论文题目: 金钗石斛的化学成分与生物活性研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 药物化学
作者: 张雪
导师: 姚新生,王乃利
关键词: 金钗石斛,倍半萜,联苄,芴酮,酚酸,抗氧化活性自由基清除法,氧自由基清除能力法,抑制大鼠巨噬细胞释放活性,免疫抑制活性,构效关系
文献来源: 沈阳药科大学
发表年度: 2005
论文摘要: 金钗石斛（Dendrobium nobile Lindl．）为兰科石斛属多年生附生草本植物，其入药始载于《神农本草经》，被列为上品，具有清热养阴、生津益胃、润肺止咳等功效，是药用范围较广的名贵中药，享有“仙草”之美誉。本文综合运用硅胶柱层析、ODS柱层析、Sephadex LH-20柱层析以及反相HPLC等多种色谱学分离手段，对金钗石斛60％乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物的化学成分进行了系统研究，从中分离得到化合物53个。通过理化性质和现代波谱学手段(UV、IR、MS、1H-NMR、13C-NMR和2D-NMR)鉴定了它们的结构，分别为：dendronobilin A（1）*，dendronobilin B（2）*，dendronobilin C（3）*，dendronobilin D（4）*，dendronobilin E（5）*，dendronobilin F（6）*，dendronobilin G（7）*，dendronobilin H（8）*，dendronobilin I（9）*，10β，13，14-trihydroxyalloaromadendrane （10），10，12-dihydroxypicrotoxane （11），6α，10，12-trihydroxypicrotoxane （12），dendrobiumane A（13），bullatantirol （14），dendrodensiflorol （15），dendrobane A（16），nobilin A（17）*，nobilin B（18）*，nobilin C（19）*，nobilin D（20）*，nobilin E（21）*，crepidatin（22），鼓槌联苄（chrysotobibenzyl）（23），dendrobin A（24），鼓槌石斛素（chrysotoxine）（25），石斛酚（moscatilin）（26），gigantol（27），流苏菲（fimbriatone）（28），毛兰菲（confusarin）（29），flavanthrinin （30），2，5-二羟基-4，9-二甲氧基菲（2，5-dihydroxy-4，9-dimethoxyphenanthrene）（31），3，7-二羟基-2，4-二甲氧基菲（3，7-dihydroxy-2，4-dimethoxyphenanthrene）（32），nobilone （33）*，dendroflorin （34），丁香脂素（syringaresinol）（35），松脂素（pinoresinol）（36），5’-甲氧基-（-）-松脂素（medioresinol）（37），lirioresinol-A（38），2-甲基蒽醌（2-methylanthraquinone）（39），nobilate（40）*，丁香酸（syringicacid）（41），2-羟基苯丙醇（2-hydroxyphenylpropanol）（42），香草醛（vanillin）（43），罗布麻宁（apocynin）（44），松柏醛（coniferyl aldehyde）（45），丁香醛（syringaldehyde）（46），丁香乙酮（syringylethanone）（47），对羟基苯甲醛（p-hydroxybenzaldehyde）（48），3-羟基-4-甲氧基苯乙醇（3-hydroxy-4-methoxyphenylethanol）（49），α-羟基丁香丙酮（α-hydroxysyringylethanone）（50），二氢松柏醇（dihydroxyconiferyl alcohol）（51），对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid）（52），对羟基苯丙酸（p-hydroxyphenylpropionic acid）（53）。53个化合物中包括倍半萜类化合物16个，联苄类化合物11个，菲类化合物5个，芴酮类化合物2个，木脂素类化合物4个，蒽醌类化合物1个，酚酸类化合物14个。其中化合物1-9，17-21，33，40为新化合物，化合物14，30-31，38-39，41-42，44-53为首次从该属植物中分离得到，化合物13，15，22，23，25，28，29，32，34-37，43为首次从该种植物中分离得到。