芸薹属芸薹种几种主要蔬菜作物花药培养技术研究

论文摘要

以芸薹属芸苔种主要蔬菜作物大白菜、小白菜、小菘菜、奶白菜、菜薹和乌塌菜为试材进行花药培养,研究不同培养基和培养条件对胚状体发生、发育和植株再生的影响,探索花胚植株的倍性鉴定方法,并对再生植株后代的园艺学性状进行鉴定。选取优异DH系配制杂交组合测定配合力,旨在建立高效的花药培养技术体系,应用于优势杂交育种实践,加快育种进程。研究结果如下。1.供试材料基因型是影响花药培养胚状体发生的关键因素。不同试材胚状体发生率有明显的差异,大白菜10个品种有9个诱导得到了胚状体;小白菜10个品种有9个获得了胚状体;小菘菜7个品种有2个获得了胚状体;菜薹2个品种有1个获得了胚状体;奶白菜2个品种有1个获得了胚状体;乌蹋菜未获得胚状体。2.小孢子发育的单核靠边期,是花药培养的适宜取样期,此时的花蕾长度小白菜为2.0～3.5mm,大白菜为2.0～3.0mm,小菘菜为2.5～3.5mm、奶白菜为1.8～2.2 mm、菜薹2.3～3.4 mm,乌塌菜为1.6～2.4 mm。3.变温处理可以明显提高胚状体诱导率,适宜的变温处理方法为低温4℃、24h;高温33℃、48h。花蕾低温预处理还有暂时保持材料而不降低培养效果的作用。4.MS、B5及改良B5培养基的有机成分加倍或大量元素减半,均可以提高胚状体诱导率。5.改良B5培养基中添加0.3g.L-1的谷氨酰胺,能促进胚状体发生,但过量的谷氨酰胺会抑制胚状体的发生。6.诱导胚状体成苗的适宜培养基为“MS+3%蔗糖+1.0%琼脂+100 mg·L-1活性炭”。7.“MS+3%蔗糖+0.8%琼脂”是花胚植株继代和复壮培养的适宜培养基;“1/2 MS+0.1mg·L-1NAA+3%蔗糖+0.8%琼脂”和“MS+0.1mg·L-1NAA+3%蔗糖+0.8%琼脂”是花胚植株生根的适宜培养基。8.花胚植株倍性鉴定可以采用染色体计数与形态学、气孔特征及花粉活力鉴定相结合的方法,用自交结籽能力进行验证。9.花药培养获得的DH系绝大多数具有自交不亲和性,亲和指数达到了自交不亲和系的标准。10.从花药培养获得的DH系所配制的杂交组合中,经品种比较试验筛选出2个小白菜优异组合,5个大白菜优异组合。

论文目录

• 摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一章 文献综述
• 1.1 花药培养的意义
• 1.2 花药培养研究概况
• 1.3 花药培养主要影响因素
• 1.4 胚状体发生及植株再生
• 1.5 花粉植株倍性鉴定及染色体加倍技术
• 1.6 问题与展望
• 第二章 小白菜花药培养体系的构建与利用
• 2.1 试验材料与方法
• 2.1.1 试验材料
• 2.1.2 试验方法
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 胚状体发生及发育影响因素的研究
• 2.2.2 成苗影响因素的研究
• 2.2.3 花胚植株倍性鉴定方法的研究
• 2.2.4 DH系育种潜力的研究
• 2.3 小结
• 第三章 大白菜花药培养体系的优化与应用
• 3.1 试验材料与方法
• 3.1.1 试验材料
• 3.1.2 试验方法
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 胚状体发生及发育的研究
• 3.2.2 成苗影响因素的研究
• 3.2.3 双单倍体植株倍性鉴定方法的研究
• 3.2.4 DH系园艺学性状鉴定
• 3.2.5 DH系杂交组配效果分析
• 3.3 小结
• 第四章 小菘菜花药培养体系的构建
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 试验材料
• 4.1.2 试验方法
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 胚状体诱导因素的研究
• 4.2.2 试管苗的继代培养和复壮
• 4.2.3 花培植株生根影响因素的研究
• 4.2.4 试管苗移栽
• 4.2.5 花培植株倍性鉴定方法研究
• 第五章 奶白菜、菜薹和乌塌菜花药培养技术研究
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 试验材料
• 5.1.2 试验方法
• 5.2 结果与分析
• 5.2.1 基因型对胚诱导的影响
• 5.2.2 谷氨酰胺对胚状体诱导的影响
• 5.2.3 椰乳对胚状体诱导的影响
• 5.3 小结
• 讨论
• 一、花药培养胚状体诱导的影响因素
• 二、胚状体成苗及生根影响因素
• 三、花培植株倍性鉴定方法
• 四、花培植株在育种中应用
• 结论
• 参考文献
• 图版
• 致谢
• 攻读硕士期间发表的学术论文