IBD天津野毒株的分离鉴定及综合防治

论文摘要

为了解天津地区IBD的流行状况，更好地指导防控工作，本文以天津9个郊县的212个养殖场自然发病鸡群为研究对象，按照疾病诊断流程对门诊病例进行了确诊并登记在册，随后进行了总结、归纳与分析。结果表明：82.5%的鸡群免疫过1-2次疫苗；11.8%的鸡场出现二次感染；发病日龄主要集中在21日龄-30日龄；一年四季均可发病，主要以5月、6月和9月、10月为主；23.6%混合细菌感染少数混合其他病毒感染；防控过程中存在的问题主要包括免疫程序不合理、日常管理性应激、综合治疗不完善。为进一步研究天津地区毒株的分子特性，为天津地区是否存在超强毒株及变异毒株提供理论依据，本研究从天津地区免疫失败鸡群中分离出2株IBDV，采用RT-PCR扩增出637bp的VP2片段，构建重组质粒PUMT-VP2并测序，与国内外各型毒株进行同源性比较、遗传进化分析。研究结果表明：TJ-hg、TJ-jh分离毒株与vvIBDV UK661、OKYM、HD-96、Harbin-1等的同源性均在95%以上，其中与Harbin-1、GX株同源性达98%以上；分离株与超强毒株的高变区特征性氨基酸完全相同；从进化分析图中可以得出，分离株与超强毒株亲缘关系较近，初步断定该分离株为超强毒株。为了更好地防控传染性法氏囊病，本试验以分离株作为免疫抗原制备抗IBD的卵黄抗体，以脂质体为载体制备成免疫球蛋白脂质体。结果表明：抗体效价达1：128，无菌、无外源病毒污染，4℃保存6个月；结合第二章中IBD在防控中存在的问题，从合理的免疫程序制定、完善的日常管理、发病鸡群的综合治疗三个方面提出有效的措施。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第一章 引言
• 1 本研究的目的和意义
• 2 传染性法氏囊病的基本概述
• 2.1 病原的生物学特性
• 2.2 流行病学及临床症状
• 3 法氏囊病病毒分子生物学特性
• 3.1 基因组结构
• 3.2 编码蛋白及其功能
• 4 IBDV 检测方法
• 4.1 流行病学及临床症状诊断
• 4.2 病理学诊断
• 4.3 电子显微镜检测
• 4.4 病毒分离培养
• 4.5 血清学检测
• 4.6 分子生物学检测
• 5 国内外地方分离株的概况
• 5.1 国外地方分离株研究概况
• 5.2 国内地方分离株研究概况
• 6 IBD 的防控与治疗
• 6.1 IBD 的防控
• 6.2 IBD 的综合防治措施
• 7 卵黄抗体和脂质体概述
• 7.1 卵黄抗体研究及应用
• 7.2 脂质体的研究与应用
• 第二章 天津地区传染性法氏囊病现状
• 1 材料和方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验方法
• 2 试验结果
• 2.1 问诊的结果
• 2.2 临床症状及病理变化
• 2.3 细菌学检查结果
• 2.4 新城疫和禽流感检测结果
• 2.5 病理组织学变化
• 2.6 琼脂扩散试验结果
• 2.7 统计分析结果
• 3 讨论
• 3.1 天津地区 IBD 的流行现状
• 3.2 IBD 防治过程中存在的问题
• 第三章 IBDV 超强毒株的分离与鉴定
• 1 材料和方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验方法
• 2 结果
• 2.1 VP2 扩增及纯化结果
• 2.2 菌落 PCR 电泳结果
• 2.3 测序结果
• 2.4 分离株的序列分析结果
• 3 讨论
• 第四章 抗 IBD 卵黄抗体脂质体的制备及其综合防治措施的制定
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验方法
• 2 试验结果
• 2.1 免疫球蛋白的制备及检测
• 2.2 免疫球蛋白脂质体的制备及检测
• 2.3 综合防治措施的制定
• 3 讨论
• 3.1 卵黄抗体的制备及效果检测
• 3.2 综合防治措施
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 附录
• 攻读学位期间发表的论文