导读:本文包含了原代肝细胞培养论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:皮肤组织,鼠尾胶原蛋白,条件优化,小鼠黑色素细胞
原代肝细胞培养论文文献综述
马悦悦,朱芷葳,蓝吴涛,李慧锋,张利环[1]（2019）在《小鼠皮肤组织原代黑色素细胞培养条件的优化》一文中研究指出为了优化小鼠原代黑色素细胞培养条件,试验以出生1 d的小鼠背部皮肤组织为材料,在培养过程中分别比较不同消化时间、是否向培养基中添加鼠尾胶原蛋白、首次换液时间对原代黑色素细胞培养的影响,通过观察黑色素细胞形态和生长状态以及台盼蓝染色计数细胞研究小鼠黑色素细胞的原代培养条件。结果表明:小鼠原代黑色素细胞的培养条件为消化时间10 min、培养基使用含鼠尾胶原蛋白的培养基、首次换液时间24 h,可以获得大量处于良好生长状态的黑色素细胞。说明小鼠原代黑色素细胞培养条件优化成功。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2019年17期）
张艳芹,吴迪,邓梦琪,常翔宇,苗劲蔚[2]（2019）在《子宫内膜异位症原代细胞培养及纤维化相关蛋白检测》一文中研究指出目的检测在位子宫内膜组织、子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)异位病灶组织及正常人子宫内膜组织分离提纯子宫内膜间质细胞及相应间质细胞中纤维化相关蛋白表达水平及差异。方法在严格无菌条件下,刮勺刮取新鲜子宫内膜组织,冰盒运输,采用改良EMs原代细胞培养方法分离培养。并通过细胞爬片免疫组织化学方法,对分离提纯的细胞进行鉴定。蛋白免疫印迹方法检测对比分离提纯的细胞与相应组织纤维化相关蛋白表达的差异。结果 EMs在位内膜组织间质细胞原代分离12例均成功,成功率100%(成功指标:指细胞在培养瓶中贴壁生长并稳定传代)。EMs异位组织分离培养12例成功11例,成功率为91. 7%。正常人子宫内膜组织分离9例成功8例,成功率为88. 9%。人子宫内膜异位症异位间质细胞(human ectopic endometrial stromal cells,HEcESCs)与人子宫内膜异位症在位间质细胞(human eutopic endometrial stromal cells,HEuESCs)及正常人在位子宫内膜间质细胞(human normal endometrial stromal cells,HEn ESCs)普通光镜观察无明显差异。但免疫组织化学、蛋白免疫印迹结果表明:HEcESCs纤维化相关蛋白的表达水平明显高于HEuESCs及HEn ESCs两者纤维化相关蛋白表达水平(P <0. 01),而HEuESCs与HEn ESCs纤维化相关蛋白的表达差异无统计学意义(P> 0. 05),各间质细胞纤维化相关蛋白的表达与其相应组织水平相一致。结论采用改良EMs间质细胞原代培养方法,可以降低EMs子宫内膜间质细胞培养难度,并保持较高的细胞培养成功率。HEcESCs较HEuESCs及HEnESCs纤维化相关蛋白表达明显增高,即子宫内膜异位症患者,异位病灶在组织水平出现了明确的纤维化。(本文来源于《首都医科大学学报》期刊2019年04期）
刘蕾,杨玉洁,王凌,蒋学华[3]（2019）在《在“叁明治”培养大鼠原代肝细胞中研究利福平及联用丹参酮ⅡA对普伐他汀经BSEP转运的影响》一文中研究指出目的以普伐他汀为BSEP底物,在"叁明治"培养大鼠原代肝细胞模型上(sandwich-cultured rat hepatocytes,SCRH),研究利福平及联用丹参酮ⅡA对BSEP转运能力的影响。方法构建SCRH模型,利用MTT筛选给药剂量;建立普伐他汀的HPLC-MS/MS检测方法并进行方法学验证;考察利福平及联用丹参酮ⅡA对胆管内普伐他汀浓度的影响,并计算胆管外排指数(biliary excretion index,BEI)。结果成功构建了SCRH模型,并确定了利福平、丹参酮ⅡA、格列本脲及普伐他汀的合适给药剂量;建立了稳定可靠的普伐他汀HPLC-MS/MS检测方法;与空白组相比,利福平能够降低胆管内普伐他汀的浓度和普伐他汀的BEI,高浓度利福平的降低效果最明显(P <0. 01);与利福平高浓度组相比,联用丹参酮ⅡA后,胆管中普伐他汀的浓度以及普伐他汀的BEI增大,高浓度丹参酮ⅡA的增加效果最明显(P <0. 01)。结论在SCRH中,利福平能够抑制BSEP的转运能力,丹参酮ⅡA可以逆转利福平对BSEP转运能力的抑制作用。(本文来源于《中国药理学通报》期刊2019年07期）
