100mg，置500mL容量瓶中，用蒸馏水定容，并制成含不同浓度的甲巯咪唑对照品溶液。内标物苯甲酰胺溶液配制精确称量并干燥至恒重的苯甲酰胺100mg，置250mL容量瓶中，用甲醇定容。
2.3.2色谱条件
流动相为甲醇-水(10∶90)，流速1.0mL/min，纸速0.5cm/min，检测波长为254nm，用峰面积内标法定量。
2.3.3血浆标准曲线
取带塞试管8支，分别吸取空白血清一定量，加入不同浓度的甲巯咪唑对照品溶液，制成血清浓度为0.1，0.2，0.4，0.8，1.2，1.6，2.0，2.5，3.0μg/mL的系列溶液，按上述样品处理方法操作，进样15μL。甲巯咪唑与内标物苯甲酰胺的保留时间分别5.20min和7.49min。将甲巯咪唑与苯甲酰胺的峰面积比值对甲巯咪唑血清浓度作图，计算回归方程，得：Y=0.00362C-0.528,r=0.9967,(n=7)，甲巯咪唑浓度在0.2-3.0μg/mL，范围内线性关系良好。最低检测限为0.1μg/mL。
2.4数据处理
实验数据以均数±标准差（）表示，采用SPSS13.0统计软件进行统计处理。两样本均数比较采用t检验，多组均数比较首先进行方差齐性检验。P<0.05作为差异显著性界值。
3、结果
结果显示，甲巯咪唑软膏具有良好的透皮吸收性能。甲巯咪唑软膏经皮给药，血中甲巯咪唑可达到一定的药物浓度，但经皮给药组不同时间点血液中甲巯咪唑浓度明显低于甲巯咪唑灌胃给药组，而甲状腺组织中的甲巯咪唑浓度在两组中无明显差异，详细结果见下表。
表不同时间点SD大鼠血清及甲状腺组织中甲巯咪唑浓度测定值
注：两组血清甲巯咪唑浓度比较，*p<0.05,**p<0.01
4、讨论
甲状腺机能亢进症是由于甲状腺功能增强、甲状腺激素合成和分泌增多引起的系统性疾病，因此抑制甲状腺激素的合成是治疗甲亢的关键[5,6]。目前临