沙利度胺抑制卵巢癌细胞增殖及血管生成实验研究

沙利度胺抑制卵巢癌细胞增殖及血管生成实验研究

论文摘要

缺氧是实体肿瘤常见现象,肿瘤在缺氧状态下,一方面通过扩张血管、增加血流量来改善氧供,一方面则促进新生血管的生成来获得更多的氧气。缺氧是介导血管生成,进一步促使肿瘤生长、转移的一个关键信号。目前已知沙利度胺通过抑制肿瘤细胞生长及血管生成作用达到抗肿瘤生长和转移治疗效果。但沙利度胺对卵巢癌抑制作用研究较少,本实验目的是研究沙利度胺对卵巢癌细胞生长及血管生成的抑制作用,探讨其对卵巢癌的治疗效果及其对肿瘤缺氧下VEGF的上游调控因子的作用。第一部分沙利度胺对缺氧下人卵巢癌SKOV3细胞增殖情况影响目的:模拟体内肿瘤生长缺氧环境,观察沙利度胺对不同缺氧时间下人卵巢癌SKOV3细胞的增殖情况影响,探讨沙利度胺对人卵巢癌细胞SKOV3生长抑制作用。方法:将处于对数生长期的SKOV3细胞分别给予不同浓度沙利度胺处理12小时后,再各自缺氧0小时、8小时、16小时、24小时,用MTT法检测缺氧对细胞增殖的影响。结果:24小时内的缺氧,卵巢癌细胞增殖基本不受影响(P<0.05);各缺氧组中不同浓度沙利度胺可以显著抑制卵巢癌细胞增殖(P<0.05),这种抑制作用随缺氧时间的延长、给药浓度的增加而增强(P<0.05)。结论:沙利度胺可以显著抑制卵巢癌细胞的增殖,且呈时间、浓度效应关系。第二部分沙利度胺抑制人卵巢癌SKOV3细胞血管生成表达作用及机制第一节缺氧诱导下人卵巢癌SKOV3细胞血管内皮生长因子的表达及机制目的:研究缺氧对体外培养人卵巢癌SKOV3细胞血管内皮生长因子表达的影响及机制。方法:建立SKOV3细胞体外缺氧培养模型,经不同时间缺氧处理后(8h、16h、24h),使用免疫荧光染色半定量分析缺氧下SKOV3细胞HIF-1α及VEGF蛋白表达情况。结果:免疫荧光半定量证实缺氧后HIF-1α蛋白与VEGF蛋白表达相对常氧条件下差异有显著性(P<0.05),HIF-1α蛋白常氧下表达少,缺氧8小时即显著增加,且随缺氧时间的增加呈时间效应关系(P<0.05),VEGF蛋白常氧下即有表达,缺氧后表达增加,并随缺氧时间增加呈时间效应关系(P<0.05),相关分析证实VEGF蛋白表达与HIF-1α蛋白表达呈正相关关系。结论:缺氧可以显著增加卵巢癌细胞VEGF蛋白的表达,而HIF-1α是缺氧条件下介导VEGF蛋白表达的重要转录因子。第二节沙利度胺对缺氧下人卵巢癌SKOV3细胞血管内皮生长因子的表达影响及机制目的:根据第一节实验结果选择合适的缺氧模型条件,进一步研究沙利度胺对缺氧下体外培养人卵巢癌SKOV3细胞血管内皮生长因子表达的影响及机制。方法:建立SKOV3细胞体外缺氧培养模型,给予不同浓度沙利度胺处理12小时,再进行缺氧处理16小时后,使用免疫荧光染色半定量分析SKOV3细胞HIF-1α及VEGF蛋白表达变化,使用RT-PCR测定VEGF mRNA表达情况。结果:免疫荧光半定量结果显示常氧及缺氧情况下不同浓度沙利度胺均可明显抑制HIF-1α、VEGF蛋白表达(P<0.05),抑制作用随沙利度胺浓度增加而增强(P<0.05),且缺氧下沙利度胺对HIF-1α蛋白表达抑制与其对VEGF蛋白表达的抑制呈正相关关系。RT-PCR显示常氧及缺氧下沙利度胺均可抑制VEGF mRNA的表达。结论:沙利度胺可以显著抑制卵巢癌SKOV3细胞的VEGF蛋白表达,缺氧下沙利度胺主要通过抑制HIF-1α对VEGF的调控作用以达到抗血管生成作用。

论文目录

  • 英汉缩略语名词对照
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 论文正文:沙利度胺抑制卵巢癌细胞增殖及血管生成实验研究
  • 前言
  • 第一部分 沙利度胺对缺氧下人卵巢癌SKOV3 细胞增殖情况影响
  • 1 材料和方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 4 小结
  • 参考文献
  • 第二部分 沙利度胺抑制人卵巢癌SKOV3 细胞血管生成表达作用及机制
  • 第一节 缺氧诱导下人卵巢癌SKOV3 细胞血管内皮生长因子的表达及机制
  • 1 材料和方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 4 小结
  • 参考文献
  • 第二节 沙利度胺对缺氧下人卵巢癌 SKOV3 细胞血管内皮生长因子的表达影响及机制
  • 1 材料和方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 4 小结
  • 参考文献
  • 全文总结
  • 附图
  • 文献综述
  • 致谢
  • 攻读硕士期间发表的文章
  • 相关论文文献

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