论文摘要
脊髓损伤和再生研究是中枢神经系统损伤修复研究领域的热点,也是困扰神经科学的难题。近年来随着对中枢神经干细胞的研究,人们对神经系统的发育过程、诱导细胞分化的条件、脊髓损伤修复的治疗有了更进一步的认识。本研究着眼于神经系统干细胞主要是脊髓源性神经干细胞的培养、增殖及分化,为脊髓源性神经干细胞(NSCs)的临床应用提供实验证据。 实验第一部分:利用无血清培养和单细胞克隆技术在E14小鼠的胎鼠脊髓及纹状体中分离出具有单细胞克隆能力的细胞,并进行培养、传代观察。采用间接免疫荧光检测克隆细胞的神经巢蛋白(nestin)抗原和分化后特异性成熟神经细胞抗原的表达,并比较两种来源的神经干细胞在培养及分化方向上的异同点。结果证实,从胚龄2周小鼠的脊髓和纹状体中成功分离出的神经干细胞具有连续克隆能力,可传代培养,表达神经巢蛋白抗原。分化后的细胞表达神经元细胞、胶质细胞和少突胶质细胞的特异性抗原。通过对实验结果的统计学分析,可以看出,在体外无干预的情况下,脊髓源性神经干细胞自然分化为神经元及少突神经胶质细胞的比例高于纹状体源性神经干细胞。相反,分化为星形胶质细胞的比例则低于后者。从这一部分实验中我们得出以下结论:胎鼠的脊髓和纹状体中都存在具有自我更新能力和多分化潜
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