泽泻防治泌尿系结石有效部位工艺及药理学研究

论文摘要

目的:在前期国家自然科学基金（No: 39970891）研究的基础上,初步确定泽泻防治泌尿系结石有效部位为提取物中的总三萜成分。本文应用大孔吸附树脂分离纯化泽泻药材中的三萜类化学成分,使其含量达到50%以上,其标示量成分23-乙酰泽泻醇B含量达到1.29%以上,并通过药效学实验进一步确证该有效部位为防治泌尿系结石的活性部位。方法与结果:1、建立了泽泻有效部位中总三萜的含量测定方法。以药材中含量最高的三萜类23-乙酰泽泻醇B为对照品,用5%香草醛-冰醋酸溶液,高氯酸显色,在554nm波长处测定样品吸收度。实验表明23-乙酰泽泻醇B在23.80～142.8ug线性范围内,线性关系良好,其回归方程为Y=0.0055x-0.0512,r=0.9996。该方法操作简便,结果稳定,重现性好,可作为泽泻药材质量监控的有效手段。2、建立了泽泻有效部位中23-乙酰泽泻醇B的HPLC-ELSD含量测定方法。以23-乙酰泽泻醇B为对照品,应用HPLC-ELSD对泽泻有效部位中23-乙酰泽泻醇B的含量测定进行了方法学考察。结果表明在23-乙酰泽泻醇B进样量在0.1384ug～0.6920ug之间时线性关系良好,其回归方程为:Y=494467X-4426.9,r=0.9999。加样回收率为99.97%,RSD为2.680%。精密度、重复性、稳定性实验也均符合要求。3、建立了泽泻防治泌尿系结石有效部位的制备方法。首先优化了泽泻有效部位的提取工艺,以23-乙酰泽泻醇B含量为指标对提取工艺进行优化,经正交实验考察,确定最佳提取工艺为:70%乙醇、用量为10倍量、提取3次、每次1.5h。继而对大孔吸附树脂分离富集有效部位的工艺进行了筛选及优化。泽泻浸膏用一定量50%乙醇溶解后,上样于D型大孔吸附树脂,充分吸附后,再用一定量蒸馏水,30%乙醇,90%乙醇依次洗脱,收集90%乙醇洗脱液,蒸干溶剂,干燥,即为所得。以23-乙酰泽泻醇B为对照品计算,富集产物中总三萜类含量可达50%以上,23-乙酰泽泻醇B含量可达1.290%以上。实验表明:D型大孔吸附树脂适合分离纯化泽泻中极性较小的三萜类成分。4、探讨中药泽泻总三萜有效部位在体外对草酸钙结晶形成的影响,并初步确定其抑制草酸钙结石形成的有效部位。应用种晶技术检测泽泻不同浓度的总三萜提取物在体外对一水草酸钙晶体生长指数（I.I）。结果表明泽泻总三萜浸膏高、低剂量组的草酸钙晶体生长抑制指数高达87.75%。中药泽泻总三萜提取物能明显抑制草酸钙晶体的生长,是泽泻抑制草酸钙结石形成的有效部位,对该部位的有效化学活性成分有待于进一步的研究。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 正文部分 泽泻实验研究
• 第一章 泽泻有效部位总三萜的含量测定
• 1.1 仪器与试药
• 1.2 对照品和供试品溶液的制备
• 1.3 方法学认证实验
• 第二章 泽泻有效部位中23-乙酰泽泻醇B 的含量测定
• 2.1 实验仪器及试药
• 2.2 对照品和供试品溶液的制备
• 2.3 色谱条件
• 2.4 方法学认证实验
• 第三章 泽泻有效部位制备工艺研究
• 第一节 有效部位提取工艺研究
• 第二节 有效部位分离纯化工艺研究
• 第三节 有效部位鉴别
• 第四章 泽泻中总三萜抑制尿草酸钙结石形成的体外研究
• 4.1 实验仪器及试药
• 4.2 方法与结果
• 讨论
• 参考文献
• 综述及参考文献
• 致谢
• 附件：攻读硕士期间发表文章目录