屎肠球菌固态发酵工艺优化与应用研究

论文摘要

抗生索作为饲料添加剂,防治疾病促进生长效果明显。但随着长期使用,抗生素带来的细菌耐药性问题,引起人们的广泛重视,许多国家早已纷纷立法禁止或限制饲用抗生素的使用。寻找安全、无毒的替代品迫在眉睫。益生菌制剂作为饲用抗生素的替代品,是一种无毒副作用无残留的绿色饲料添加剂,可促进动物生长,防治肠道疾病,改善养殖环境,有利于环保和生态养殖业的可持续发展。益生肠球菌为动物肠道的止常菌群,在肠道微生态中维持一定的数量,与肠道中其他益生菌互惠共生,对动物正常生理状态的维持和生长繁殖都有重要意义。本论文从屎肠球菌固态发酵工艺的优化及放大,屎肠球菌制剂的应用特性如耐热性和耐贮性等方面进行了研究。具体研究结果如下：1.采用单因素法确定屎肠球菌在罐头瓶中固态发酵的最优发酵条件为种龄12h,接种量5%,装料20g,发酵温度37℃,发酵周期36h；最优发酵培养基以麸皮为基质,添加4%无机盐C和1%氮源G,调节料水比为1：3。采用优化后发酵工艺条件生产的屎肠球菌制剂中活菌数达到5.6×lO9CFU/g。2.分别采用三种不同规格的固态发酵罐,将屎肠球菌固态发酵工艺放大。采用2L固态发酵罐装料250g,发酵所得的屎肠球菌制剂中活菌数为7.2×109CFU/g;采用34L固态发酵罐装料5.5kg,发酵所得的屎肠球菌制剂中活菌数为6.45×109CFU/g;采用170L固态发酵罐装料25kg,发酵所得的屎肠球菌制剂中活菌数为6.8×109CFU/g。3.研究屎肠球菌制剂的耐热性和耐贮性结果发现,含水率为18%的屎肠球菌制剂经90℃处理2min及100℃处理1min后,存活率分别为76.76%及84.87%；将屎肠球菌制剂含水率控制在6%-8%,28℃贮存8周后,存活率在68.44%-75.00%之间。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1. 前言
• 1.1 研究背景
• 1.2 饲料添加剂
• 1.2.1 饲用抗生素
• 1.2.2 寡糖
• 1.2.3 饲用酶制剂
• 1.2.4 酸化剂
• 1.2.5 抗菌肽
• 1.2.6 中草药
• 1.3 微生态制剂研究进展
• 1.3.1 饲用抗生素的淡出
• 1.3.2 微生态制剂的出现
• 1.3.3 微生态制剂研制的理论依据
• 1.3.4 微生态制剂的菌种筛选标准
• 1.3.5 微生态制剂常用菌种
• 1.4 乳酸菌制剂研究进展
• 1.4.1 乳酸菌制剂的作用机理
• 1.4.2 乳酸菌制剂的生产工艺
• 1.4.3 影响乳酸菌制剂应用效果的因素
• 1.4.4 乳酸菌制剂的研究方向
• 1.5 屎肠球菌制剂研究进展
• 1.5.1 肠球菌的生物特性
• 1.5.2 益生肠球菌的应用特性
• 1.5.3 益生肠球菌制剂的应用
• 1.6 研究目的与意义
• 2. 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 菌种
• 2.1.2 原料
• 2.1.3 培养基
• 2.1.4 仪器设备
• 2.2 菌种活化复壮
• 2.3 种子液制备
• 2.4 测定生长曲线
• 2.5 固态发酵
• 2.6 固态发酵条件优化
• 2.6.1 接种种龄
• 2.6.2 接种量
• 2.6.3 装料量
• 2.6.4 发酵温度
• 2.6.5 发酵周期
• 2.7 固态发酵培养基的优化
• 2.7.1 料水比
• 2.7.2 外加碳源
• 2.7.3 外加氮源
• 2.7.4 外加无机盐
• 2.7.5 无机盐C
• 2.7.6 氮源G
• 2.8 固态发酵工艺放大
• 2.8.1 2L固态发酵罐
• 2.8.2 34L固态发酵罐
• 2.8.3 170L固态发酵罐
• 2.9 屎肠球菌应用特性研究
• 2.9.1 耐热性
• 2.9.2 耐贮性
• 2.10 活性测定方法
• 3. 结果与分析
• 3.1 固态发酵条件优化
• 3.1.1 生长曲线
• 3.1.2 接种种龄
• 3.1.3 接种量
• 3.1.4 装料量
• 3.1.5 发酵温度
• 3.1.6 发酵周期
• 3.2 固态发酵培养基优化
• 3.2.1 料水比
• 3.2.2 外加碳源
• 3.2.3 外加氮源
• 3.2.4 外加无机盐
• 3.2.5 无机盐C
• 3.2.6 氮源G
• 3.3 固态发酵工艺放大
• 3.3.1 2L固态发酵罐
• 3.3.2 34L固态发酵罐
• 3.3.3 170L固态发酵罐
• 3.4 屎肠球菌应用特性研究
• 3.4.1 耐热性
• 3.4.2 耐贮性
• 4. 讨论
• 4.1 固态发酵工艺优化
• 4.2 固态发酵工艺放大
• 4.3 屎肠球菌应用特性研究
• 5. 结论与展望
• 5.1 结论
• 5.2 展望
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介