论文摘要
研究背景:杏仁核、下丘脑是边缘系统的重要核团,在生理情况及应激等反应时,通过与脑干内脏相关核团的联系,在心血管、呼吸、内脏反应及痛觉、内分泌、免疫等功能的调节方面起着极其重要的作用。一氨基丁酸（GABA）是中枢神经系统最重要的抑制性神经递质,对其受体的研究是目前神经科学的研究热点之一。我们以前的研究首次发现了杏仁核对脑干内孤束核、脑桥臂旁核等结构的神经支配以GABA为主要神经递质。由于前脑边缘系统与脑干之间的联系围绕内脏活动、痛觉调节、免疫调节及应激反应等功能,那么这些GABA能通路是否参与上列功能,是通过何种受体及其亚型在哪些部位发挥作用,目前尚不清楚。内毒素（LPS）是革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分,进入机体能够诱导免疫细胞分泌炎性细胞因子如白介素-1β（IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子-（TNF-）等,是模拟机体免疫应激状态的常用动物模型。Fos作为一种即刻早期基因广泛应用于反应神经元的功能状态。GABA受体（R）分为A、B、C三种。其中,GABAAR的α1亚单位（GABAARα1）与GABAAR功能密切相关,GABABR的1亚单位（GABABR1）是GABABR的主要部分。因此,我们以GABAARα1和GABABR1为观察目标设计了本实验。目的:探讨大鼠脑内GABA受体阳性神经元是否参与LPS诱导的免疫应激反应。方法:本研究采用腹腔注射LPS建立免疫应激模型,对照组注射等量的生理盐水,用免疫荧光双标记与激光共聚焦显微镜技术,观察两组大鼠下丘脑室旁核（PVN）、杏仁内侧核（Me）、臂旁核（LPB）和孤束核（NTS）内Fos、GABAARα1和Fos/GABAARα1阳性神经元的形态、分布和数量的变化情况。同时还观察两组大鼠PVN和下丘脑视上核（SON）内Fos、GABABR1和Fos/GABABR1阳性神经元的表达变化。结果:第一部分实验中我们观察到,在PVN、Me、LPB、NTS等部位:LPS可使大鼠上述核团内Fos阳性神经元数量显著增高,GABAARα1免疫阳性神经元表达增强,且上述核团内部分神经元同时表达Fos和GABAARα1。在PVN,Fos/GABAARα1双标阳性神经元占Fos阳性神经元的27%,占GABAARα1阳性神经元的32%;在Me,Fos/GABAARα1双标阳性神经元分别占Fos和GABAARα1阳性神经元的28%和23%;而在LPB,Fos/GABAARα1双标阳性神经元仅占Fos和GABAARα1阳性神经元的12%和10%;在NTS,Fos/GABAARα1双标阳性神经元分别占Fos和GABAARα1阳性神经元的31%和56%。第二部分实验中我们观察到,在PVN、SON等部位:LPS可使大鼠上述核团内Fos阳性神经元数量显著增高,GABABR1免疫阳性神经元表达增强,且上述核团内部分神经元同时表达Fos和GABABR1。在PVN,Fos/GABABR1双标阳性神经元占Fos阳性神经元的30%,占GABABR1阳性神经元的24%;在SON,Fos/GABABR1双标阳性神经元分别占Fos和GABABR1阳性神经元的90%和38%。结论:1、本实验结果提示,在PVN Me、LPB和NTS等核团内,有相当部分GABAARα1免疫阳性神经元参与了由LPS诱导的免疫应激反应,说明GABA在免疫应激反应中可能通过GABAA受体发挥作用。这个结果为我们理解免疫应激反应时GABAAR在大鼠脑内的作用提供了形态学基础。2、本实验结果还提示,在PVN和SON等核团内,有相当部分GABABR1免疫阳性神经元参与了由LPS诱导的免疫应激反应,说明GABA在免疫应激反应中也可能通过GABAB受体发挥作用。这个结果为我们理解免疫应激反应时GABABR在大鼠脑内的作用提供了形态学基础。
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