论文摘要
目的:研究实验性MCAO大鼠脑内不同部位NSCs移植对MCAO的损伤修复作用以及对脑内神经生长因子分泌的影响,筛选出最佳移植部位。 方法:选用孕龄16~18天的胎鼠脑组织进行NSCs体外分离、培养及传代,然后移植到MCAO后1周时的大鼠脑内不同部位进行观察。 动物分为6组,实验组Ⅰ—Ⅳ:分别在MCAO后1周时于梗塞灶同侧纹状体、同侧皮层、同侧脑室、对侧纹状体移植5μl Brdu标记的NSCs悬液(约8×105);假移植组:MCAO后1周时移植5μl生理盐水;假手术组:假手术1周后移植5μl生理盐水。分别在移植后24小时、1、2、3个月进行神经功能评分;分别在MCAO后1天及移植后3个月进行影像学检查;2个月后部分鼠被处死行电镜检查;3个月后处死行病理学检查并测定脑内BDNF、FGF-2分泌量。 结果:培养的NSCs Nestin免疫组化染色呈阳性,在体外可诱导分化为神经元和星形胶质细胞。 移植后24小时、1个月时各实验组行为学评分与假移植组相比无差异(P>0.05);2个月时同侧纹状体移植组行为学评分明显优于假移植组及其它实验组(P>0.05);3个月时的行为学评分依次为:同侧纹状体移植、同侧脑室移植组、同侧皮层移植组、对侧纹状体移植组、假移植组。 免疫组化染色证实移植组大鼠脑中有移植入脑的Brdu阳性细胞存活,并可见向神经元和胶质细胞方向分化。透射电镜可见NSCs存活良好并且相互之间及与宿主细胞之间有特异性连接形成。 NSCs移植后3个月时脑内BDNF、FGF-2分泌增多,以同侧纹状体、同侧脑室最明显。 影像学证实NSCs移植后3个月梗塞体积较MCAO1天时梗塞体积缩小。 结论:大鼠胎脑NSCs可在体外分离、培养及传代,可在体外诱导分化为神经元和星形胶质细胞。
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