裙带菜褐藻多糖硫酸酯对SMMC-7721肿瘤细胞凋亡的诱导及对BEL-7402的迁移抑制作用

论文摘要

目的：研究裙带菜褐藻多糖硫酸酯的抗肿瘤作用,并对其机理进行初步研究,为抗肿瘤机理的进一步研究奠定理论基础。研究裙带菜褐藻多糖硫酸酯的抗肿瘤转移作用；观察裙带菜褐藻多糖硫酸酯对肿瘤细胞生长、趋化运动和侵袭转移生物学行为的影响。方法：1.将不同浓度裙带菜褐藻多糖硫酸酯作用于肿瘤细胞,应用MTT法检测裙带菜褐藻多糖硫酸酯在体外对人肝癌SMMC-7721细胞的毒性作用。2.将5mg/ml多糖溶液作用SMMC-7721,分别作用24h,48h,72h,Annexin V-FITC／PI双标记流式细胞法检测裙带菜褐藻多糖硫酸酯诱导肿瘤细胞凋亡的效果。3.将5mg／ml多糖溶液作用SMMC-7721,分别作用24h,48h,用免疫细胞化学、免疫荧光方法检测裙带菜褐藻多糖硫酸酯作用细胞前后凋亡关键因子Survivin,Bcl-2的表达变化,进一步分析裙带菜多糖的作用机制。4.将5mg／ml多糖溶液作用SMMC-772l,分别作用24h,用Western blot的方法检测检测裙带菜褐藻多糖硫酸酯作用细胞前后凋亡关键因子Survivin,Bcl-2的表达变化,进一步分析裙带菜多糖的作用机制。5.应用划痕愈合实验和Boyden chamber模型实验检测裙带菜褐藻多糖硫酸酯作用BEL-7402细胞后,细胞的迁移能力的变化。结果：1.MTT结果显示裙带菜多糖对肝癌SMMC-7721的增殖有明显的抑制作用,并且与多糖的浓度及作用时间有密切的依赖关系。48h的20.0mg／ml浓度组的抑制率与5-Fu组的抑制率最为相近。2.流式细胞术结果显示这种存活的抑制与多糖对肿瘤细胞的凋亡诱导有明显的关系。细胞的凋亡率随时间的增大而增大。表明裙带菜多糖能够抑制肿瘤细胞的凋亡,而且这种诱导作用也与多糖的作用时间正相关。3.免疫细胞化学和免疫荧光实验结果显示裙带菜褐藻多糖硫酸酯作用肿瘤细胞后,Survivin、Bcl-2的表达量下降4.Western blot结果显示裙带菜褐藻多糖硫酸酯作用肿瘤细胞后Survivin、Bcl-2的表达量下降,进而引起肿瘤细胞的凋亡。5.划痕实验及Boyden chamber模型实验结果显示裙带菜褐藻多糖硫酸酯能够抑制BEL-7402的迁移能力,减少肿瘤细胞向周围组织渗透。结论：本实验证明了裙带菜褐藻多糖硫酸酯具有抑制肿瘤细胞增殖的作用,并且能够促进肿瘤细胞的凋亡,为进一步研究其抗肿瘤的生物学活性及其机制的研究提供了有效的前期基础。亦证明了裙带菜褐藻多糖硫酸酯能够抑制肿瘤细胞的迁移能力,减少肿瘤细胞向周围组织渗透。

论文目录

• 一、摘要
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、正文
• （一） 前言
• （二） 第一部分 裙带菜褐藻多糖硫酸酯对肿瘤细胞的作用
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• （三） 第二部分 裙带菜褐藻多糖硫酸酯对BEL-7402的迁移抑制作用
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• （四） 结论
• （五） 参考文献
• 四、致谢