抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体对大鼠脊髓损伤细胞凋亡的影响

论文摘要

TNF-α是各种炎症和免疫反应中由多种细胞分泌的一类多向性细胞因子。作为一种炎症细胞因子,在脊髓损伤的急性期,TNF-α有促进细胞凋亡作用,在慢性期还具有诱导小胶质细胞及星形细胞增殖及聚集的作用。本实验旨在通过应用Allen’s改良法复制大鼠SCI模型,同时局部应用抗TNF-α单克隆抗体（Anti - TNF–αmAb）治疗,从形态学角度、细胞因子表达以及凋亡信号转导通路角度观察抗TNF-α单克隆抗体治疗对大鼠SCI发生及愈后的影响,并对其机制作深入探讨,得到如下结论:1.细胞凋亡是SCI早期主要的生物学事件;2.细胞凋亡的调控基因家族bax/bcl-2通过调节细胞凋亡参与SCI的发生发展;3. TNF-α在SCI发生发展中起重要作用,尤其是在调节细胞凋亡信号通路中起重要作用;4.在SCI损伤部位局部应用抗TNF-α特异性抗体,可延缓或抑制SCI的发生发展,其机制主要通过调节bcl-2、bax基因及蛋白表达,使二者表达量比值改变,并可调节IL-6、IL-8等多种炎症相关因子含量,从而实现对SCI的治疗作用。本研究结果可为临床急性脊髓损伤的治疗提供新的思路和方法。

论文目录

• 内容提要
• 英文缩略词
• 第一章 绪论
• 1 SCI 的病理生理
• 1.1 原发性脊髓损伤和继发性脊髓损伤
• 1.2 SCI 病理生理
• 2 脊髓损伤的再生与修复
• 2.1 神经细胞的凋亡
• 2.2 神经生长的促进因子缺乏
• 2.3 髓鞘蛋白的抑制作用
• 2.4 胶质瘢痕的抑制作用
• 3 脊髓损伤的细胞再生与修复
• 3.1 细胞移植
• 3.2 SCI 基因治疗相关的神经营养因子
• 3.3 基因治疗
• 4 TNF-α 与大鼠脊髓损伤
• 第二章 材料与方法
• 1 材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要试剂
• 1.3 主要仪器
• 2 方法
• 2.1 动物模型制备
• 2.2 实验分组及给药
• 2.3 SCI 大鼠运动功能的检测
• 2.4 各组动物脊髓形态学检测
• 2.5 各组动物脊髓标本免疫组化检测
• 2.6 RT-PCR
• 2.7 蛋白质印迹杂交
• 2.8 ELISA 法检测脊髓组织中IL-6、IL-8 含量
• 2.9 SCI 大鼠脊髓神经细胞凋亡的检测（TUNEL Assay）
• 3 统计学方法
• 第三章 结果
• 1 大鼠运动功能的检测
• 2 SCI 大鼠脊髓组织学检测
• 3 大鼠脊髓组织中bax、bcl-2 免疫组化检测结果
• 4 各组大鼠脊髓组织中bcl-2、bax RT-PCR 检测结果
• 5 各组大鼠脊髓组织中bax、bcl-2 western blot 检测结果
• 6 各组大鼠脊髓组织中IL-6、IL-8 水平检测
• 7 大鼠脊髓TUNEL 检测结果
• 第四章 讨论
• 1 SCI 模型评价
• 2 SCI 与细胞凋亡
• 3 bax/bcl-2 参与细胞凋亡作用及机制
• 4 TNF-α在SCI 中的作用及机制
• 5 IL-6、IL-8 在 SCI 中作用
• 6 抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体在SCI 中的作用
• 第五章 结论
• 参考文献
• 攻读博士学位期间发表的学术论文 及取得的科研成果
• 致谢
• 中文摘要
• ABSTRACT