本文主要研究内容
作者崔姗姗（2019）在《羊传染性脓疱病毒的分离鉴定及其部分毒力相关基因分子特征分析》一文中研究指出：羊传染性脓疱病(contagious ecthyma,CE),也被认为是羊传染性脓疱性皮炎(contagious pustular dermatitis),通常被称为羊口疮(sore mouth),是由传染性脓疱病毒(Orf virus,ORFV)引起的一类接触性传染病,其特点是在动物的口腔黏膜、唇部、齿龈、鼻孔周围、尾根等处形成丘疹、水疱、脓疱、溃疡以及结痂,绵羊、山羊等反刍动物还有人都可以感染羊传染性脓疱病毒。羊传染性脓疱病的暴发不仅会给养殖场和养殖户带来严重的经济损失,还可能会威胁到养殖户的身体健康,因此该病是一种重要的人兽共患传染病。2017年11月,吉林长岭某羊场病羊出现典型的口疮症状,该羊场共饲养小尾寒羊120只,先后有10余只发病,主要是2月龄左右的羔羊。感染初期,羔羊的唇部、鼻孔周围皮肤出现红色斑点,随后形成脓疱,最后皮肤脓疱破溃形成灰褐色结痂,甚至形成大面积的坚硬痂皮。当口腔周围出现大量水疱和脓疱时,严重影响其采食,导致患病羊消瘦,发育不良。为了明确该羊群出现口疮症状的原因,本实验首先从病理学和病原学两方面进行系统的检测分析。1病理学诊断剖检临床送检病羊,可见其唇部、鼻孔周围有大量灰褐色、质硬、隆突的痂皮,肠系膜淋巴结部分肿大,其它内脏器官无肉眼可见病变。采集皮肤痂皮及其它脏器固定,制作石蜡切片,进行病理组织学观察。结果显示,皮肤表皮棘细胞层增厚,棘细胞发生颗粒变性,部分严重者表现为空泡变性;皮肤毛囊周围组织出血,部分毛囊发生坏死;脾脏髓质部(红髓)散在有大量含铁血黄素颗粒,脾小体的副皮质区鞘动脉周围可见有大量淋巴细胞聚集,淋巴鞘增厚;淋巴小结副皮质区有大量淋巴细胞浸润。2病原学诊断利用革兰氏染色和细菌培养等方法对患病羊进行细菌学检测,未发现致病菌感染,进而排除细菌感染的可能性;为进行类症鉴别,分别设计合成针对羊传染性脓疱病毒(ORFV)、口蹄疫病毒(FMDV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)和羊痘病毒(CaPV)的特异性引物,进行PCR或RT-PCR扩增,扩增结果显示,仅针对ORFV的引物可扩增出与预期目的片段相符合的条带;取唇部痂皮研磨,反复冻融,离心取上清,加入20%双抗感作过夜,接种胎羊鼻甲骨细胞(OFTu)进行病毒分离,在盲传4代后出现典型的CPE;取细胞病变液进行电镜负染观察,可见线团状、椭圆形的病毒粒子;将细胞病变液经皮下注射接种4月龄新西兰兔,在接种第8d出现典型的脓疱病变。通过上述试验,成功分离获得1株ORFV病毒株,命名为ORFV-CL17;从病原学角度证实该起病例为ORFV感染所致。为进一步了解该分离毒株的分子特性,选取了部分毒力相关基因ORF120、ORF122、ORF125、ORF132进行核苷酸测序,并通过核苷酸序列推导出氨基酸序列,分析相应序列的氨基酸位点突变、核苷酸序列和氨基酸序列的同源性、遗传进化关系。结果显示:ORFV-CL17毒株的ORF122基因氨基酸序列中存在一个突变位点,第102位氨基酸由A突变为T(A102T),ORF132基因氨基酸序列中存在两个突变位点,第19位氨基酸由N突变为D(N19D),第69位氨基酸由G突变为R(G69R);ORFV-CL17毒株的ORF120、ORF125、ORF132基因与SY17株(登录号:MG712417)对应的基因氨基酸同源性最高,分别为99.5%、100%、98.5%,ORF122基因与NP株(登录号:KP010355)的相应基因编码的氨基酸同源性最高,为99.7%;遗传进化分析结果表明,ORFV-CL17毒株与国内毒株SY17株的亲缘关系较近,处于同一进化分支,与国外毒株亲缘关系较远。本研究为临床上针对羊传染性脓疱病的诊断提供了重要的技术手段,同时针对地方分离毒株ORFV-CL17分子遗传特性的研究对于该病的诊断、治疗和预防具有重要意义。
Abstract
yang chuan ran xing nong pao bing (contagious ecthyma,CE),ye bei ren wei shi yang chuan ran xing nong pao xing pi yan (contagious pustular dermatitis),tong chang bei chen wei yang kou chuang (sore mouth),shi you chuan ran xing nong pao bing du (Orf virus,ORFV)yin qi de yi lei jie chu xing chuan ran bing ,ji te dian shi zai dong wu de kou qiang nian mo 、chun bu 、chi ken 、bi kong zhou wei 、wei gen deng chu xing cheng qiu zhen 、shui pao 、nong pao 、hui yang yi ji jie jia ,mian yang 、shan yang deng fan chu dong wu hai you ren dou ke yi gan ran yang chuan ran xing nong pao bing du 。