大花蕙兰高频再生及工厂化生产体系的建立

论文摘要

大花蕙兰（Cymbidium）又名虎头兰,是一种观赏价值很高的洋兰,其花朵硕大,枝叶俊秀,深受兰花爱好者的欢迎,也是春节消费的高档盆花。但是由于大花蕙兰多为杂交品种,种子繁殖无法保持其品种特性,且结实率也相当低,分株能力又很弱,因而繁殖系数极低,繁殖速度慢,远远不能满足工厂化生产的需求。正是因为繁殖系数不高,许多名贵品种短缺,导致了近几年大花蕙兰价格不断攀升。因此,建立和完善大花蕙兰高频再生和工厂化生产体系是解决这一问题的关键环节。本实验以大花蕙兰假鳞茎上新生侧芽为外植体,通过单因素和正交实验,研究了大花蕙兰侧芽离体再生不定芽的主要影响因素,确定了大花蕙兰高频再生的一系列技术参数组合,建立了高频稳定的大花蕙兰再生生产体系。结果表明：以大花蕙兰假鳞茎上新生侧芽为外植体,最佳的灭菌方法为：将芽体冲洗干净后,用70%酒精浸泡30s,0.1%Hgcl2浸泡5min,500mg/LPVP浸泡6min后接种。污染率18.33%,褐化率33.33%,成活率36.66%。最适宜的原球茎诱导培养基配方是MS+BA 2.0mg/L+NAA 1.0mg/L+琼脂8g/L+蔗糖30g/L+活性炭2.0g/L,pH:5.4。诱导率平均达到63.3%。原球茎增殖最适宜的培养基的配方是MS+BA 1.Omg/L+NAA 0.5mg/L+IBA 1.Omg/L+琼脂6g/L+蔗糖30g/L+马铃薯汁150g/L+活性炭2g/L,pH:5.4.最适宜的大花蕙兰生根壮苗的培养基的配方是1/2MS+NAA 0.1mg/L+GA3 1.Omg/L+蔗糖20g/L+马铃薯汁100g/L+琼脂8g/L,pH:5.4。大花蕙兰最适宜的一次性成苗培养基的配方是1/2MS+BA 1.Omg/L+NAA O.lmg/L+马铃薯汁100g/L+琼脂8g/L+蔗糖30g/L+活性炭2g/L,pH:5.4。移栽前炼苗锻炼能显著提高移栽成活率,适宜的炼苗时间为室内炼苗8d（闭瓶炼苗5d+开瓶炼苗3d）,实验发现采用无纺布全封闭覆盖能有效提高移栽成活率。植料（天然火山石+直径石+唐基兰石+唐基泥）是较好的移栽基质,成活率可达91.5%。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• Abstract
• 1. 前言
• 1.1 大花蕙兰的形态特征和生长特点
• 1.2 大花蕙兰的产业现状及前景
• 1.3 大花蕙兰组织培养研究进展
• 1.3.1 种子无菌萌发
• 1.3.2 诱导原球茎
• 1.3.3 丛生芽诱导
• 1.4 大花蕙兰驯化移栽的研究进展
• 1.5 课题研究目的和意义
• 2 材料与方法
• 2.1 外植体来源
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 初代培养
• 2.2.2 继代培养
• 2.2.3 壮苗生根
• 2.2.4 兰花菌根液对原球茎的增殖及小苗壮苗生根的影响
• 2.2.5 一次性成苗
• 2.2.6 大花蕙兰试管苗驯化及移栽技术研究
• 3 结果与分析
• 3.1 初代培养
• 3.1.1 最佳灭菌方法的确定
• 3.1.2 筛选原球茎诱导培养基
• 3.1.3 试管苗基部切块诱导原球茎的效应
• 3.2 原球茎增殖培养
• 3.2.1 BA、NAA、IBA对原球茎增殖的影响
• 3.2.2 琼脂含量对原球茎增殖的影响
• 3.3 小苗的壮苗生根
• 3.3.1 不同浓度的NAA对壮苗生根的影响
• 3.3.2 不同浓度的BA对壮苗生根的影响
• 3.3.3 不同有机物质对壮苗生根的影响
• 3.3.4 NAA、GA3、马铃薯汁配合使用对壮苗生根的影响
• 3.4 兰花菌根液对原球茎的增殖及小苗壮苗生根的影响
• 3.5 一次性成苗
• 3.6 试管苗的驯化与移栽
• 3.6.1 不同基质对试管苗移栽成活的影响
• 3.6.2 不同覆盖材料对试管苗移栽成活率的影响
• 3.6.3 喷施营养液对试管苗生长的影响
• 4 结论与讨论
• 4.1 结论
• 4.1.1 大花蕙兰组织培养条件
• 4.1.2 外植体的选取
• 4.1.3 最佳灭菌方法
• 4.1.4 原球茎诱导的最佳培养基配方
• 4.1.5 原球茎增殖的最佳培养基配方
• 4.1.6 壮苗与生根
• 4.1.7 一次性成苗
• 4.1.8 试管苗的移栽
• 4.2 讨论
• 4.2.1 无菌体系的建立
• 4.2.2 褐化问题
• 4.2.3 植物激素对大花蕙兰高频再生体系建立的影响
• 4.2.4 大花蕙兰工厂化生产体系建立的几个问题
• 4.2.5 兰花菌根液对原球茎的增殖及壮苗生根的促进作用
• 4.3 展望
• 参考文献
• 附图
• 详细摘要
• Abstract