论文题目: 制首乌对叠氮钠脑内灌流大鼠的脑保护机制研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 中西医结合基础
作者: 曹春雨
导师: 杜贵友,王巍
关键词: 制首乌,老年性痴呆,叠氮钠,纹状体,微透析,乙酰胆碱,胆碱
文献来源: 中国中医研究院
发表年度: 2005
论文摘要: 1.研究目的与依据 老年性痴呆（Alzheimer’s Disease, AD）是严重危害老年人健康的疾病之一。脑内胆碱能神经退行性变导致AD认知功能缺损的观点,已被广泛接受。乙酰胆碱（Acetylcholine, Ach）是胆碱能神经传导的内源性化学递质,Ach脑内水平的平衡调节对维持学习、记忆、注意力等脑高级功能的正常运作至关重要。脑内微透析（Microdialysis）技术是一种在麻醉或清醒自由活动动物脑内取样的新手段,它的出现为脑内细胞外环境进行在体采样和动态监测提供了方便。 近年来,线粒体氧化磷酸化异常在AD发病中的作用引起人们的重视。叠氮钠（NaN3）作为细胞色素C氧化酶抑制剂,能引起线粒体氧化磷酸化异常。研究表明,脑外给予NaN3可导致动物学习记忆能力下降、胆碱能神经功能下降等与AD的病理改变相似的病变。本研究拟采用脑内灌流0.2%叠氮钠120min的方式造成胆碱能神经功能障碍的模型,为寻找新的治疗痴呆的药物提供可参考的方法。 何首乌是传统的常用的补益中药,有滋补肝肾,延年益寿,健脑调心的功效。已有的研究证实它具有改善学习记忆功能等药理作用,提示何首乌可能对脑有保护作用。本研究中选用已证实有效的剂量的制首乌水煎液进行研究。旨在探讨制首乌对叠氮钠灌流所致的大鼠脑内乙酰胆碱水平下降的调节作用及其机理。为何首乌作为脑保护剂治疗老年人常见的退行性疾病所致的痴呆提供实验依据。 2.研究方法 （1） 微透析技术动态监测脑内Ach/Ch水平变化:微透析技术是利用小分子物质能通过半透膜顺浓度梯度进行扩散的原理为基础进行脑内采样的技术。本研究采用此方法实现对清醒自由活动大鼠脑内细胞外Ach/Ch水
论文目录:
缩略语表
摘要
ABSTRACT
1.文献综述
1.1 何首乌的药理作用的基础研究
1.1.1 何首乌脑保护机制的研究进展
【有效成分研究】
【单味药制剂研究】
【复方研究】
1.1.2 何首乌抗衰老作用的研究
【有效成分研究】
【单味药制剂研究】
【复方研究】
1.1.3 何首乌对心血管系统的作用研究
【有效成分研究】
【单味药制剂研究】
【复方研究】
1.1.4 总结
1.2 微透析技术及其在药理研究中的实践
1.2.1 原理与特点
1.2.2 基本构成及相关探讨
(1) 探针及其套管
(2) 灌流泵
(3) 导管
(4) 收集装置
(5) 测定装置
1.2.3 微透析技术在药理学研究中的应用
1.2.5 几个在微透析试验中应该注意的问题
(1) 回收率
(2) 灌流液的选择和流速
(3) 在进行微透析试验前应该考虑的问题
2.实验研究
前言
2.1 研究方法
2.1.1 微透析操作
2.1.2 高效液相色谱-柱后固定化酶反应器-电化学检测法测定乙酰胆碱和胆碱含量
2.1.3 放射性同位素结合测定胆碱乙酰化酶活力
2.1.4 分光光度法测定乙酰胆碱酯酶活力
2.1.5 放射性配基-受体结合法测定胆碱能M受体结合力
2.1.6 放射性配基-受体结合法测定NMDA受体结合力
2.1.7 分光光度法测定乳酸含量
2.1.8 用Lowry法测定蛋白含量
2.2 叠氮钠脑内灌流致纹状体损伤的动物模型研究
2.2.1 材料和方法
【动物】
【试剂与药品】
【仪器】
【动物分组与处理】
【样品测定】
【数据分析】
2.2.2 试验结果
2.2.2.1 叠氮钠脑内灌流120min对纹状体细胞外Ach水平的影响
2.2.2.2 叠氮钠脑内灌流120min对纹状体细胞外Ch水平的影响
2.2.2.3 叠氮钠脑内灌流120min对纹状体ChAT与AchE活力的影响
2.2.2.4 叠氮钠脑内灌流120min对纹状体NMDA受体和胆碱能M受体结合力的影响
2.2.2.5 叠氮钠脑内灌流120min对纹状体LD含量的影响
2.2.3 讨论
2.2.4 小结
2.3 制首乌对脑内灌流叠氮钠大鼠脑保护机制的研究
2.3.1 材料和方法
【动物】
【试剂与药品】
【仪器】
【动物分组与处理】
【样品测定】
【数据分析】
2.3.2 试验结果
2.3.2.1 制首乌对脑内灌流叠氮钠大鼠纹状体细胞外Ach水平的影响
2.3.2.2 制首乌对脑内灌流叠氮钠大鼠纹状体细胞外Ch水平的影响
2.3.2.3 制首乌对脑内灌流叠氮钠大鼠纹状体的ChAT与AchE活力的影响
2.3.2.4 制首乌对脑内灌流叠氮钠大鼠纹状体的NMDA受体和胆碱能M受体结合力的影响
2.3.2.5 制首乌对脑内灌流叠氮钠大鼠纹状体的乳酸含量的影响
2.3.3 讨论
2.3.4 小结
2.4 结论
作者简历
致谢
参考文献
发布时间: 2005-07-28
参考文献
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