yang chuan ran xing nong pao bing de bao fa bu jin hui gei yang shi chang he yang shi hu dai lai yan chong de jing ji sun shi ,hai ke neng hui wei xie dao yang shi hu de shen ti jian kang ,yin ci gai bing shi yi chong chong yao de ren shou gong huan chuan ran bing 。2017nian 11yue ,ji lin chang ling mou yang chang bing yang chu xian dian xing de kou chuang zheng zhuang ,gai yang chang gong si yang xiao wei han yang 120zhi ,xian hou you 10yu zhi fa bing ,zhu yao shi 2yue ling zuo you de gao yang 。gan ran chu ji ,gao yang de chun bu 、bi kong zhou wei pi fu chu xian gong se ban dian ,sui hou xing cheng nong pao ,zui hou pi fu nong pao po hui xing cheng hui he se jie jia ,shen zhi xing cheng da mian ji de jian ying jia pi 。dang kou qiang zhou wei chu xian da liang shui pao he nong pao shi ,yan chong ying xiang ji cai shi ,dao zhi huan bing yang xiao shou ,fa yo bu liang 。wei le ming que gai yang qun chu xian kou chuang zheng zhuang de yuan yin ,ben shi yan shou xian cong bing li xue he bing yuan xue liang fang mian jin hang ji tong de jian ce fen xi 。1bing li xue zhen duan pou jian lin chuang song jian bing yang ,ke jian ji chun bu 、bi kong zhou wei you da liang hui he se 、zhi ying 、long tu de jia pi ,chang ji mo lin ba jie bu fen zhong da ,ji ta nei zang qi guan mo rou yan ke jian bing bian 。cai ji pi fu jia pi ji ji ta zang qi gu ding ,zhi zuo dan la qie pian ,jin hang bing li zu zhi xue guan cha 。jie guo xian shi ,pi fu biao pi ji xi bao ceng zeng hou ,ji xi bao fa sheng ke li bian xing ,bu fen yan chong zhe biao xian wei kong pao bian xing ;pi fu mao nang zhou wei zu zhi chu xie ,bu fen mao nang fa sheng huai si ;pi zang sui zhi bu (gong sui )san zai you da liang han tie xie huang su ke li ,pi xiao ti de fu pi zhi ou qiao dong mai zhou wei ke jian you da liang lin ba xi bao ju ji ,lin ba qiao zeng hou ;lin ba xiao jie fu pi zhi ou you da liang lin ba xi bao jin run 。2bing yuan xue zhen duan li yong ge lan shi ran se he xi jun pei yang deng fang fa dui huan bing yang jin hang xi jun xue jian ce ,wei fa xian zhi bing jun gan ran ,jin er pai chu xi jun gan ran de ke neng xing ;wei jin hang lei zheng jian bie ,fen bie she ji ge cheng zhen dui yang chuan ran xing nong pao bing du (ORFV)、kou ti yi bing du (FMDV)、xiao fan chu shou yi bing du (PPRV)he yang dou bing du (CaPV)de te yi xing yin wu ,jin hang PCRhuo RT-PCRkuo zeng ,kuo zeng jie guo xian shi ,jin zhen dui ORFVde yin wu ke kuo zeng chu yu yu ji mu de pian duan xiang fu ge de tiao dai ;qu chun bu jia pi yan