SH2A基因在PKC信号传导通路中的作用

论文摘要

前言 SH2结构域是最早鉴定的调节信号转导蛋白相互作用的蛋白质组件,它可以特异性识别磷酸化酪氨酸短序列,介导受体酪氨酸蛋白激酶信号转导途径。含有SH2组件的一类蛋白质组成了SH2信号蛋白家族,一般可分为两大类:一类是除了SH2组件外还具有催化结构域的酶蛋白,如PI-3K,PLC-γ,Src;而另一类是无催化活性的接头蛋白,这类蛋白含有其它组件,和细胞内信号蛋白连接起来,如Grb2。近年来,又有一类SH2信号蛋白被发现,这类蛋白唯有SH2结构域,无其它任何蛋白质组件,通过竞争其它SH2信号蛋白的结合位点,阻止下游信号募集,行使控制信号传导的负调控因子的功能。SH2结构域是细胞内信号传导的重要组件,主要参与酪氨酸蛋白激酶相关受体介导的信号转导过程,是上游受体与下游信号分子联系的分子基础。人染色体8p22区是一个富含疾病基因的区域,是癌基因和抑癌基因的研究热点。在前期工作中,运用外显子捕获和外显子拼接等策略,我们在这一区域克隆了SH2A基因,是SH2信号蛋白家族的新成员,并构建了SH2A基因的真核重组表达载体pcDNA3.1-SH2A和pEGFP-SH2A,通过细胞转染、激酶比活性检测、亚细胞定位、表达分析和流式细胞仪等方法对其功能进行了初步的研究。在多种肿瘤癌组织及癌旁组织中表达差异提示,它与肿瘤发生发展有一定的相关性。除此之外,对SH2A基因的确切功能尚无报道。为了进一步明确SH2A基因表达产物在细胞信号转导途径中的功能,我们构建了pcDNA3.1-SH2A之结构域缺失型pcDNA3.1-SH2A-Del及pcDNA3.1-SH2A之SH2结构域点突变型pcDNA3.1-SH2A-Mut,试图通过这两种方法使SH2结构域丧失功能,通过细胞转染、激酶比活性测定及尝试构建稳定表达细胞株等手段从另一个角度证明SH2A基因在PKC信号转导途径中的抑制性作用。

论文目录

• 一、摘要
• 1.中文论著摘要
• 2.英文论著摘要
• 二、英文缩略语
• 三、论文
• 1.前言
• 2.实验材料与方法
• 3.实验结果（附论文图片）
• 4.讨论
• 5.结论
• 6.本研究创新性的自我评价
• 7.参考文献
• 四、附录
• 1.综述
• 2.在学期间科研成绩
• 3.致谢
• 4.个人简介