廖婷,袁雪,荣曦,刘红[4]（2019）在《原代神经小胶质细胞培养方法的初探》一文中研究指出目的:建立一种简单有效的小胶质细胞原代培养和纯化方法。方法:取出生24h的SD大鼠的脑皮层组织,胰酶消化成单个细胞、培养,待细胞长满培养瓶后,用力拍打培养瓶3min,离心并收集沉淀,加入新培养基再培养,采用免疫荧光法鉴定其纯度。结果:共聚焦显微镜鉴定小胶质细胞纯度达到96.85%。结论:拍击法提纯小胶质细胞的培养方法产量多,纯度高,为小胶质细胞在神经退行性疾病相关研究提供了基础。(本文来源于《广西医科大学学报》期刊2019年04期）
曹铮,林锋,卢淑娟,吕孙建,刘莉[5]（2019）在《中华鳖胚胎组织原代细胞培养技术的研究》一文中研究指出基于当前市场上中华鳖商业化细胞缺乏,不利于开展其病害防控研究的现状,以中华鳖胚胎为对象,采用组织块原代培养技术,从孵育15～20 d的受精卵中获得适宜的胚胎组织,经抗生素、乙醇消毒,通过无菌条件下将组织块均匀分散贴壁在细胞瓶中,然后于30℃恒温培养箱中贴壁培养4 h后加入无血清M199培养基多次清洗,从而获得了中华鳖胚胎组织原代细胞;在此基础上分别对中华鳖胚胎细胞传代培养条件、冻存与复苏等进行系统性研究,初步确定中华鳖胚胎细胞培养温度为26℃,M199或L-15培养基,血清浓度为15%(体积分数),通常7 d传代1次;二甲亚砜冻存保藏后,细胞复苏生长状况正常。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2019年06期）
郭丽平[6]（2019）在《新生大鼠原代肝细胞分离和培养实验研究》一文中研究指出目的:尝试建立分离并获得稳定培养的新生大鼠原代肝细胞(Hepatocyte,HC)的简易方法。研究方法:采用多步酶消化法分离大鼠原代HC,经低速离心、选择性贴壁法纯化及培养肝细胞。结果:最初获得单细胞数量约1~2×10~6个/只,经0.4%台盼蓝染色细胞瞬时活率>70%,细胞悬液贴壁生长培养,在3~5 d细胞可长满瓶底的70%~80%,原代肝细胞经传代纯化、糖原染色和抗CK-18免疫组化染色鉴定,发现HC纯度>95%,细胞生长状态良好。结论:成功建立了分离、培养原代HC的简易方法,细胞数量、纯度、活率较好,可供一般实验室应用,为肝脏疾病的研究提供基本保障。(本文来源于《中国医科大学》期刊2019-03-01）
沙塔尔·塔瓦库力,古丽热娜·阿布拉,安尼瓦尔·买买提[7]（2019）在《南疆食管鳞癌原代细胞培养及临床化疗药物敏感性研究与分析》一文中研究指出目的南疆食管鳞癌原代细胞培养及临床化疗药物敏感性研究与分析。方法选取我院2017年1月～2017年12月收治的100例南疆食管鳞癌患者作为对象,收集标本培养原代细胞,进行临床化疗药物敏感性研究。结果原代细胞对不同化疗药物的敏感性存在差异,联合用药的情况下,细胞增殖抑制率最佳,与其他用药方式相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论联合应用不同化疗药物,可以有效抑制南疆食管鳞癌癌细胞的增殖,后续工作中可予以推广。(本文来源于《临床医药文献电子杂志》期刊2019年07期）
刘菲,胡玉婷,刘静,毛若颖,陶欣荣[8]（2019）在《原代小鼠小胶质细胞培养及尼古丁抑制肿瘤坏死因子α分泌的研究》一文中研究指出目的本研究通过摇床法分离纯化培养小鼠原代小胶质细胞,并研究尼古丁对小胶质细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达和分泌的影响。方法从C57 BL/6新生鼠大脑中分离出皮层,切碎研磨后进行混合培养,摇床法分离纯化小胶质细胞并培养。CD11b、Iba1作为小胶质细胞特异性标记物用来检测、鉴定小胶质细胞,在激光共聚焦显微镜下观察、计数免疫荧光细胞化学染色后的阳性细胞。