猪和大鼠胃肠道FoxO蛋白表达分析

论文摘要

Forkhead box（Fox）蛋白调控着细胞的分化、增殖、免疫和衰老。大多数与Fox蛋白相关的研究都局限在培养的细胞和啮齿动物中。本实验利用免疫组织化学，免疫荧光，Wes tern-blot，放射免疫测定技术等方法检测猪和大鼠胃肠道是否存在Fox01、Fox03a和Fox04蛋白的表达以及其变化规律。1．Fox0’蛋白在猪胃肠道的定位本实验对4头杜长大三元杂交成年猪采用常规免疫组化的方法检测猪胃肠道各部位Fox0家族成员的定位。实验就Fox0蛋白在胃底部、幽门部、无腺部、十二指肠、空肠、回肠、结肠、盲肠、直肠定位进行了具体分析。结果表明：Fox04存在于胃和肠各部的黏膜层，Fox03a主要存在与各部的固有层和肌层，然而Fox01在胃肠各部都没检测到。本实验的结果提示，猪胃肠道中Fox蛋白的表达有其固定的模式，而Fox04是成年猪胃肠道中分布的主要forkhead转录因子。这些结果提示FoxO蛋白在猪胃肠道组织和细胞中呈特异性表达。2．猪肠道Fox04依赖年龄性的定位基于以上实验发现Fox04是成年猪胃肠道主要的forkhcad box转录因子，本实验为进一步探测Fox04蛋白随猪发育程度在肠道内的变化规律，将0d（新生），30d（断奶一周），160d（性成熟阶段），180d（成年阶段）杜长大三元杂交母猪作为研究对象，再次通过免疫组织化学研究Fox04蛋白在不同年龄阶段（不同发育阶段）的肠道内的表达情况。3．大鼠胃肠道Fox04蛋白年龄依赖性的表达为了验证Fox04蛋白在其他哺乳动物胃肠道内也表现年龄依赖的表达，实验采用了啮齿类动物大鼠为模型进行研究。实验以21d（断奶），2月（性成熟），6月（青年），SD大鼠的十二指肠为研究研究对象，利用免疫组化，免疫荧光以及Western-blot检测不同年龄大鼠胃肠道Fox04的表达。实验结果表明，大鼠十二指肠Fox04蛋白的表达有年龄依赖特异性，定位特异性和组织特异性，为研究Fox04在动物生长发育过程中的表达变化规律以及进一步探讨胃肠道细胞生长和凋亡的机制打下基础。以上结果表明，Fox04蛋白是成年猪胃肠道内主要表达的forkhead box转录因子；Fox04蛋白作为PI3K／PKB信号通路下游的底物在猪和大鼠的胃肠道上有着不同的表达与机体的发育水平，代谢情况有着密切的联系。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 引言
• 第一部分 文献综述
• 第一章 PI3K/PKB信号通路在胃肠癌症的作用机制
• 1.胃癌
• 1.1 P110α亚基的突变
• 1.2 PI3K/AKT影响Fas引起的凋亡
• 1.3 HGF及其受体c-met的研究
• 2.结直肠癌
• 2.1 P85α亚基的突变
• 2.2 P110亚基
• 2.2.1 P110α亚基的突变
• 2.2.2 P110β亚基
• 2.2.3 P110γ亚基
• 2.3 AKT
• 2.4 LY294002及其它抑制剂
• 3 小肠上皮细胞的增殖
• 第二章 FOXO转录因子调控哺乳动物的细胞周期和凋亡
• 1 FOXO调控细胞凋亡的信号通路
• 1.1 FOXO调控的细胞凋亡途径——FasL,Bim通路
• 2 FOXO对细胞周期的信号通路调控
• 2.1 FOXO对CDKI的调控
• kip1的信号通路'>2.1.1 依赖p27^kip1的信号通路
• kip1的信号通路'>2.1.2 非依赖p27^kip1的信号通路
• 2.2 FOXO对cyclin的调控
• 2.2.1 调控cyclin G2
• 2.2.2 调控cyclin B和PLK
• 2.3 FOXO调控的其他cyclin
• 2.3.1 p130
• 2.3.2 GADD45
• 2.4 FOXO与其他调节细胞周期通路和细胞凋亡的蛋白质
• 2.4.1 NF-κB
• 2.4.2 p53
• 参考文献
• 第二部分 实验研究
• 第三章 FoxO4是猪胃肠道中分布的主要Forkhead转录因子
• 1.材料和方法
• 1.1 试剂
• 1.2 动物
• 1.3 免疫组织化学
• 2.结果
• 2.1 胃中FoxO4,FoxO1和FoxO3a的定位情况
• 2.1.1 胃底腺
• 2.1.2 无腺区
• 2.1.3 幽门区
• 2.2 小肠中FoxO4,FoxO1和FoxO3a的定位情况
• 2.2.1 十二指肠
• 2.2.2 空肠
• 2.2.3 回肠
• 2.3 大肠中FoxO4,FoxO1和FoxO3a的定位情况
• 2.3.1 结肠
• 2.3.2 盲肠
• 2.3.3 直肠
• 3.小结
• 参考文献
• 第四章 猪肠道FoxO4依赖年龄性的定位
• 1.材料和方法
• 1.1 动物
• 1.2 试剂
• 1.3 免疫组化
• 2.结果
• 2.1 FoxO4在不同年龄阶段肠道内的定位
• 2.1.1 FoxO4在不同年龄阶段十二指肠的定位
• 2.1.2 FoxO4在不同年龄阶段回肠的定位
• 2.1.3 FoxO4在不同年龄阶段结肠的定位
• 3.小结
• 参考文献
• 第五章 大鼠胃肠道FoxO4蛋白年龄依赖性的表达
• 1.材料和方法
• 1.1 动物
• 1.2 试剂
• 1.3 免疫组织化学
• 1.4 Western-blot
• 2.结果
• 2.1 十二指肠FoxO4定位
• 2.2 十二指肠FoxO4表达
• 3.小结
• 参考文献
• 全文结论
• 创新点
• 致谢
• 研究生期间获奖及论文发表情况