白花前胡有效部位提取纯化工艺及指纹图谱研究

论文摘要

中医理论认为白花前胡性微寒,味苦、辛。归肺、脾、肝经。具有疏散风热,降气化痰的作用。本论文在对前胡资源分布、化学成分、药理作用、质量标准等综述的基础上,对白花前胡有效部位的提取工艺进行了优化,以总香豆素的含量（mg.g-1）和干膏提取率（%）为考察指标,对提取所用乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数等因素以正交试验法进行了研究,确定最佳提取工艺为：75%乙醇8倍量,提取3次,每次0.5小时,并对最佳工艺进行了验证。以洗脱物中总香豆素含量为指标,对大孔树脂富集纯化前胡有效部位的工艺进行了考察。将提取液回收乙醇至无醇味,再浓缩至每毫升分别相当于0.1克、0.2克和0.4克生药材的量,静置后发现浓缩液中有大量不溶物。经采用紫外分光光度法测定,显示总香豆素含量损失分别达21.00%,47.97%,63.01%。以洗脱物中总香豆素的含量（mg.g-1）和干膏收率（%）为考察指标,对溶剂法纯化前胡有效部位的工艺进行了考察。将提取液回收乙醇至无醇味后浓缩至每毫升相当于0.5克生药材的量,对溶剂种类、溶剂用量、萃取次数等因素以正交试验法进行了研究,确定的最佳纯化工艺为：以0.5倍量的正丁醇为溶剂进行萃取,共萃取3次。对确定的最佳工艺进行了验证,得到白花前胡总香豆素有效部位。以7-羟基香豆素为对照,采用紫外分光光度法,对白花前胡有效部位总香素含量进行了测定,检测波长321nm,并进行了方法学考察,线性方程为Y=0.0928X+0.077（r2=0.9992,n=6）,有效部位中总香豆素的浓度在1.952～7.808μg.mL-1之间与吸光度成良好线性关系,平均加样回收率为99.745%,RSD=0.55%（n=6）。采用高效液相色谱法测定了有效部位中白花前胡甲素、乙素的含量,白花前胡甲素标准曲线为Y=464.42X+0.5438（r2=0.9998,n=5）,白花前胡甲素在0.32-6.4μg范围内质量与峰面积成线性关系,经测定干浸膏中白花前胡甲素的含量为7.738%,提取物中白花前胡甲素转移率为83.55%,加样回收率为98.92%,RSD=1.6%（n=5）。白花前胡乙素标准曲线为Y=364.86X-2.2932,R2=0.9998（n=5）,白花前胡乙素在0.4-3.6μg范围内质量与面积成线性关系,经测定干浸膏中白花前胡乙素的含量为2.390%,提取物中白花前胡乙素转移率为83.24%,加样回收率为99.66%,RSD=1.5%。采用HPLC-UV对白花前胡香豆素类成分指纹图谱进行了系统研究,建立了白花前胡的指纹图谱共有模式,并应用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”对各地药材进行了质量评价,相似度计算结果表明：各类药材提取物与白花前胡参照药材提取物指纹图谱相似度在0.60～0.93之间,初步确定了白花前胡的4个共有指纹峰。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第一章 前胡药材鉴定、水分测定及含量测定
• 1.1 前胡药材的鉴定
• 1.2 前胡药材水分测定
• 1.3 前胡药材含量测定
• 第二章 白花前胡有效部位提取纯化工艺研究
• 2.1 白花前胡提取工艺研究
• 2.2 白花前胡纯化工艺试验研究
• 2.3 紫外分光光度法测定总香豆素的含量
• 第三章 白花前胡提取物的质量标准
• 第四章 前胡提取物质量标准起草说明
• 4.1 仪器、试剂与药材
• 4.2 鉴别
• 4.3 检查
• 4.4 含量测定
• 4.5 讨论与小结
• 第五章 白花前胡香豆素类化合物指纹图谱的研究草案
• 5.1 仪器、试剂和药材
• 5.2 试验方法和结果
• 5.3 讨论
• 5.4 指纹图谱的方法学考察
• 5.5 小结
• 文献综述
• 结语
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文