将纯化的小胶质细胞设置为叁个组,分别为空白对照组,LPS组,LPS+NIC组。LPS+NIC组先加入10ug/ml LPS处理30 min,再加入10μmol尼古丁处理24 h。LPS组加入10μg/ml LPS处理4 h。空白对照组不做任何处理。使用qPCR检测尼古丁对小胶质细胞TNF-α的表达,酶联免疫吸附实验检测尼古丁对小胶质细胞TNF-α分泌的影响。结果培养混合细胞,再通过摇床法收获的小胶质细胞,细胞阳性率超过95.54%。免疫荧光细胞化学方法鉴定小胶质细胞纯度,小胶质细胞特异性标志物CD11b、Iba1,星形胶质细胞标志物GFAP检测结果,ImageJ分析小胶质细胞阳性率>95.54%,星型胶质细胞<4%,其它细胞<2%;LPS处理组与LPS+NIC处理组相比较,LPS+NIC组TNF-α的RNA水平的表达明显降低,且差异有统计学意义(P<0.05);LPS单独处理组,小胶质细胞TNF-α分泌增加。而LPS+NIC组小胶质细胞TNF-α分泌降低,两组TNF-α分泌有明显差异,且有统计学意义(P<0.05)。结论利用差异贴壁,分离纯化得到了高纯度的小鼠原代小胶质细胞,相较于其它方法,对细胞的损伤小,可多次收获小胶质细胞,细胞得率高。尼古丁可抑制小鼠原代小胶质细胞TNF-α的分泌,可能为神经退行性疾病的治疗提供新的治疗方法。(本文来源于《医学信息》期刊2019年02期）
李智勇,白雪,蔡慧云[9]（2018）在《人乳腺癌相关成纤维原代细胞培养的改良方法》一文中研究指出目的通过对常见的人乳腺癌相关成纤维细胞(BCAFs)原代培养方法进行改良,建立一种快速高效的BCAFs原代培养方法。方法取确诊为浸润性乳腺癌患者的癌组织标本,每个标本随机分成大小、质量相同的改良组和传统组,改良组用改良酶消化法(Ⅱ型胶原酶+透明质酸酶消化10 min)消化,传统组用传统酶消化法(Ⅰ型胶原酶消化8 h)消化。通过细胞计数、MTT和免疫荧光法比较两组消化方法获得的细胞总数、培养48 h后贴壁细胞的活性及BCAFs的纯度并在倒置显微镜下观察BCAFs原代细胞特征。结果改良酶消化法获得的细胞量、48 h贴壁细胞的活性和细胞纯度均高于传统酶消化法(P<0.001)。获得的BCAFs原代细胞呈纺锤体形或长梭形,胞质内颗粒较多,细胞排列不规则。结论本研究成功建立了一种高效快速的BCAFs原代培养的方法,为后期探究其在乳腺癌中的功能研究建立基础。(本文来源于《肿瘤防治研究》期刊2018年10期）
张少飞[10]（2018）在《大鼠原代肝细胞体外叁维培养研究》一文中研究指出本研究采用Seglen改良的两步门静脉胶原酶灌注法分离鼠肝细胞,密度梯度离心法制备鼠骨髓间充质干细胞,利用叁维(Three-dimensional,3D)胶原支架实现肝细胞和骨髓间充质干细胞共培养,并与3D单一培养的肝细胞、2D共培养肝细胞-骨髓间充质干细胞和2D单一培养的肝细胞组进行比较。通过特异性免疫荧光抗体染色法鉴定了两种细胞,采用FDA/PI双染法分析了肝细胞的活力,ELISA方法分析肝细胞的白蛋白分泌能力和7乙氧基-O-脱乙基酶活性,Quanti ChromTM尿素测定试剂盒检测尿素合成能力,Promega-Glo TM试剂盒检测CYP450酶活性,RT-PCR法分析肝细胞特异性功能基因Cldn-3,Bsep,AFP,G6P和A1AT的mRNA水平。结果显示,3D共培养肝细胞表达特异性蛋白CK8,骨髓间充质干细胞表达特异性蛋白CD44,表明3D共培养肝细胞和骨髓间充质干细胞获得成功,且3D共培养的肝细胞各项指示均优于3D单一培养的肝细胞,更优于2D共培养和2D单一培养的肝细胞。3D共培养的肝细胞在第28天仅有少量细胞出现凋亡,标记特异性代谢能力的白蛋白分泌、尿素合成、7乙氧基-O-脱乙基酶和CYP2D6酶活性可持续到第23~27天,肝细胞功能基因Cldn-3,Bsep,AFP,G6P和A1AT的mRNA水平亦可维持到第23~27天;3D单一培养的肝细胞在第14 d可见少量凋亡细胞,28 d可见大量细胞凋亡,标记特异性代谢能力的白蛋白分泌、尿素合成、7乙氧基-O-脱乙基酶和CYP2D6酶活性也可持续到第23~27天,但是与3D共培养组相比在每个时间点的水平更低,肝细胞功能基因Cldn-3,Bsep,AFP,G6P和A1AT的mRNA水平也可维持到第23~27天,但其表达水平均低于3D共培养组;2D单一培养和2D共培养标记特异性代谢能力的白蛋白分泌、尿素合成、7乙氧基-O-脱乙基酶和CYP2D6酶活性仅仅可持续1~2周,且水平较低,其后便检测不到,肝细胞功能基因Cldn-3,Bsep,AFP,G6P和A1AT的mRNA水平仅仅在Cldn-3基因的表达方面,在第7d最高,随后降低,第15天时未检测到表达,其余均未检测到表达。(本文来源于《甘肃农业大学》期刊2018-04-01）
