田间成年“碧秀”苦瓜优株离体快繁体系研究

论文摘要

苦瓜（Momordica charantia L.）为葫芦科苦瓜属1年生攀援草本植物,具有药食两用等特点,栽培面积和消费量很大,是世界各国普遍栽培的重要蔬菜作物之一。离体培养是苦瓜进行无性繁殖和种质资源保存的有效途径,也是进行基因转化研究的基础。本文以田间选择得到的成年“碧秀”苦瓜优株枝条的茎段和顶芽为材料,对影响苦瓜离体培养的诸因素进行了系统的研究,成功建立了苦瓜离体茎段直接不定芽途径再生体系,获得再生植株。主要结果如下:（1） 0.1%升汞（HgCl2）处理6-8min为苦瓜外植体最佳消毒时间;外植体的最佳取材时间为6～7月,其次为5月;取材部位选择苦瓜枝条的第3～5节茎段,1.0 cm长度带一个节间,即我们定义的中部枝条。（2）适当高浓度的6-BA有利于苦瓜不定芽萌动,但同浓度KT不适于不定芽萌动。筛选出直接不定芽诱导最佳培养基为:MS+BA4.0 mg╱L+IBA0.1mg╱L,直接不定芽诱导率达41.46%。（3）附加丝瓜伤流液,可以显著提高芽体的启动时间及萌发率,浓度为10%（v/v）时,萌动率达61.21%,萌动时间仅为6d。（4）继代增殖试验中通过增殖倍数、平均株高分析表明苦瓜茎段的最佳增殖培养基为:MS+BA1.0mg╱L+KT1.0mg╱L+IBA0.1mg/L。（5）添加硝酸银（AgNO3）后,增殖系数大大增加,植株株高却受到抑制,AgNO3浓度为1.0mg╱l,增殖系数可达6.09。（6）不定芽增殖系数随着活性炭（AC）的加入而显著下降,但AC对于不定芽的伸长具有明显的促进作用。（7）丝瓜伤流液在提高增殖系数的同时也增加愈伤组织的发生量。不同碳源、水源对增殖影响不大,一定条件下,可以考虑自来水替代蒸馏水。（8）结合生根率、平均根数及平均根长,诱导苦瓜不定芽的最佳生根培养基为:1/2MS+IBA0.2或0.3mg/L+20g/L蔗糖。（9）添加AgNO3、AC并不能促进组培苗不定根的诱导。（10）以滤纸和丝瓜瓤作为支持体的液体培养使萌根时间显著缩短,但此条件下形成的根系脆性大,移栽时容易发生断根。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 1 文献综述
• 1.1 苦瓜离体培养主要研究进展
• 1.1.1 愈伤组织培养
• 1.1.2 胚状体诱导
• 1.1.3 茎尖培养
• 1.1.4 原生质体培养
• 1.1.5 器官培养
• 1.2 高效离体再生系统的影响因素
• 1.2.1 遗传因素
• 1.2.2 外植体
• 1.2.3 生理状态
• 1.2.4 植物生长调节剂
• 1.2.5 其他
• 2 本研究的目的和意义
• 3 试验材料与方法
• 3.1 试验材料
• 3.2 技术路线
• 3.3 试验方案及方法
• 3.3.1 外植体
• 3.3.2 启动培养
• 3.3.3 继代和增殖
• 3.3.4 生根培养
• 3.4 培养条件
• 3.5 试验结果观察与数据统计分析
• 3.5.1 材料建立
• 3.5.2 继代和增殖
• 3.5.3 生根培养
• 3.5.4 数据统计分析方法
• 4 结果与分析
• 4.1 材料建立
• 4.1.1 不同消毒时间和材料部位对外植体污染率的影响
• 4.1.2 植物生长调节剂对不定芽萌动的影响
• 4.1.3 不同季节取材对外植体建立的影响
• 4.1.4 不同材料部位、大小及摆放方式对不定芽启动的影响
• 4.1.5 丝瓜伤流液对不定芽启动的影响
• 4.1.6 其他附加物对不定芽启动的影响
• 4.2 继代和增殖
• 4.2.1 不同植物生长调节剂对增殖的影响
• 4.2.2 硝酸银浓度对增殖的影响
• 4.2.3 丝瓜伤流液对增殖的影响
• 4.2.4 活性碳对增殖的影响
• 4.2.5 不同碳源及水源对增殖的影响
• 4.3 生根培养
• 4.3.1 不同激素组合对生根的影响
• 4.3.2 其他因素对苦瓜不定根发生的影响
• 4.4 炼苗
• 5 讨论
• 5.1 各种因素对苦瓜初代培养的影响
• 5.2 植物生长调节剂对诱导和增殖效果的影响
• 5.3 不同添加物质对苦瓜组织培养效果的影响
• 5.4 各种因素对苦瓜不定根诱导的影响
• 6 小结
• 7 进一步研究的内容
• 参考文献
• 致谢
• 附图（PLATE）