谢爱连:耐热嗜碱蛋白酶基因的克隆、表达及其酶学性质分析论文

谢爱连:耐热嗜碱蛋白酶基因的克隆、表达及其酶学性质分析论文

本文主要研究内容

作者谢爱连,林碧瑜,牛丹丹,叶秀云(2019)在《耐热嗜碱蛋白酶基因的克隆、表达及其酶学性质分析》一文中研究指出:碱性蛋白酶是一类重要的工业酶制剂。为进一步提高碱性蛋白酶在高温碱性条件下的活力,增强其工业应用价值,本文从地衣芽胞杆菌CCTCC M2018539中首先通过PCR扩增获得碱性蛋白酶编码基因apr E539并克隆入表达载体pND-113中,在枯草芽胞杆菌WB600中实现碱性蛋白酶AprE539的表达;重组酶AprE539经硫酸铵沉降(30%~70%)、透析、DEAE阴离子交换和超滤获得纯酶,并以SDS-PAGE电泳测定AprE539的分子量大小。结果表明,AprE539的分子量大小为30 kDa。进一步对其酶学性质研究表明:AprE539的最适作用pH为11.0,最适作用温度为65~70℃;在pH6.0~12.0范围内具有较好的稳定性;在60℃保温1 h后酶活剩余70%; Cu2+、Mn2+、Ca2+和Mg2+对酶活有明显促进作用。AprE539在氨基酸序列上仅有2个氨基酸残基与碱性蛋白酶2709存在差异,但其酶学特征差异明显,为后续进一步探究其酶学性质差异性奠定基础。

Abstract

jian xing dan bai mei shi yi lei chong yao de gong ye mei zhi ji 。wei jin yi bu di gao jian xing dan bai mei zai gao wen jian xing tiao jian xia de huo li ,zeng jiang ji gong ye ying yong jia zhi ,ben wen cong de yi ya bao gan jun CCTCC M2018539zhong shou xian tong guo PCRkuo zeng huo de jian xing dan bai mei bian ma ji yin apr E539bing ke long ru biao da zai ti pND-113zhong ,zai ku cao ya bao gan jun WB600zhong shi xian jian xing dan bai mei AprE539de biao da ;chong zu mei AprE539jing liu suan an chen jiang (30%~70%)、tou xi 、DEAEyin li zi jiao huan he chao lv huo de chun mei ,bing yi SDS-PAGEdian yong ce ding AprE539de fen zi liang da xiao 。jie guo biao ming ,AprE539de fen zi liang da xiao wei 30 kDa。jin yi bu dui ji mei xue xing zhi yan jiu biao ming :AprE539de zui kuo zuo yong pHwei 11.0,zui kuo zuo yong wen du wei 65~70℃;zai pH6.0~12.0fan wei nei ju you jiao hao de wen ding xing ;zai 60℃bao wen 1 hhou mei huo sheng yu 70%; Cu2+、Mn2+、Ca2+he Mg2+dui mei huo you ming xian cu jin zuo yong 。AprE539zai an ji suan xu lie shang jin you 2ge an ji suan can ji yu jian xing dan bai mei 2709cun zai cha yi ,dan ji mei xue te zheng cha yi ming xian ,wei hou xu jin yi bu tan jiu ji mei xue xing zhi cha yi xing dian ding ji chu 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自食品工业科技的谢爱连,林碧瑜,牛丹丹,叶秀云,发表于刊物食品工业科技2019年20期论文,是一篇关于地衣芽胞杆菌论文,耐热嗜碱性蛋白酶论文,克隆与表达论文,酶学性质论文,食品工业科技2019年20期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自食品工业科技2019年20期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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