中药影响表皮葡萄球菌形成生物被膜关键基因的机制研究

论文摘要

目的目前表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis Se.)已成为院内感染的前四位病原体之一,研究发现生物被膜是该菌致病及感染难以治愈的主要原因,临床一般是采用大剂量的抗生素治疗此类感染,造成了目前该细菌对多数抗生素普遍存在耐药性。中药不易造成细菌耐药,是我国新药开发的优势所在。本实验拟筛选出影响Se.生物被膜的中药单体,探讨该药物影响Se.形成生物被膜关键基因的机制,并用于临床菌株的研究。方法1.以生物被膜表型阳性的标准菌株Se.ATCC35984在体外构建生物被膜模型,筛选出影响Se.生物被膜的中药单体。2.以生物被膜表型阳性的标准菌株Se.ATCC35984在体外构建生物被膜模型,抗生素(万古霉素、环丙沙星、红霉素)为对照药物,采用荧光定量PCR的方法,研究中药单体对标准菌株Se.ATCC35984形成生物被膜关键基因—icaA基因和agr基因表达的影响。3.以临床来源的Se.在体外构建生物被膜,抗生素(万古霉素、环丙沙星、红霉素)为对照药物,采用荧光定量PCR的方法检测药物作用前后icaA基因和agr基因表达,研究中药单体对临床分离株的生物被膜的影响。结果1.从五倍子、黄连、黄芩、黄柏四种临床常用的抗菌中药及其有效单体中筛选出了影响Se.ATCC35984生物被膜的中药单体——盐酸小檗碱,系黄连的主要作用成分。2.盐酸小檗碱对Se.ATCC35984形成生物被膜icaA基因和agr基因的影响作用不及抗生素(万古霉素、环丙沙星、红霉素);当不同浓度的盐酸小檗碱分别与抗生素(万古霉素、环丙沙星、红霉素)联用时,随着盐酸小檗碱的浓度增加,联合用药对icaA基因和agr基因的影响作用逐渐减弱。3.从临床收集到8株生物被膜阳性的Se.,对万古霉素100%敏感,对红霉素100%耐药,对环丙沙星耐药率为76%;盐酸小檗碱对临床菌株icaA基因和agr基因的影响弱于万古霉素,优于红霉素和环丙沙星,尤其是红霉素。结论1.盐酸小檗碱做为临床常用的一种抗菌中药单体,对Se.生物被膜有一定的影响,其可能通过抑制Se.生物被膜关键基因——icaA基因和agr基因的表达而影响Se.生物被膜的形成。2.盐酸小檗碱对Se.形成生物被膜关键基因表达的抑制作用不及抗生素(万古霉素、环丙沙星、红霉素),并且不能与抗生素(万古霉素、环丙沙星、红霉素)联合用药,它们之间存在拮抗作用。3.在治疗Se.生物被膜引起的感染时,首先使用抗生素治疗,但是当该菌对抗生素耐药严重时,可考虑使用盐酸小檗碱。

论文目录

• 符号说明
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 影响表皮葡萄球菌生物被膜的中药单体的筛选
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第二部分 中药单体影响表皮葡萄球菌ATCC35984 生物被膜关键基因的机制研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第三部分 中药单体影响表皮葡萄球菌形成生物被膜关键基因的临床研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 全文总结
• 参考文献
• 文献综述
• 致谢
• 攻读硕士期间发表的文章