论文摘要
目的:巴戟天为茜草科植物巴戟天属植物巴戟天Morinda officinalis How.的干燥根,是我国著名四大南药之一。始载于《神农本草经》,列为上品,其后历代本草均有记载。巴戟天味甘、辛,性微温,功能补肾阳、强筋骨、祛风湿。临床常用于阳痿遗精、宫冷不孕、风湿痹痛、月经不调、少腹冷痛、筋骨痿软等症。巴戟天在中医药处方中应用广泛,是重要的中药材品种之一。2010年版药典收录巴戟天有四个炮制品种,除了生品巴戟天外,其余均无明确质量标准,无确切的炮制工艺参数,仅凭经验操作,不同操作者及不同厂家的加工品质量不尽一致,影响饮片质量的稳定性。本课题旨在建立一个科学可行的巴戟天炮制工艺规范,确定炮制工艺,制定巴戟天饮片质量标准,解析巴戟天炮制原理。材料与方法:材料:巴戟天药材购自广东德庆巴戟天种植基地,经辽宁中医药大学中药鉴定教研室初正云教授鉴定为茜草科植物巴戟天属植物巴戟天Morinda officinalis How.的干燥根。方法:1.以耐斯糖和总多糖为指标,加盐量、闷润时间和蒸制时间做为考察因素,采用正交实验设计优选盐炙巴戟天炮制工艺。2.以耐斯糖和甘草酸铵为指标,甘草水量、闷润时间和煎煮火力为考察因素,采用正交设计优选甘草水炙巴戟天炮制工艺。3.应用硅胶柱色谱法、凝胶柱层析、重结晶、制备薄层色谱、制备液相色谱法从巴戟天药材中分离纯化化学成分。4.应用液相色谱法比较巴戟天炮制前后蒽醌类化学成分含量的变化情况。5.采用给小鼠连续灌胃方法,并以小鼠脏器重量变化,比较巴戟天炮制前后的补益作用;通过测定小鼠耐缺氧时间,比较巴戟天炮制前后的抗应激作用变化情况。6.以耐斯糖为指标,制定巴戟天炮制品的质量标准。对十批不同产地的巴戟天及其不同炮制品种的杂质、水分、灰分、浸出物等方面进行了测定,制定巴戟天及其炮制品的质量标准。结果:1.确定盐炙巴戟天最佳炮制工艺,即100 g巴戟天在2 %盐溶液100 mL闷润5h后蒸制1h,放凉,干燥。盐用量100:2(药材:盐)。2.确定甘草水炙巴戟天最佳炮制工艺,即100 g巴戟天以1.5倍量(150 mL)甘草水溶液闷润3 h,武火煎煮至甘草水吸尽。甘草量100:6(巴戟天:甘草)。3.应用柱色谱法、制备薄层色谱法、制备液相色谱法从巴戟天药材中分离得到11个化合物,采用UV、IR、NMR和MS等光谱手段鉴定了化合物结构。4.通过液相色谱法比较巴戟天炮制前后蒽醌类化学成分,蒽醌类化学成分含量发生变化。5.通过测定灌胃小鼠的肝脏、肾脏和脾脏的重量,认为盐炙和甘草水炙巴戟天的补益作用均有所增强;通过测定小鼠耐缺氧时间,认为巴戟天炮制后其抗应激能力有所增强。6.巴戟天及其炮制品方法学考察中各项均符合有关规定,巴戟天及其炮制品中耐斯糖含量均应不低于2.0%。结论:1.盐炙巴戟天最佳炮制工艺经过实验室放大实验,测试结果与初试结果基本一致,证明盐炙巴戟天的炮制方法稳定可行。2.甘草水炙巴戟天最佳炮制工艺经过实验室放大实验,测试结果与初试结果基本一致,证明甘草水炙巴戟天的炮制方法稳定可行。3.应用柱色谱法、制备薄层色谱法、制备液相色谱法从巴戟天药材中分离得到11个化合物,采用UV、IR、NMR和MS等光谱手段鉴定了化合物结构。4.巴戟天生品、盐炙品、甘草水炙品均具有一定的补益作用和抗应激能力,且炮制品的作用强于生品。5.以耐斯糖为指标制定的巴戟天、盐炙巴戟天及甘草水炙巴戟天的质量标准稳定可行,可用于评价、控制巴戟天的质量。