采用DPPH自由基清除法（DPPH法）对金钗石斛中分离得到的各单体化合物清除自由基的能力进行了考察。结果表明，金钗石斛中分离得到的53个化合物中，有24个化合物显示不同程度的清除DPPH自由基的活性。菲类、联苄类和木脂素类化合物多显示很好的活性，芴酮类和酚酸类化合物中部分结构活性较好。其中绝大部分化合物的活性都强于目前食品工业中常用的合成抗氧化剂BHT，有9个化合物显示出比Vc更强或相当的活性。同时采用氧自由基清除能力法（ORAC法）对金钗石斛中分离得到的绝大部分单体化合物清除自由基的能力进行了考察。结果表明，进行ORAC活性测试的49个化合物中，有30个化合物显示不同程度的氧自由基清除活性，其中绝大部分的活性都强于VC。菲类、联苄类、木脂素类和芴酮类化合物普遍显示较好的活性，酚酸类化合物中部分结构活性较强。采用Griess法考察了金钗石斛中分离得到的绝大部分单体化合物抑制大鼠巨噬细胞NO释放的活性。结果表明，进行测试的46个化合物中，有12个化合物显示不同程度的抑制活性，其中5个化合物显示出比阳性药resveratrol更强或相当的活性。菲类、联苄类和芴酮类化合物多具有不同程度的活性，木脂素类和酚酸类化合物中只有个别结构具有较弱的活性。采用ConA刺激小鼠脾细胞增殖的模型，考察了金钗石斛中分离得到的大部分单体化合物对T淋巴细胞增殖的影响。结果初步表明，进行测试的37个化合物中，有10个化合物显示不同程度的抑制T淋巴细胞增殖的活性，其中化合物29（毛兰菲）显示很强的抑制作用。本实验结果同时表明糖基部分是倍半萜糖苷类化合物重要的活性基团，并首次发现石斛中的菲类、联苄类、酚酸类等芳香化合物具有该方面的药理作用。对金钗石斛中分离得到的部分化合物还进行了“对KCl诱导的豚鼠心室肌细胞胞浆[Ca2+]i升高的影响”的测试，结果初步表明化合物11，22，25，41，45对KCl诱导的心室肌细胞[Ca2+]i升高有抑制作用，提示这些化合物可能对高血压、心绞痛、心律失常、心肌梗死等与钙通道关系密切的疾病有一定的预防和治疗作用。本文在化学和生物活性研究的基础上，证实了金钗石斛抗氧化活性的作用物质基础为菲类、联苄类、芴酮类、木脂素类和酚酸类等富含酚羟基的化合物，初步表明了抑制NO释放活性的作用物质基础为菲类、联苄类和芴酮类化合物，同时发现菲类和联苄类化合物还具有免疫抑制作用，由此表明中药石斛中大量存在的上述化合物可通过清除体内过剩自由基、抑制NO过度释放和抑制过高的免疫反应等多方面的调节作用而对多种疾病起到预防和治疗作用。在DPPH法和ORAC法活性测试的基础上，对两种方法活性结果与化合物结构的相关性进行了探讨。对于DPPH法，化合物结构中酚羟基的数目和位置、羟基邻位甲氧基的数目和侧链取代基的性质都会对活性产生重要的影响。而ORAC法中活性和结构之间的相关性并不明显。
论文目录:
摘要
ABSTRACT
缩略语说明
第一章 前言
第二章 金钗石解的化学成分研究
2.1 化学成分的分离
2.2 从金钗石解中分离得到的化合物的名称、编号和结构
2.3 化合物的结构鉴定
2.3.1 倍半萜类化合物的结构鉴定
2.3.2 联苄和菲类化合物的结构鉴定
2.3.3 芴酮、木脂素和蒽醌类化合物的结构鉴定
2.3.4 酚酸类化合物的结构鉴定
第三章 金钗石解的生物活性研究
3.1 抗氧化活性
3.1.1 DPPH自由基清除法
3.1.1.1 实验原理
3.1.1.2 实验方法
3.1.1.3 实验结果
3.1.1.4 小结
3.1.2 氧自由基清除能力法
3.1.2.1 实验原理
3.1.2.2 实验方法
3.1.2.3 实验结果
3.1.2.4 小结
3.2 抑制大鼠巨噬细胞 NO释放活性
3.2.1 实验原理
3.2.2 实验方法
3.2.3 实验结果
3.2.4 小结
3.3 对 Con A刺激的小鼠脾 T淋巴细胞增殖的影响
3.3.1 实验方法
3.3.2 实验结果
3.3.3 小结
3.4 对 KCl诱导的豚鼠心室肌细胞[Ca~(2+)]_i升高的影响
3.4.1 实验方法
3.4.2 实验结果
3.4.3 小结
第四章 实验部分
4.1 实验仪器与材料
4.1.1 实验用仪器
4.1.2 实验用材料
4.1.3 植物材料
4.2 化合物结构鉴定数据
第五章 小结与讨论
参考文献
致谢
附录
1. 个人简历
2. 学术成果
3. 附图
发布时间: 2006-12-14
参考文献
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- [3].胡椒基修饰的噻唑类化合物的合成与生物活性研究[D]. 伍智林.湖南大学2016
- [4].荞麦中具有醌还原酶诱导活性的化合物的分离鉴定及活性研究[D]. 邱荣英.西北农林科技大学2015
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