CD14启动子-159位点基因多态性与糖尿病肾病的相关性研究

论文摘要

目的:研究延边地区人群中2型糖尿病患者（T2DM）CD14启动子C-159T多态性分布,探讨该基因多态性与糖尿病肾病（DN）的相关性并且对DN发病的危险因素进行研究。研究对象及方法:对象随机选取在我医院健康体检者145名:男102名、女43名,平均年龄（60.4±9.7）岁作为正常对照组,临床和实验室检查均正常,排除肝、肾、内分泌和心脑血管疾病;选取2004年12月～2007年12月在本院内分泌科住院的T2DM患者308例（男174例、女134例）,平均年龄（55.1±6.9）岁。T2DM诊断依据1999年WHO诊断标准,排除妊娠、肿瘤、外伤、急性感染、心、肝疾病及服用血管紧张素转换酶抑制剂、羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶抑制剂、噻唑烷二酮类药物者。根据24小时尿白蛋白排泄率（UAER）将T2DM患者分为非DN组（UAER＜0.5g/24h）和DN组（UAER＞0.5g/24h）。所有受检对象均为延边地区无血缘关系个体。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术对延边地区人群中308例T2DM患者及145名正常对照组者CD14基因启动子-159位点进行基因型分析,同时对308例T2DM患者（其中76例并发DN）的临床资料及生化指标进行回顾性分析。用SPSS 10.0软件包进行分析。基因型和等位基因频率采用基因直接计数法计算,各组间基因型及基因频率比较采用x2检验,以发病时间为横轴,以发病率为纵轴,绘制T2DM患者及各基因型患者发生DN的人数发病率曲线。308例T2DM患者各项生化指标的数据均以（?）±s表示,行q检验;率行x2检验;相关关系行logistic回归分析,p＜0.05为差异有统计学意义。结果:（1） CD14启动子-159位点基因多态性在正常对照组和T2DM患者中的分布无显著性差异（p＞0.05）;在未发生DN和发生DN的患者中,CD14启动子-159位点纯合子CC基因频率与杂合子CT及纯合子TT基因频率相比,存在显著性差异（p＜0.05）;（2） T2DM患者在10年和20年时,发生DN的百分率分别为:13.3%和23.4%;纯合子CC基因型T2DM患者发生DN的风险高于杂合子CT及纯合子TT基因型患者,其优势比为（OR=1.621,95%CI:1.010～1.737）。（3） logistic回归分析示:DN的发生与高血压、病程、空腹高血糖、C反应蛋白及低密度脂蛋白密切相关（p＜0.05或p＜0.01）,与年龄、餐后血糖、糖化血红蛋白、血肌酐、胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白及体重指数无关（均p＞0.05）。结论:（1） CD14启动子C-159T基因多态性与T2DM的发生无关,但其中的CC纯合子基因是T2DM患者进展为DN的遗传学风险因素;（2）高血压、长期病程、空腹高血糖、低密度脂蛋白水平升高及炎症反应是2型糖尿病患者发展为DN的重要风险因素。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 第二章 实验材料
• 2.1 实验仪器
• 2.2 主要试剂
• 2.3 溶液的配置
• 第三章 实验方法
• 3.1 对象选择及分组
• 3.2 样本及临床资料采集
• 3.3 提取基因组DNA、测定DNA浓度及纯度
• 3.4 PCR体外扩增目的基因片段
• 3.5 扩增产物的限制性酶切
• 3.6 5%琼脂糖电泳检测限制性酶切产物
• 3.7 拍照
• 3.8 生化指标的测定
• 3.9 统计学分析
• 第四章 结果
• 4.1 基因组DNA鉴定结果
• 4.2 CD14基因型分析
• 4.3 CD14启动子-159位点基因序列
• 4.4 正常对照组与T2DM组CD14基因多态性的比较
• 4.5 T2DM分组后基因多态性分布的比较
• 4.6 CC及CT+TT基因型T2DM患者发生DN情况
• 4.7 DM非DN及DN患者各项临床生化指标的比较
• 4.8 各危险因素对T2DM患者发生DN影响的logistic回归分析
• 第五章 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 综述