原代肝细胞培养论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的检测在位子宫内膜组织、子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)异位病灶组织及正常人子宫内膜组织分离提纯子宫内膜间质细胞及相应间质细胞中纤维化相关蛋白表达水平及差异。方法在严格无菌条件下,刮勺刮取新鲜子宫内膜组织,冰盒运输,采用改良EMs原代细胞培养方法分离培养。并通过细胞爬片免疫组织化学方法,对分离提纯的细胞进行鉴定。蛋白免疫印迹方法检测对比分离提纯的细胞与相应组织纤维化相关蛋白表达的差异。结果 EMs在位内膜组织间质细胞原代分离12例均成功,成功率100%(成功指标:指细胞在培养瓶中贴壁生长并稳定传代)。EMs异位组织分离培养12例成功11例,成功率为91. 7%。正常人子宫内膜组织分离9例成功8例,成功率为88. 9%。人子宫内膜异位症异位间质细胞(human ectopic endometrial stromal cells,HEcESCs)与人子宫内膜异位症在位间质细胞(human eutopic endometrial stromal cells,HEuESCs)及正常人在位子宫内膜间质细胞(human normal endometrial stromal cells,HEn ESCs)普通光镜观察无明显差异。但免疫组织化学、蛋白免疫印迹结果表明:HEcESCs纤维化相关蛋白的表达水平明显高于HEuESCs及HEn ESCs两者纤维化相关蛋白表达水平(P <0. 01),而HEuESCs与HEn ESCs纤维化相关蛋白的表达差异无统计学意义(P> 0. 05),各间质细胞纤维化相关蛋白的表达与其相应组织水平相一致。结论采用改良EMs间质细胞原代培养方法,可以降低EMs子宫内膜间质细胞培养难度,并保持较高的细胞培养成功率。HEcESCs较HEuESCs及HEnESCs纤维化相关蛋白表达明显增高,即子宫内膜异位症患者,异位病灶在组织水平出现了明确的纤维化。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
原代肝细胞培养论文参考文献
[1].马悦悦,朱芷葳,蓝吴涛,李慧锋,张利环.小鼠皮肤组织原代黑色素细胞培养条件的优化[J].黑龙江畜牧兽医.2019
[2].张艳芹,吴迪,邓梦琪,常翔宇,苗劲蔚.子宫内膜异位症原代细胞培养及纤维化相关蛋白检测[J].首都医科大学学报.2019
[3].刘蕾,杨玉洁,王凌,蒋学华.在“叁明治”培养大鼠原代肝细胞中研究利福平及联用丹参酮ⅡA对普伐他汀经BSEP转运的影响[J].中国药理学通报.2019
[4].廖婷,袁雪,荣曦,刘红.原代神经小胶质细胞培养方法的初探[J].广西医科大学学报.2019
[5].曹铮,林锋,卢淑娟,吕孙建,刘莉.中华鳖胚胎组织原代细胞培养技术的研究[J].江苏农业科学.2019
[6].郭丽平.新生大鼠原代肝细胞分离和培养实验研究[D].中国医科大学.2019
[7].沙塔尔·塔瓦库力,古丽热娜·阿布拉,安尼瓦尔·买买提.南疆食管鳞癌原代细胞培养及临床化疗药物敏感性研究与分析[J].临床医药文献电子杂志.2019
[8].刘菲,胡玉婷,刘静,毛若颖,陶欣荣.原代小鼠小胶质细胞培养及尼古丁抑制肿瘤坏死因子α分泌的研究[J].医学信息.2019
[9].李智勇,白雪,蔡慧云.人乳腺癌相关成纤维原代细胞培养的改良方法[J].肿瘤防治研究.2018
[10].张少飞.大鼠原代肝细胞体外叁维培养研究[D].甘肃农业大学.2018