论文摘要
八角科(Illiciaceae)植物为单属科植物,常绿乔木或灌木,枝叶具有香气,春季开红花,具有很高的观赏价值。因其果实大多有毒,园林绿化应用甚少。但有报导认为江浙地区八角科植物中也有不结果实的,可避免有毒果实的危害。为此,本文调查了江浙地区八角科植物的生物学特性,并从形态特征、分子标记、生化标记三个水平上对其遗传多样性进行了研究,为从八角科植物中筛选出适宜园林绿化的新树种提供实验依据,取得如下主要实验结果:1.在前人研究的基础上,进一步研究了八角科植物的生物学特性,初步探明了八角科植物枝、叶、花、果实生长发育的基本规律;发现供试的江浙地区八角植物在形态特征上表现丰富的遗传多样性,但在形态分类上均属于披针叶八角种,种内可进一步划为11种不同类型。2.以披针叶八角种内不同类型的12种植物材料为研究对象,从叶片中提取DNA,设计特异引物,进行PCR扩增,获得并分析ITS序列。结果表明,披针叶八角不同类型植物的ITS序列长度634-637bp,序列差异值为0-2.4%,其中有2组5种实验材料的ITS序列完全一致,而其生物学特征存在一定的差别。结合供试材料的表型分析结果,可以认为屈良鹄提出的按ITS序列差异值进行分类的方法并不适于八角科披针叶八角种。3.从12种不同类型植物的幼叶中提取酶液,分析它们的过氧化物同工酶酶谱,结果从过氧化物同工酶的电泳图谱中检测到10条酶带,有两条特征酶带可鉴别供试植物中的两个材料。聚类分析表明,在相似系数0.70处可将供试植物分为3类,聚类情况与供试植物的来源地、结实性、蓇葖果数的分类基本吻合。4.以八角科植物的幼嫩叶片为试验材料,在优化双向电泳(2-DE)技术的基础上,对不同来源的3种披针叶八角植物叶片蛋白质组进行了分析,结果在来源于南京、苏州、杭州的3种代表性植物的2-DE图谱上检测到了蛋白质组的差异表达,三者的蛋白质斑点匹配率在63.9 %-70.5 %;同时在2-DE图谱上检测到了7种特异表达的蛋白质组分,推测这种差异表达蛋白与披针叶八角植物种内不同类型的遗传组成差异有关。
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中文摘要Abstract引言第一章 文献综述1.1 八角科植物分类研究概述1.2 植物遗传多样性的概念与研究方法1.2.1 遗传多样性的概念1.2.2 遗传多样性的研究方法1.3 形态标记与遗传多样性1.4 核基因组与分子系统学1.4.1 核糖体基因的基本结构和ITS 序列特点1.4.2 rDNA ITS 序列在系统发育研究中的应用1.5 生化标记与遗传多样性1.5.1 同工酶技术与系统分类1.5.2 蛋白质组学与遗传多样性1.6 本研究的意义和目的第二章 江浙地区八角科植物的生物学特性分析2.1 材料与方法2.1.1 资源材料的收集2.1.2 树体特性的调查2.1.3 枝叶的生长发育调查2.1.4 花的生长发育调查2.1.5 果实的生长发育调查2.1.6 抗逆性调查2.2 结果与分析2.2.1 八角科植物树体的特征分析2.2.2 八角科植物枝叶的生长发育分析2.2.3 八角科植物花的生长发育分析2.2.3.1 花芽分化2.2.3.2 开花动态2.2.3.3 开花物候2.2.4 八角科植物果实的生长发育分析2.2.4.1 结实动态2.2.4.2 坐果率与生理落果率2.2.5 供试八角科植物形态特征的分类2.2.6 八角科植物的抗逆性分析2.3 讨论第三章 江浙地区八角科植物遗传多样性的ITS 序列分析3.1 材料与方法3.1.1 植物材料3.1.2 试剂和仪器3.1.3 叶片基因组DNA 的提取3.1.4 目的基因片段的扩增与克隆3.1.5 序列分析3.2 结果与分析3.2.1 八角科植物rDNA ITS 序列的PCR 扩增分析3.2.2 八角科植物ITS 序列的分析3.2.3 ITS 序列特异位点的分析3.2.4 ITS 序列同源性和差异性的分析3.2.5 系统进化分析3.3 讨论第四章 江浙地区八角科植物遗传多样性的生化分析4.1 八角科植物叶片POD 同工酶分析4.1.1 材料与方法4.1.1.1 植物材料4.1.1.2 试剂和仪器4.1.1.3 POD 酶液的提取4.1.1.4 电泳与酶带分析4.1.2 结果与分析4.1.2.1 过氧化物同工酶酶谱特征分析4.1.2.2 过氧化物同工酶的聚类分析4.1.3 讨论4.2 江浙地区八角科植物遗传多样性的双向电泳分析4.2.1 材料与方法4.2.1.1 植物材料4.2.1.2 试剂和仪器4.2.1.3 蛋白质样品的制备4.2.1.4 双向电泳与电泳图谱分析4.2.2 结果与分析4.2.2.1 双向电泳技术及分离效果的分析4.2.2.2 几种八角科植物差异蛋白质组的分析4.2.3 讨论结论参考文献攻读硕士学位期间发表的论文致谢
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