分子标记鉴别姬松茸、草菇和灰树花种质资源的研究

论文摘要

食用菌菌种同名异种、同种异名问题长期以来给科研带来许多不必要的重复,也阻碍了菌种调剂供给。本研究通过利用RAPD、ISSR、SRAP三种DNA分子标记分别对来源不同的27个姬松茸(Agaricus blazei Murrill)菌株、74个草菇(Volvariella Volvacea)菌株以及30个灰树花(Grifola frondosa)菌株进行鉴别。并将得到的部分多态性条带转化为SCAR标记,其可用于种质资源的鉴定。通过三种分子标记对27个姬松茸菌株分析的结果,共产生134条多态性条带,综合三种分子标记的结果,采用Jaccard聚类距离中的类平均法(UPGMA)进行聚类分析,在相异系数水平D=0.70时,将27个姬松茸菌株分为9个类群,其中包括4个复合类群和5个单一类群。同时我们成功转化了10个SCAR标记,并分别将这10个SCAR对27个姬松茸菌株进行验证,结果10个SCAR标记将27个姬松茸菌株分为9个类群。利用三种分子标记对74个草菇菌株的分析,共产生82条多态性条带,综合三种分子标记的结果,采用Jaccard聚类距离中的类平均法(UPGMA)进行聚类分析,在相异系数水平D=0.27上,将74个草菇菌株分为17个类群其中包括11个单一类群和6个复合类群。同时实验成功转化并验证了27个SCAR标记。27个草菇SCAR标记鉴定结果将74个草菇菌株分为44个栽培种。其中包括34个单一类别和10个复合类别。三种分子标记对30个灰树花菌株的分析结果,共产生77条多态性条带,综合三种分子标记分析的结果,采用Jaccard聚类距离中的类平均法(UPGMA)进行聚类分析,在D=0.77的相异系数水平上,可以将30个灰树花菌株分为10个类群,其中包括6个单一类别和4个复合类群。同时实验成功转化并验证了8个灰树花SCAR标记。8个SCAR标记对30个灰树菌株的鉴定结果,将30个灰树花菌株分为10类。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 1 前言
• 1.1 DNA分子标记的种类
• 1.2 DNA分子标记在食用菌上的应用
• 1.2.1 菌种鉴定、品种分析
• 1.2.2 DNA分子标记在遗传多样性、系统进化、亲缘关系分析上的应用
• 1.2.3 分子标记在食用菌基因定位、克隆中及构建遗传图谱上应用
• 1.3 姬松茸、草菇、灰树花概述
• 1.3.1 姬松茸研究进展
• 1.3.2 灰树花研究进展
• 1.3.3 草菇研究进展
• 1.4 本研究的目的及意义
• 2 姬松茸种质资源分子标记分析及其SCAR标记的建立
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 方法
• 2.1.3 数据分析
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 RAPD结果分析
• 2.2.2 ISSR结果分析
• 2.2.3 SRAP结果分析
• 2.2.4 RAPD、ISSR、SRAP综合分析
• 2.2.5 SCAR标记验证
• 2.3 讨论
• 3 草菇种质资源分子标记分析及其SCAR标记的建立
• 3.1 材料与方法
• 3.2 实验结果与分析
• 3.2.1 RAPD结果分析
• 3.2.2 ISSR多态性分析
• 3.2.3 SRAP结果分析
• 3.2.4 RAPD、ISSR、SRAP综合分析
• 3.2.5 SCAR标记的建立及验证
• 3.3 讨论
• 4 灰树花种质资源分子标记分析及其SCAR标记的建立
• 4.1 材料与方法
• 4.2 实验结果与分析
• 4.2.1 RAPD结果分析
• 4.2.2 ISSR结果分析
• 4.2.3 SRAP结果分析
• 4.2.4 RAPD、ISSR、SRAP综合分析
• 4.2.5 SCAR标记的建立及验证
• 4.3 讨论
• 参考文献
• 附录1 姬松茸PCR扩增结果电泳图
• 附录2 草菇PCR扩增结果电泳图
• 附录3 灰树花PCR扩增结果电泳图
• 附录4
• 致谢