邢蓉（重庆市西郊医院400050）
【摘要】目的比较国产佐米曲普坦胶囊与进口佐米曲普坦片在健康人体内的药代动力学过程,并评价其生物等效性。方法18名健康男性志愿者随机双交叉单剂量口服佐米曲普坦胶囊或片剂10mg,用高效液相色谱法测定血药浓度，3p97软件包计算二者的药动学参数和生物等效性。结果单剂量口服佐米曲普坦胶囊与片剂的药-时曲线均为口服吸收一室模型。t1/2ke分别为(3.72±1.77)、(3.81±1.44)h,tmax分别为(1.42±0.35)、(1.33±0.51)h,cmax分别为(21.68±8.67)、(21.86±10.38)μg/L,AUC(0→t)分别为(75.94±31.34)、(78.40±28.21)(μg?h)/L。佐米曲普坦胶囊的相对生物利用度为(96.86±3.36)%,经方差分析、双单侧t检验及(1-2α)置信区间法统计分析,2种制剂药动学参数无显著性差异(P>0.05)。结论国产佐米曲普坦胶囊与进口佐米曲普坦片剂具有生物等效性。
【关键词】佐米曲普坦生物等效性高效液相色谱法
本文采用HPLC法测定血浆中佐米曲普坦的浓度,双交叉设计,对佐米曲普坦胶囊及其片剂的药动学及生物等效性进行了研究,为临床安全、有效用药提供参考依据。
1材料与对象
1.1试药
国产佐米曲普坦胶囊(简称ZOLC)、进口佐米曲普坦片(简称ZOLT)、佐米曲普坦标准品(简称ZOL),均由重庆普惠药物科技发展有限公司提供。内标替硝唑(简称TDZ,)由重庆华邦制药股份有限公司提供;甲醇、磷酸二氢钠、磷酸等均为分析纯,乙腈、二氯甲烷为色谱级,水为三蒸水。
1.2仪器
高效液相色谱(HPLC)仪,包括LC-10泵系统、SPD-10A型可调波长紫外检测器和C-R7Aeplus积分仪(日本岛津公司)。
1.3受试对象
18名中国健康男性志愿者,汉族,年龄(22.9±1.3)a,体重(59±5)kg,身高(171±6)cm。试验前全面体格检查证实为健康者,无药物过敏史。受试前2wk内未服过任何其它药物。受试者了解受试须知后,签署知情同意书。
2方法与结果
2.1给药方法及血样采集
采用随机交叉试验设计,单剂量口服给药。将18名受试者随机分为A、B组,每组9名,在I、II阶段分别交叉服药,交叉服药前经1wk清洗期。试验前禁食12h后,于次日晨8:00空腹吞服制剂10mg(200ml温开水服药)。服药当日统一进标准餐。受试期间禁止剧烈活动、吸烟、饮酒及含酒精、咖啡因类饮料,试验期间禁止使用一切非试验药物,并由医护人员进行健康监护。采集服药后0.25、0.5、0.75、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0、10.0h静脉血3.0mL,分离血浆,低温保存(-20℃),及时测定。间隔1wk后交换口服另一种制剂,按前述方法采取静脉血。
2.2色谱条件
色谱柱:HypersilC18预柱;固定进样环50μL;流动相:乙腈-磷酸盐缓冲液(0.05moL/LNaH2PO4,用H3PO4调pH至5.0)(V/V)15:85;流速:1.2mL/min;紫外检测波长:223nm;柱温:室温;内标:TDZ。
2.3标准液的配制
精密称取ZOL19.2mg,用适量甲醇溶解,置于25mL容量瓶中,加甲醇至刻度,混匀,即得浓度为768ng/L的ZOL贮备液,使用时再用甲醇将标准贮备液稀释为一定浓度的工作溶液。精密量取TDZ29.3mg,用适量甲醇溶解,置于50mL容量瓶中,加甲醇至刻度,混匀,即得浓度为586μg/L的TDZ标准贮备液,使用时再用甲醇将稀释为一定浓度的工作溶液。
2.4样品处理与测定
取受试者血浆1.0mL,加内标TDZ100μL(1172μg/L),加0.2moL/LNa2CO30.1mL,加二氯甲烷4mL,旋摇1min,离心(3000r/min)2min,取有机层置于40℃水浴用氮气吹干,加入100μL流动相复溶,进样50μL.记录色谱图。
在本试验所采用的色谱条件下,血浆中ZOL和内标峰形良好,且不受血浆内源性物质的干扰。
2.5标准曲线绘制与最低检测浓度
在空白血浆中分别添加ZOL使血药浓度相当于61.44、30.72、15.36、7.68、3.84、1.92μg/L,按2.4项下方法进行处理和测定,所得数据经回归,得标准曲线方程,即ZOL峰面积/TDZ峰面积比(Y)与ZOL浓度(X)的关系为Y=0.0628X-0.1122,线性范围为1.92～61.44μg/L(r=0.9906)。最低检测浓度为1.92μg/L(RSD=9.33%,n=5)[2]。
2.6回收率及日内与日间精密度试验
于空白血浆中加入高、中、低(30.72、15.36、7.68μg/L)3种浓度的ZOL液,评价本法测定血浆中ZOL含量的回收率及日内、日间精密度(RSD)。结果,3种浓度血浆中药物的回收率平均为90.62%～105.56%,日内、日间RSD均<9%。
2.7药动学结果
2.7.1药-时曲线18名受试者交叉口服ZOLC或ZOLT10mg后,2组平均血药浓度-时间曲线(AUC)详见图1。
Time/h
图118名志愿者单剂量口服2种佐米曲普坦制剂后的平均药-时曲线
2.7.2药动学参数采用3p97计算机软件(中国数学药理学会),计算各个体的药动学参数,Cmax、tmax以实测值计算,AUC按梯形面积法计算,取值范围0～T(h)。采用各受试者的ZOLC与ZOLT的AUC(0～T)分别计算相对生物利用度(F)。
测定结果显示：2种制剂药动学符合一室血管外吸收给药模型。2种制剂在人体内吸收、分布、消除较为接近,ZOLC的相对生物利用度为(96.86±13.36)%。
2.7.3生物等效性评价用双单侧t检验分析2种制剂的Cmax和AUC(0→T),高、低侧t检验均有显著性差异(P<0.05),1-2α(α=0.05)置信区间分别为90.6%～101.3%和92.0%～111.5%,表明2种制剂的Cmax和AUC(0→T)均为生物等效(α=0.05)。tmax用非参数统计分析(Wilcoxon法),结果表明,2种制剂间差异无显著性(P>0.05)。由上述结果可知,2种制剂具有生物等效性。
2.8不良反应监测结果
在临床试验I、II周期过程中,全体受试者口服2种制剂后10min左右,均口述有不等程度头晕、头痛、乏力等症状,1h后逐渐减轻,至2h症状基本消失;其中服药后30min左右有4例口述有肩酸痛,有5例自感颈酸痛,咀嚼肌酸痛,2例吞唾液有阻力感。卧床休息,未予特殊处理,均于2h～3h后缓解。
3讨论
文献报道[1]佐米曲普坦长期服用耐受性好,24h内最大用药量可达10mg。虽然试验中全体受试者均出现了不同程度的不良反应,但均能耐受,未经处理,峰浓度过后逐渐减轻或消失。
参考文献
[1]SpencerCM,GunasekaraNS.HillsC1Zolmitriptan:areviewofitsuseinmigraine[J].Drugs,1999,58(2):347.
[2]曾经泽.生物药物分析[M].北京:北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社,1998:230.