非酶糖基化终产物诱导人视网膜色素上皮细胞表达VEGF的作用及机制研究

非酶糖基化终产物诱导人视网膜色素上皮细胞表达VEGF的作用及机制研究

论文摘要

目的:研究非酶糖基化终产物(Advanced Glycation End Products,AGEs)对人视网膜色素上皮(Retinal Pigment Epithelium,RPE)细胞表达血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)的影响及p44/42丝裂素活化蛋白激酶(Mitogen- Actived ProteinKinase,MAPK)和磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphatidylinositol-3 Kinase,PI3K/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Serine- Threonine Kinase,Akt)信号传导通路在此病理过程中的作用。方法:1.体外培养人RPE细胞株ARPE-19。2.用不同浓度AGEs干预ARPE-19细胞,用ELISA方法检测VEGF蛋白表达水平,细胞免疫荧光法检测磷酸化及总p44/42 MAPK、Akt的表达。3.以不同浓度p44/42 MAPK信号通路阻断剂PD98059或PI3K/Akt信号通路阻断剂LY294002预处理ARPE-19细胞后再用AGEs干预,并测定VEGF水平和p44/42 MAPK和Akt活性。4.同时用PD98059和LY294002处理ARPE-19细胞,AGEs孵育不同时间后检测VEGF的表达。结果:1.AGEs以时间依赖和剂量依赖的方式促使ARPE-19细胞表达VEGF蛋白增加,同时激活p44/42 MAPK和PI3K/Akt信号分子。2.以PD98059阻断p44/42 MAPK通路,ARPE-19细胞磷酸化p44/42MAPK平显著降低,AGEs诱导的VEGF表达水平显著降低,但仍比AGEs对照组表达水平高,且其表达与AGEs的浓度呈正相关(P<0.01)。3.以LY294002阻断PI3K/Akt信号通路具有同样结果。两信号通路间作用无统计学差异(P>0.01)。4.以PD98059和LY294002同时阻断p44/42 MAPK和PI3K/Akt信号通路,ARPE-19细胞中VEGF表达被完全阻断,与AGEs对照组无统计学差异(P>0.01)。结论:1.AEGs能通过p44/42 MAPK和PI3K/Akt信号通路促使人RPE细胞表达VEGF增加。2.p44/42 MAPK和PI3K/Akt信号通路可能是DR患者新生血管形成(Neovascularization,NV)和血管渗漏的主要机制。3.PD98059和LY294002对DR具有潜在的治疗作用。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 缩略词表
  • 前言
  • 第一章 AGEs诱导下RPE细胞与VEGF表达的关系
  • 1.1 材料与方法
  • 1.2 结果
  • 1.3 讨论
  • 第二章 PD98509和 LY294002对AGEs诱导下RPE细胞表达VEGF的影响
  • 2.1 材料与方法
  • 2.2 结果
  • 2.4 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 综述
  • 致谢
  • 在读期间科研工作和论文发表情况
  • 相关论文文献

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