mo ,fan fu dong rong ,li xin qu shang qing ,jia ru 20%shuang kang gan zuo guo ye ,jie chong tai yang bi jia gu xi bao (OFTu)jin hang bing du fen li ,zai mang chuan 4dai hou chu xian dian xing de CPE;qu xi bao bing bian ye jin hang dian jing fu ran guan cha ,ke jian xian tuan zhuang 、tuo yuan xing de bing du li zi ;jiang xi bao bing bian ye jing pi xia zhu she jie chong 4yue ling xin xi lan tu ,zai jie chong di 8dchu xian dian xing de nong pao bing bian 。tong guo shang shu shi yan ,cheng gong fen li huo de 1zhu ORFVbing du zhu ,ming ming wei ORFV-CL17;cong bing yuan xue jiao du zheng shi gai qi bing li wei ORFVgan ran suo zhi 。wei jin yi bu le jie gai fen li du zhu de fen zi te xing ,shua qu le bu fen du li xiang guan ji yin ORF120、ORF122、ORF125、ORF132jin hang he gan suan ce xu ,bing tong guo he gan suan xu lie tui dao chu an ji suan xu lie ,fen xi xiang ying xu lie de an ji suan wei dian tu bian 、he gan suan xu lie he an ji suan xu lie de tong yuan xing 、wei chuan jin hua guan ji 。jie guo xian shi :ORFV-CL17du zhu de ORF122ji yin an ji suan xu lie zhong cun zai yi ge tu bian wei dian ,di 102wei an ji suan you Atu bian wei T(A102T),ORF132ji yin an ji suan xu lie zhong cun zai liang ge tu bian wei dian ,di 19wei an ji suan you Ntu bian wei D(N19D),di 69wei an ji suan you Gtu bian wei R(G69R);ORFV-CL17du zhu de ORF120、ORF125、ORF132ji yin yu SY17zhu (deng lu hao :MG712417)dui ying de ji yin an ji suan tong yuan xing zui gao ,fen bie wei 99.5%、100%、98.5%,ORF122ji yin yu NPzhu (deng lu hao :KP010355)de xiang ying ji yin bian ma de an ji suan tong yuan xing zui gao ,wei 99.7%;wei chuan jin hua fen xi jie guo biao ming ,ORFV-CL17du zhu yu guo nei du zhu SY17zhu de qin yuan guan ji jiao jin ,chu yu tong yi jin hua fen zhi ,yu guo wai du zhu qin yuan guan ji jiao yuan 。ben yan jiu wei lin chuang shang zhen dui yang chuan ran xing nong pao bing de zhen duan di gong le chong yao de ji shu shou duan ,tong shi zhen dui de fang fen li du zhu ORFV-CL17fen zi wei chuan te xing de yan jiu dui yu gai bing de zhen duan 、zhi liao he yu fang ju you chong yao yi yi 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自吉林大学的崔姗姗，发表于刊物吉林大学2019-06-25论文，是一篇关于羊传染性脓疱病毒论文,病理诊断论文,病原诊断论文,分离鉴定论文,分子特征论文,吉林大学2019-06-25论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自吉林大学2019-06-25论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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