抗真菌抗生素产生菌的筛选及初步鉴定

论文摘要

植物病害会造成农作物的产量下降,品质降低,每年给粮食生产造成巨大的损失。真菌引起的植物病害位居植物3类病害之首,其危害大于细菌病害和病毒病害。生物防治植物病害的方法被认为是一条有效的途径。农用抗生素作为生物农药的重要类群,因其具有低毒、高效、选择性强、残留时间短、无公害等优点,正日益受到重视。本论文筛选出一种能产高效抗真菌抗生素的菌,对菌种及其发酵条件和发酵产物进行初步研究,以期为进一步寻找及开发新型、高效、天然无毒的生物农药提供参考。以油菜菌核病菌和灰葡萄孢作为指示菌建立筛选模型,筛选抗真菌抗生素产生菌,经过初筛与复筛,得到一株对油菜菌核病菌和灰葡萄孢均有很好抑菌效果的菌株a1。从形态学特征、生理生化特性和16S rDNA等方面对菌株a1进行鉴定,分析结果表明菌株a1为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。通过单因素实验结合响应面法对菌株a1进行发酵优化,确定菌株a1的最佳培养条件为：培养基：乳糖28.2g/L,酵母膏28.4g/L,氯化钠5g,pH9。发酵条件：摇床转速150rpm,接种量12%,发酵温度28.4℃,发酵时间24.5h,装液量50mL,种龄24h。初步研究了菌株a1的所产物质的理化性质,结果表明菌株a1所产的抗菌物质为胞外产物,具有很强的耐酸性,在光照和中性条件下活性稳定,在温度高于100℃,紫外光照射和碱性条件下不稳定。通过萃取实验发现,抗菌物质为酸性物质,易溶于水。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 目录
• 第一章 文献综述
• 1.1 植物真菌病害危害
• 1.2 真菌病害防治方法
• 1.3 国内外防治植物病害研究进展
• 1.4 多烯类抗生素
• 1.4.1 多烯类抗生素的结构和性质
• 1.4.2 多烯类抗生素的作用机理
• 1.4.3 主要的几种多烯类抗生素
• 1.5 本论文的研究背景、内容及意义
• 参考文献
• 第二章 抗真菌抗生素产生菌的筛选与鉴定
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 菌种
• 2.1.2 培养基
• 2.1.3 药品与试剂
• 2.1.4 实验仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 样品的采集
• 2.2.2 微生物的分离和筛选
• 2.2.3 选取目的菌株
• 2.2.4 考察目的菌株的遗传稳定性
• 2.2.5 目的菌株的纯化与保存
• 2.2.6 形态学特征
• 2.2.7 生理生化鉴定
• 2.2.8 16S rDNA序列分析
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 微生物的分离与筛选
• 2.3.2 选取目的菌株
• 2.3.3 菌株al的遗传稳定性
• 2.3.4 形态学特征
• 2.3.5 生理生化特征
• 2.3.6 16S rDNA序列分析
• 2.4 本章小结
• 参考文献
• 第三章 菌株al发酵条件的优化
• 3.1 材料
• 3.1.1 菌种
• 3.1.2 培养基
• 3.1.3 药品与试剂
• 3.1.4 实验仪器
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 发酵液的制备
• 3.2.2 抑菌活性的测定
• 3.2.3 考察培养基组成对菌株al产活性物质的影响
• 3.2.4 考察培养条件对菌株al产活性物质的影响
• 3.2.5 响应面法优化实验
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 培养基组成对菌株al产活性物质的影响
• 3.3.2 培养条件对菌株al产活性物质的影响
• 3.3.3 响应面法优化菌株al的发酵条件
• 3.4 本章小结
• 参考文献
• 第四章 菌株al的抗菌活性物质理化性质初步研究
• 4.1 材料和方法
• 4.1.1 菌种
• 4.1.2 培养基
• 4.1.3 材料
• 4.1.4 实验仪器
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 发酵液的制备
• 4.2.2 抑菌活性的测定
• 4.2.3 确定抗菌物质产生部位试验
• 4.2.4 稳定性实验
• 4.2.5 乙酸乙酯萃取实验
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 抗菌物质产生部位的确定
• 4.3.2 活性物质稳定性
• 4.3.3 乙酸乙酯萃取实验
• 4.4 本章小结
• 参考文献
• 第五章 结论与展望
• 5.1 结论
• 5.2 展望
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文