涎腺粘液表皮样癌组织中芳香化酶与增殖细胞核抗原的表达及相互关系

论文摘要

目的:涎腺粘液表皮样癌（mucoepidermoid carcinoma,MEC）在涎腺恶性肿瘤中比较常见,约占所有涎腺肿瘤的12%,涎腺恶性肿瘤的30%。组织病理学上可分为高分化型、中分化型和低分化型,随分化程度的降低肿瘤的恶性程度升高。目前,涎腺MEC 的治疗以手术切除为主。性激素依赖性肿瘤内分泌治疗的成功为涎腺MEC 的治疗提供了新思路。近年来研究表明,涎腺MEC 组织中存在雌激素受体,性激素代谢紊乱可能与涎腺MEC 的发生、发展有关。雌雄激素的转化中,细胞色素P450 芳香化酶（Cytochrome P450 aromatase）起着关键的作用,它能够催化雄激素转化为雌激素,并调节各种雌雄激素的功能。增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）常作为测定细胞增殖水平的指标,其在细胞核内阳性表达的高低与细胞增殖活性密切相关, 通过检测肿瘤细胞的PCNA ,可了解和评价肿瘤组织的增殖活性。在人的乳腺癌组织中,芳香化酶与PCNA 的表达存在明显的相关性,肿瘤组织局部经由芳香化酶催化而来的雌激素对肿瘤细胞的增殖起了重要的作用。本研究采用免疫组织化学方法,对涎腺粘液表皮样癌组织和正常涎腺组织中芳香化酶及PCNA 的表达与免疫定位进行研究,旨在探讨芳香化酶在涎腺MEC 中的作用及其与肿瘤细胞增殖的关系,并为临床上采用芳香化酶抑制剂治疗涎腺MEC 提供参考。方法:选取存档的经福尔马林固定、石蜡包埋的40 例涎腺MEC 组织和17 例正常涎腺组织标本,分为实验组（MEC组）和对照组（正常组）,将每个蜡块切为4-5μm 的切片,共切4 张,1 张HE 染色,1 张作为阴性对照,其余2 张分别行芳香化酶和PCNA 染色。方法如下:石蜡切片常规脱蜡至水;5%H2O2甲醇振洗25 分钟,以封闭内源性过氧化物酶活性;微波抗原修复,92-98℃×15 分钟,室温冷却;正常山羊血清封闭,37℃孵育30 分钟;倾去血清,滴加一抗,4℃过夜;滴加生物素化二抗,37℃孵育25 分钟;滴加辣根酶标记的链酶卵白素,37℃孵育20 分钟;最后DAB 显色,苏木素复染,脱水、透明、封片。除血清封闭步骤外,以上各步后均以PBS 振洗5 分钟×3 次。用已知PCNA 和芳香化酶阳性的乳腺癌标本作为阳性对照;以PBS 代替一抗作为阴性对照。芳香化酶以细胞胞浆中出现淡黄到棕黄色细颗粒状物质,着色高于背景底色为阳性,无阳性细胞为阴性。PCNA 以细胞核内出现棕黄色颗粒,着色高于背景底色为阳性。分级标准:每例切片在（400×）光镜下选取5 个有代表性的视野,按阳性肿瘤细胞数/所计肿瘤细胞数×100%,算出阳性细胞百分比,即增殖指数（proliferating index ,PI）。采用半定量法,按PI 为0 %为阴性（ + ） 、1 %～25 %为弱阳性（ + ） 、26 %～50 %为中度阳性（ + + ） 、>50%为强阳性（ ++ + ） 分级。所有数据经SPSS11.5 统计软件处理完成。组间指标表达率的比较与指标间关系的比较用卡方检验,必要时采用Fisher

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 涎腺粘液表皮样癌组织中芳香化酶与增殖细胞核抗原的表达及相互关系
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 芳香化酶、性激素及其受体与涎腺肿瘤
• 致谢
• 个人简历