范维:禽腺病毒Ⅰ群4型纤突蛋白亚单位疫苗效力评价及胶体金试纸条的初步研究论文

范维:禽腺病毒Ⅰ群4型纤突蛋白亚单位疫苗效力评价及胶体金试纸条的初步研究论文

本文主要研究内容

作者范维(2019)在《禽腺病毒Ⅰ群4型纤突蛋白亚单位疫苗效力评价及胶体金试纸条的初步研究》一文中研究指出:目的:自2012年以来,鸡包涵体肝炎的暴发呈上升趋势,主要表现为血清4型引起的心包积水和鸡包涵体肝炎。目前,对于4型禽腺病毒抗体快速检测方法比较少,大多数传统检测方法不仅检测复杂,而且不能大规模的应用到生产实践中。对于4型禽腺病毒疫苗的防控,国内尚没有获得许可的商品化禽腺病毒疫苗。因此本实验利用禽腺病毒截短的纤突蛋白作为抗原,由实验室自制亚单位疫苗免疫动物后进行效力评价,为有效防控禽4型腺病毒病提供的新途径,同时利用该蛋白制备禽腺病毒病抗体检测试纸条,为后续禽4型腺病毒病诊断研究提供新方法。方法:通过前期筛选选择对纤突蛋白-2从氨基酸283位到氨基酸479位,获得包含纤突-2抗原蛋白决定簇氨基酸序列,然后利用大肠杆菌原核表达系统进行表达、纯化后得到抗原蛋白,将获得抗原蛋白与佐剂乳化后得到亚单位疫苗,然后免疫3周龄SPF鸡只,采用免疫攻毒法和血清中和法对该亚单位疫苗的效力进行评价,免疫和攻毒后不同时期采血备用。将纤突蛋白-2抗原蛋白应用免疫层析技术制备胶体金试纸条,作为4型禽腺病毒抗体检测方法。结果:4型FAd V原核表达后,纤突-2蛋白浓度3269 μg/mL,纯度可达90%以上。免疫攻毒实验结果表明纤突-2蛋白亚单位疫苗最低免疫剂量能达到2.5/羽,保护率达95%以上;血清中和试验结果表明免疫后分离的鸡只血清中和抗体效价可达1:1000;胶体金试纸条试验结果表明纤突-2抗原蛋白制备的胶体金试纸条能够检测出纤突-2亚单位疫苗免后鸡只的抗体水平,其阳性信号均值在维持在300以上,阴性鸡只信号均值在10~50之间。结论:本实验制备FAd V纤突-2蛋白亚单位疫苗免疫鸡只后具有良好的保护效果,能够保护鸡只免受强毒的攻击。由本实验初步制成了 FAd V纤突-2蛋白免疫胶体金试纸条。

Abstract

mu de :zi 2012nian yi lai ,ji bao han ti gan yan de bao fa cheng shang sheng qu shi ,zhu yao biao xian wei xie qing 4xing yin qi de xin bao ji shui he ji bao han ti gan yan 。mu qian ,dui yu 4xing qin xian bing du kang ti kuai su jian ce fang fa bi jiao shao ,da duo shu chuan tong jian ce fang fa bu jin jian ce fu za ,er ju bu neng da gui mo de ying yong dao sheng chan shi jian zhong 。dui yu 4xing qin xian bing du yi miao de fang kong ,guo nei shang mei you huo de hu ke de shang pin hua qin xian bing du yi miao 。yin ci ben shi yan li yong qin xian bing du jie duan de qian tu dan bai zuo wei kang yuan ,you shi yan shi zi zhi ya chan wei yi miao mian yi dong wu hou jin hang xiao li ping jia ,wei you xiao fang kong qin 4xing xian bing du bing di gong de xin tu jing ,tong shi li yong gai dan bai zhi bei qin xian bing du bing kang ti jian ce shi zhi tiao ,wei hou xu qin 4xing xian bing du bing zhen duan yan jiu di gong xin fang fa 。fang fa :tong guo qian ji shai shua shua ze dui qian tu dan bai -2cong an ji suan 283wei dao an ji suan 479wei ,huo de bao han qian tu -2kang yuan dan bai jue ding cu an ji suan xu lie ,ran hou li yong da chang gan jun yuan he biao da ji tong jin hang biao da 、chun hua hou de dao kang yuan dan bai ,jiang huo de kang yuan dan bai yu zuo ji ru hua hou de dao ya chan wei yi miao ,ran hou mian yi 3zhou ling SPFji zhi ,cai yong mian yi gong du fa he xie qing zhong he fa dui gai ya chan wei yi miao de xiao li jin hang ping jia ,mian yi he gong du hou bu tong shi ji cai xie bei yong 。jiang qian tu dan bai -2kang yuan dan bai ying yong mian yi ceng xi ji shu zhi bei jiao ti jin shi zhi tiao ,zuo wei 4xing qin xian bing du kang ti jian ce fang fa 。jie guo :4xing FAd Vyuan he biao da hou ,qian tu -2dan bai nong du 3269 μg/mL,chun du ke da 90%yi shang 。mian yi gong du shi yan jie guo biao ming qian tu -2dan bai ya chan wei yi miao zui di mian yi ji liang neng da dao 2.5/yu ,bao hu lv da 95%yi shang ;xie qing zhong he shi yan jie guo biao ming mian yi hou fen li de ji zhi xie qing zhong he kang ti xiao jia ke da 1:1000;jiao ti jin shi zhi tiao shi yan jie guo biao ming qian tu -2kang yuan dan bai zhi bei de jiao ti jin shi zhi tiao neng gou jian ce chu qian tu -2ya chan wei yi miao mian hou ji zhi de kang ti shui ping ,ji yang xing xin hao jun zhi zai wei chi zai 300yi shang ,yin xing ji zhi xin hao jun zhi zai 10~50zhi jian 。jie lun :ben shi yan zhi bei FAd Vqian tu -2dan bai ya chan wei yi miao mian yi ji zhi hou ju you liang hao de bao hu xiao guo ,neng gou bao hu ji zhi mian shou jiang du de gong ji 。you ben shi yan chu bu zhi cheng le FAd Vqian tu -2dan bai mian yi jiao ti jin shi zhi tiao 。

论文参考文献

  • [1].传染性支气管炎病毒纤突蛋白、核蛋白基因的克隆、表达及其在抗体检测中的初步应用[D]. 李中华.华中农业大学2006
  • [2].Ⅰ群禽腺病毒纤突knob区域基因序列同源性分析及病毒部分生物学特性研究[D]. 陈跃.扬州大学2009
  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自内蒙古农业大学的范维,发表于刊物内蒙古农业大学2019-10-08论文,是一篇关于禽腺病毒论文,纤突蛋白论文,亚单位疫苗论文,胶体金试纸条论文,内蒙古农业大学2019-10-08论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自内蒙古农业大学2019-10-08论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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