山东省食源性沙门氏菌监测及分型研究

论文摘要

研究目的：通过对2003-2010年山东省食源性沙门氏菌监测资料的分析,了解食品中沙门氏菌污染水平和特征,确定分离菌株的血清型分布和优势血清型,掌握食品沙门氏菌污染动态变化,为有针对性的制定食品安全措施提供依据；了解山东省食源性沙门氏菌对抗生素的敏感程度,比较不同血清型沙门氏菌耐药表型差异和多重耐药分布,建立食源性沙门氏菌耐药图谱数据库；应用PFGE技术对食源性沙门氏菌进行分子生物学分析,比较不同来源沙门氏菌同源性,对山东省食源性沙门氏菌进行分子分型,建立沙门氏菌PFGE指纹图谱数据库,为沙门氏菌食品污染及食物中毒溯源提供技术保障。研究方法：采用G84789.4-2003标准方法和全国食源性致病菌检测方法,对2003-2010年山东省8个监测点8类食品进行沙门氏菌监测,分离鉴定菌株并进行血清学分型；采用美国临床实验室标准化研究所CLSI标准推荐微量肉汤稀释法对食源性沙门氏菌进行16种抗生素敏感实验,质控菌株为coli.ATCC25922;利用限制性内切酶Xba I酶切沙门氏菌基因组,进行脉冲场凝胶电泳,通过BioNumerics 6.1对电泳图谱进行同源性比较。研究结果：2003-2010年,监测生牛奶、生猪肉、生羊肉、生牛肉、生禽肉、散熟肉、蔬菜、水产品等八类食品3335份,检出沙门氏菌96株,检出率为2.88%,其中,生禽肉和生猪肉的沙门氏菌检出率最高,分别达到7.44%和7.37%,生牛奶中未检出沙门氏菌,各年度沙门氏菌检出率以2010年最高,为4.48%,2006年最低,为1.47%,其他各年度沙门氏菌检出率依次为,2009年4.38%、2008年3.79%、2007年2.46%、2004年2.07%、2003年1.69%、2005年1.61%,各监测点以临沂检出率最高6.67%,聊城最低0.74%；检出的96株沙门氏菌,确定血清型94株,分属4个群6个亚群15种血清型。其中肠炎（S. Entertidis）和德比（S. Derby）为优势血清型,分别检出51株（53.13%）和18株（18.75%）。126株不同来源沙门氏菌（食品监测菌株96株、鸡专项菌株15株和食物中毒食品检出菌株15株）对14种抗生素均有不同程度的耐药,产生耐药表型39个；对头孢吡肟（5.37%）耐药率最低,对萘啶酸的耐药率最高（达61.90%）,其次为四环素（33.33%）、氨苄青霉素（31.75%）、磺胺嘧啶（26.19%）；耐药分布以萘啶酮酸单耐菌株和全敏菌株为主,分别占35.71%和26.19%,10耐及以上菌株占10.52%；肠炎沙门氏菌菌多重耐药菌株三个时间段呈上升趋势。PFGE指纹图谱聚类分析显示,沙门氏菌分属31个基因型别,72个PFGE基因指纹图谱,其中肠炎沙门氏菌可分为12个型别,40种PFGE（?）旨纹图谱,同源性在51.24%-100%之间,其中XB17型肠炎沙门氏菌39株,占69.42%,XB20和XB22型为4株,占7.02%,XB23型3株,占5.26%,XB21型2株,占3.51%,其余型别均为1株。食物中毒事件中检出的7株肠炎沙门氏菌,均属于XB17型,其中6株存在与食品监测检出沙门氏菌相同PFGE指纹图谱,剩余菌株与其他图谱相似度也在90%以上。结论：监测结果显示,山东省监测食品沙门氏菌污染状况较为严重,呈现逐年上升趋势,优势血清型为肠炎和德比。沙门氏菌菌株以单耐和敏感为主,但在食源性动物饲养中广泛应用的萘啶酮酸、四环素、青霉素等抗生素耐药率较高,多重耐药菌株特别耐10种以上抗生素的菌株开始逐年增加。沙门氏菌PFGE分子分型型别和图谱种类,以XB17型为主要型别,初步建立沙门氏菌PFGE指纹谱图数据库,为探索山东省食源性沙门氏菌分子分型、调查食源性疾病暴发流行及确定和溯源细菌性传染病传染源提供依据。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 符号说明
• 前言
• 第一部分 食源性沙门氏菌监测及血清分型研究
• 1、材料与方法
• 2、结果
• 3、讨论
• 第二部分 食源性沙门氏菌耐药研究
• 1、材料与方法
• 2、结果
• 3、讨论
• 第三部分 食源性沙门氏菌PFGE分型研究
• 1、材料与方法
• 2、结果
• 3、讨论
• 参考文献
• 附表
• 致谢
• 硕士期间发表论文情况
• 学位论文评阅及答辩情况表