论文摘要
吸毒问题始终是困扰全世界的社会难题。在我国的吸毒人群中,又以阿片类毒品海洛因为主。虽然单乙酰吗啡的检测可作为吸食海洛因的依据,但很多吸食海洛因嫌疑人的尿样中只能检测到吗啡。体内吗啡既可来源于海洛因的代谢,亦可来源于含可待因或吗啡类的药物。因此正确判断体内吗啡来源是区分海洛因滥用者与可待因或吗啡类药物使用者的关键。本研究通过检测滥用阿片类药物者和正常服药人群尿样中吗啡、吗啡葡萄糖醛酸苷及可待因的含量,探索几种成分之间的比例关系,寻找规律,用多指标来判断体内吗啡是来源于海洛因的代谢,还是源于含可待因或吗啡类的药物。本研究分为五部分:1 UPLC-MS/MS分析方法以吗啡-d3（MOR-d3）和吗啡-3-葡萄糖醛酸苷- d3（M3G- d3）为内标,尿样用乙腈沉淀蛋白后,过SiroccoTM蛋白沉淀板,超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS ）法分离检测尿样的中单乙酰吗啡（6-MAM）、吗啡（MOR）、吗啡-3-葡萄糖醛酸苷（M3G）、吗啡-6-葡萄糖醛酸苷（M6G）和可待因（COD）。尿样中COD和6-MAM检出限为0.2 ng/mL,定量限为0.5 ng/mL;MOR、M3G和M6G检出限为0.5 ng/mL,定量限为1 ng/mL;线性相关系数r≥0.999 7;日内精密度在5%以内,日间精密度在10%以内;日内准确度大于97%,日间准确度大于94%,回收率在90%以上,基质效应在45%-90%。所建方法简便、快速、准确,可以满足法庭毒物分析的需要。2海洛因滥用者尿样的分析研究收集20062009年间本实验室部分海洛因滥用者的尿样（共89例）,采用UPLC-MS/MS方法检测,所得实验数据运用SPSS16.0软件进行统计分析。海洛因滥用者尿液检测所得的各组数据均运用中位数及百分位数来描述其正常值范围。MOR、COD、M3G和M6G浓度的中位数分别为1130.00、344.50、9670.00和2215.00ng/mL;单侧95%可信限下限分别为67.05、20.40、498.50和47.55ng/mL。MOR/COD、M3G/COD、M6G/COD、（M3G+M6G）/COD和（M3G+M6G+MOR）/COD比值的中位数分别为2.98、16.30、3.74、18.88、24.70;单侧95%可信限下限分别为1.13、1.14、0.34、1.48、5.24。随着MOR/COD比值的增大,M3G/COD、M6G/COD、（M3G+M6G）/COD和（MOR+M3G+M6G）/COD的比值均不同程度的增大。3服用可待因药物的实验研究21名健康志愿者口服治疗剂量的复方磷酸可待因口服溶液后分时段留尿,采用UPLC-MS/MS方法检测,所得实验数据运用SPSS16.0软件进行统计分析。实验分为单次服药和多次服药。21名健康志愿者共测得有效数据871组。各组数据均用中位数及百分位数来描述其正常值范围。MOR、COD、M3G和M6G浓度中位数分别为11.10、178.50、199.00和50.55ng/mL;单侧95%可信限上限分别为66.17、1322.00、1224.00、342.70 ng/mL。MOR/COD、M3G/COD、M6G/COD、（M3G+M6G）/COD、（MOR+M3G+M6G）/COD比值的中位数分别为0.07、1.36、0.32、1.76、1.84;单侧95%可信限上限分别为1.14、29.82、7.07、36.01、36.89。随着MOR/COD比值的增大,M3G/COD、M6G/COD、（M3G+M6G）/COD和（MOR+M3G+M6G）/COD的比值均不同程度增大。在单次给药0.5h内,COD浓度即达到峰值,随后便明显下降,至5h小幅回升后再下降;MOR浓度在0.5h内达峰值随后下降;而M3G浓度则在1h后达到峰值,维持到8h后下降;M6G浓度在6h时达到峰值,其后下降。MOR/COD值呈先升后降的趋势,在服药后36h达到最高;M3G/COD的变化规律与MOR/COD基本相同,同样在36h达最高点,只是幅度上比MOR/COD大;M6G/COD比值在28h达到峰值后下降。在多次给药实验中,MOR、COD、M3G和M6G浓度及MOR/COD、M3G/COD、M6G/COD在首次服药60h内在一个范围内上下浮动;首次服药60h后,即最后一次服药后,其变化趋势与单次服药后基本相同。4体内吗啡来源的判断指标探讨对海洛因滥用者尿样和服用可待因药物的志愿者尿样检测所得数据进行比较、分析。以MOR浓度为67ng/mL和MOR/COD比值为1.14为综合判断指标。当尿样中MOR浓度大于67ng/mL同时MOR/COD比值大于1.14时,可以认定为海洛因滥用者尿样;当尿样中MOR浓度和MOR/COD比值中有一项小于或等于上述数值时,不认定为海洛因滥用者尿样;当尿样中MOR浓度和MOR/COD比值均小于上述数值时,可认定为服用含可待因药物者尿样。5判断指标的验证和评价收集服用含可待因药物的感冒患者的尿样（共11例）及20062009年间本实验室部分仅检出吗啡和可待因的尿样（共238例）,用UPLC-MS/MS方法检测,所得实验数据运用SPSS16.0软件进行统计分析。两名感冒患者服药后自然留尿,其尿样检测得MOR浓度和MOR/COD比值数据共11组,用本研究结果评价标准来判断,以上11例尿样均不认定该来自海洛因滥用者,与事实相符。检测238例20062009年间本实验室仅检出吗啡、可待因的尿样,因未检出单乙酰吗啡,无法确定其是否来自海洛因滥用者。运用本研究结果来进行评判,175例可以确定其来源,占总数的73.53%,仅63例无法确定其来源,占总数的26.47%。通过上述研究,本课题（1）建立了同时分离检测尿样中MAM、MOR、M3G、M6G和COD的UPLC-MS/MS方法;（2）提出了用MOR浓度和MOR/COD比值综合判断尿样中吗啡来源。